【摘要】：蛋白酶激活受體-2(Proteinase-actived receptors 2,PAR-2)是位于細胞膜表面的G蛋白藕聯(lián)受體,該受體受激活后可引起一系列關于腫瘤生長、侵襲、轉(zhuǎn)移等方面的生物學行為。食管癌是人類最常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)生機制目前還不太明確,是當前食管癌研究中重要的一個方面。本課題第一部分探討PAR-2激動劑對人食管鱗癌細胞系EC-109 c-fos、CyclinD1、PCNA表達的影響,以及PAR-2 shRNA的負調(diào)控效應。實驗結(jié)果顯示PAR-2激動劑SLIGKV能促進食管癌細胞EC-109 c-fos、CyclinD1、PCNA mRNA及蛋白的表達水平;PAR-2基因表達下調(diào)的食管癌穩(wěn)定細胞系PAR-2shRNA EC109中c-fos、CyclinD1、PCNA mRNA及蛋白表達均降低,表明PAR-2shRNA能負調(diào)控食管癌細胞EC-109 c-fos、CyclinD1、PCNA的表達。課題第二部分探討PAR-2激動及抑制對食管癌細胞MAPK通路ERK1蛋白表達及活性的影響,以及對細胞內(nèi)[Ca~(2+)]c濃度變化的影響。實驗結(jié)果顯示PAR-2激動劑SLIGKV能促進食管癌細胞ERK1 mRNA的表達水平,對ERK1總蛋白表達水平無影響,但能促進p-ERK1蛋白的表達,使ERK1蛋白活性增加;利用PAR-2 shRNA抑制PAR-2能下調(diào)ERK1 mRNA及p-ERK1蛋白的表達,但對ERK1總蛋白表達無影響。另研究表明PAR-2激動劑SLIGKV能使食管癌細胞胞內(nèi)[Ca~(2+)]c濃度增加,抑制PAR-2則能抑制激動劑誘導的胞內(nèi)[Ca~(2+)]c濃度的升高。課題第三部分探討MAPK通路抑制劑對食管癌細胞增殖、細胞周期的影響,以及對c-fos、CyclinD1、PCNA表達的影響。MTT實驗結(jié)果顯示MAPK通路抑制劑PD98059能抑制食管癌細胞EC-109的增殖,呈濃度依賴性;經(jīng)PD98059最有效藥物濃度預處理食管癌細胞后,其能明顯抑制SLIGKV誘導的細胞增殖,使癌細胞生長曲線下移;流式細胞術實驗結(jié)果顯示抑制劑PD98059能使G0/G1期食管癌細胞百分比增加,S期、G2/M期細胞百分比及細胞增殖指數(shù)降低。另結(jié)果顯示抑制劑PD98059能下調(diào)c-fos、CyclinD1、PCNA mRNA及蛋白的表達水平。綜上所述,PAR-2激動劑能促進食管鱗癌細胞系EC-109 c-fos、CyclinD1、PCNA、p-ERK1的表達,增加ERK1蛋白的活性,使癌細胞內(nèi)[Ca~(2+)]c的濃度上升,PAR-2 shRNA則能負調(diào)控c-fos、CyclinD1、PCNA、p-ERK1的表達,降低ERK1蛋白的活性;MAPK通路抑制劑呈濃度依賴性的抑制食管癌細胞EC-109的增殖,且能明顯抑制激動劑SLIGKV誘導的細胞增殖,使食管癌細胞生長曲線下移,另可增加G0/G1期食管癌細胞百分比,降低S期、G2/M期細胞百分比及細胞增殖指數(shù),下調(diào)c-fos、CyclinD1、PCNA mRNA及蛋白的表達水平。以上結(jié)果表明,PAR-2可能是通過ERK1 MAPK通路及Ca~(2+)途徑來調(diào)控腫瘤增殖相關分子及細胞周期相關分子c-fos、CyclinD1、PCNA的表達,進而來調(diào)節(jié)食管癌細胞的細胞周期,通過調(diào)控細胞周期來調(diào)控癌細胞的增殖,從而促進食管癌的發(fā)生。
【圖文】：

14的影響。1：對照組；2：激動劑組；3：反激動劑組：4：PAR-2 shRNA 組Fig 1-1 mRNA expressions of PAR-2、c-fos、CyclinD1、PCNA after activation andinhibition of PAR-2.1:blank control;2:PAR-2 agonist group;3:PAR-2 anti-agonistgroup; 4:PAR-2 shRNA group1.2.2 Western-blot 法檢測各組 PAR-2、c-fos、CyclinD1、PCNA 蛋白的表達結(jié)果

醫(yī)科大學博士學位論文 一、PAR-2 對食管鱗癌細胞 c-fos、CyclinD1、PCNA 表達的影響-2 PAR-2 激動劑對 PAR-2、c-fos、CyclinD1、PCNA 蛋白表達變化的影響。照組；2：激動劑組；3：反激動劑組：4：PAR-2 shRNA 組1-2 Protein expressions of PAR-2、c-fos、CyclinD1、PCNA after activation andition of PAR-2.1:blank control;2:PAR-2 agonist group;3:PAR-2 anti-agonistp; 4:PAR-2 shRNA group
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R735.1

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 本刊編輯部;;更正[J];中國癌癥防治雜志;2011年03期

2 沈忠英,沈健,陳銘華,蔡維佳,陳彩云;氧化砷誘導食管癌細胞系細胞凋亡的研究(英文)[J];汕頭大學醫(yī)學院學報;2001年01期

3 王柏春,閻承慧,李野,王巨,禹亮,王勝發(fā),傅松濱;轉(zhuǎn)化生長因子β1抑制食管癌細胞的生長[J];基礎醫(yī)學與臨床;2004年05期

4 謝仰民;謝劍君;周飛;侯健;曹君君;許麗艷;李恩民;;激活轉(zhuǎn)錄因子3的過表達對食管癌細胞生長的抑制作用[J];癌變.畸變.突變;2009年04期

5 任建華;李瑞明;李超;熊奎;駱志國;;放射抗拒食管癌細胞系的建立及抗拒機制研究[J];中國腫瘤;2009年11期

6 張廣健;高蕊;張明鑫;金鑫;梁鵬;王健生;;放療分割劑量對食管癌細胞耐藥基因表達的影響[J];細胞與分子免疫學雜志;2010年02期

7 ;吃咖喱有助殺死食管癌細胞[J];中華中醫(yī)藥學刊;2011年05期

8 鐘z�，朱恩鳞E饃�，隆拱D�，李国菤e撕錐，

本文編號：2555141