發(fā)布時間：2019-10-09 18:45

【摘要】：目的:研究miR143的表達(dá)水平與甲狀腺乳頭狀瘤患者(PTC)預(yù)后、細(xì)胞生物學(xué)特性之間的關(guān)系,并對相應(yīng)機制進行探討。方法:首先使用QPCR檢測30例PTC患者癌組織、癌旁組織中miR143的表達(dá)水平,并同時調(diào)取TCGA數(shù)據(jù)庫中PTC患者生存信息,并檢測miR143對生存率與轉(zhuǎn)移率的影響。PTC細(xì)胞系IHH-4隨后分別轉(zhuǎn)染CON與p Genesil1-miR143載體,48 h后QPCR檢測miR143的變化水平,CCK8法檢測細(xì)胞增殖、Annexin V/PI法檢測細(xì)胞凋亡、Transwell法檢測細(xì)胞遷移。隨后檢測2013年4月至2016年12月之間收治的200名甲狀腺乳頭狀癌患者血清中miR143、IL-10、IFN-γ,并計算皮爾森積矩系數(shù),最后,將患者分為miR143高表達(dá)與低表達(dá)組,并計算IL-10、IFN-γ的表達(dá)量。結(jié)果:miR143在癌旁組織與癌組織中的相對表達(dá)量分別為(1.0±0.15)vs(0.12±0.06),miR143的表達(dá)同時與患者生存率、轉(zhuǎn)移率密切相關(guān)(P0.001)。IHH-4p Genesil1-miR143與CON組的miR143表達(dá)水平分別為8.63±0.71 vs 1.0±0.06,在48 h時,p Genesil1-miR143組增殖指數(shù)顯著低于CON(P0.01),p Genesil1-miR143組與CON組Annexin V+陽性細(xì)胞比例分別為(40±7.2)vs(2±0.38),遷移細(xì)胞數(shù)的比值分別為(40±7.2)vs(2±0.38),以上P值均小于0.001。在PTC患者中,IL-10、IFN-γ中,r2分別為-0.4,0.62(P0.001),miR143低表達(dá)組與高表達(dá)組IFN-γ的表達(dá)量分別為(8±0.23)vs(11.2±0.12),IL-10(12±3.1)vs(8.43±0.44)(P0.05)。結(jié)論:miR143在PTC患者中低表達(dá),且與患者預(yù)后、生存相關(guān)。miR143的高表達(dá)使得IHH-4細(xì)胞系增殖減弱、凋亡增加、遷移降低,同時miR143的表達(dá)與患者的免疫功能相關(guān)。
【圖文】：

43在PTC患者中高表達(dá)，且與預(yù)后相關(guān)在提取30例PTC患者癌組織及相應(yīng)癌旁組織ＲNA后，使用QPCＲ檢測miＲ143在ＲNA水平的表達(dá)差異，結(jié)果表明miＲ143在癌旁組織中的相對表達(dá)量為(1.0±0.15)，顯著高于癌組織中(0.12±0.06)，P＜0.001，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(圖1A)，同時將TCGA中甲狀腺乳頭狀癌患者按照平均值將患者miＲ143高表達(dá)組與低表達(dá)組，對miＲ143表達(dá)水平與預(yù)后之間關(guān)系進行生存分析后發(fā)現(xiàn)，miＲ143高表達(dá)使得患者整體生存率(圖1B、2B)與轉(zhuǎn)移率大大降低，P＜0.001，表明miＲ143對患者預(yù)后以及轉(zhuǎn)移均有顯著影響。圖1miＲ143在PTC患者中表達(dá)Fig．1ExpressionofmiＲ143inPTCpatientsNote:A.QPCＲtodetectthemiＲ143expressionlevelincancertissuesandadjacenttissues(＊＊＊.P＜0.001);B.Analysisofoverallsur-vivalrateinhighexpressiongroupandlowexpressiongroupbasedonmiＲ-143expression;C.Analysisofmetastasis-freesurvivalrate.2.2miＲ143調(diào)控IHH-4細(xì)胞增殖、凋亡、遷移CON與pGenesil1-miＲ143轉(zhuǎn)染PTC細(xì)胞系IHH-448h后，使用QPCＲ檢測miＲ143表達(dá)水平的變化，結(jié)果表明IHH-4pGenesil1-miＲ143表達(dá)水平為(8.63±0.71)，顯著高于對照組的(1.0±0.06)(圖2A)，隨后使用CCK8檢測增殖能力的變化后發(fā)現(xiàn)，在48h時，，pGenesil1-miＲ143組增殖指數(shù)顯著低于CON，且在72h時差異進一步擴大，P＜0.01(圖2B)，而在轉(zhuǎn)染48h時，使用AnnexinV/PI法檢測細(xì)胞凋亡的變化后發(fā)現(xiàn)，pGenesil1-miＲ143組AnnexinV+陽性細(xì)胞比例為(40±7.2)，顯著高于CON組的(2±0.38)(圖2C)，而使用Transwell評估細(xì)胞遷移能力的變化后發(fā)現(xiàn)，CON組遷移細(xì)胞數(shù)的比值為(1±0.12)，顯著高于pGenesil1-miＲ143組的(0.21±0.10)(圖2D)，以上P值均小于0.001，差異具有

)，顯著高于對照組的(1.0±0.06)(圖2A)，隨后使用CCK8檢測增殖能力的變化后發(fā)現(xiàn)，在48h時，pGenesil1-miＲ143組增殖指數(shù)顯著低于CON，且在72h時差異進一步擴大，P＜0.01(圖2B)，而在轉(zhuǎn)染48h時，使用AnnexinV/PI法檢測細(xì)胞凋亡的變化后發(fā)現(xiàn)，pGenesil1-miＲ143組AnnexinV+陽性細(xì)胞比例為(40±7.2)，顯著高于CON組的(2±0.38)(圖2C)，而使用Transwell評估細(xì)胞遷移能力的變化后發(fā)現(xiàn)，CON組遷移細(xì)胞數(shù)的比值為(1±0.12)，顯著高于pGenesil1-miＲ143組的(0.21±0.10)(圖2D)，以上P值均小于0.001，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。圖2miＲ143調(diào)控IHH-4細(xì)胞增殖、凋亡、遷移Fig．2miＲ143regulatedIHH-4cellproliferation，apopto-sisandmigrationNote:A.CONandpGenesil1-miＲ143plasmidsweretransfectedintoIHH-4for48h，andqPCＲwasperformedtodetectthechangeofmiＲ-143expression(＊＊＊.P＜0.001);B.CONandpGenesil1-miＲ143plasmidsweretransfectedintoIHH-4for48h，andCKK8wasperformedtoassessthechangeofcellproliferation(＊＊.P＜0.01，＊＊＊.P＜0.0001);C.AnnexinV/PIassaytodetectthechangeofcellapoptosis;D.Transwellassaytodetectthechangeofcellmigration.·1864·中國免疫學(xué)雜志2017年第33卷
【作者單位】： 福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院甲狀腺外科;
【基金】：福建省科技計劃項目(No.2017Y0036)
【分類號】：R736.1

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本文編號：2546904