【摘要】：目的:探討P53抑制肺腺癌A549細胞干細胞特性及其機制。方法:收集2014年3月至2015年12月解放軍第85醫(yī)院胸外科手術切除的30例非小細胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)患者癌組織及癌旁組織,采用Real-time PCR檢測NSCLC組織和癌旁組織中miR-145的表達。構建人P53基因的真核表達載體(pcDNA3.1-P53)和突變載體[pcDNA3.1-P53R273H(CGT-CAT)],設計靶向P53基因的siRNA,分別轉染A549細胞;細胞分為對照轉染組(Vector或NCsiRNA)和實驗組(Flag-P53或P53-siRNA);Western blotting檢測P53蛋白過表達和干擾效率,Real-time PCR檢測OCT4和miR-145的表達,熒光雙報告基因和Western blotting技術檢測證實A549細胞中干細胞多能性調(diào)節(jié)基因(OCT4)為miR-145的靶標分子。結果:NSCLC組織中miR-145的表達水平明顯低于癌旁組織[(2.31±0.13)vs(3.51±0.27),P0.01];P53明顯促進A549細胞中miR-145的表達[(1.84±0.14)vs(1.00±0.00),P0.01];miR-145 mimics顯著抑制A549細胞中pGL3-OCT4-3′-UTR活性(P0.01)和OCT4蛋白表達水平(P0.05),而轉染miR-145抑制劑可進一步增加OCT4表達水平,且逆轉P53對A549細胞的干細胞特性的抑制作用。結論:P53通過促進miR-145表達下調(diào)OCT4表達,進而明顯抑制A549細胞的干細胞特性,該結果為肺腺癌的臨床診斷和治療提供了新途徑。
【圖文】：

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【作者單位】： 解放軍第85醫(yī)院肺科;
【分類號】：R734.2

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本文編號：2541372