【摘要】：目的:探討MDM2拮抗劑Nutlin-3促進(jìn)肝癌細(xì)胞SMMC-7721發(fā)生焦亡的作用及相關(guān)機(jī)制。方法:Western blot檢測細(xì)胞中活化caspase-1(p20)及IL-1β的表達(dá),LDH法檢測SMMC-7721細(xì)胞焦亡情況,ELISA檢測細(xì)胞上清中IL-1β釋放情況。結(jié)果:Nutlin-3提高SMMC-7721細(xì)胞活化caspase-1(p20)及IL-1β的蛋白表達(dá)水平。Nutlin-3處理顯著提高了SMMC-7721細(xì)胞培養(yǎng)上清中的LDH及IL-1β的表達(dá)水平(P0.05)。結(jié)論:Nutlin-3激活了caspase-1,誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞SMMC-7721發(fā)生焦亡,并促進(jìn)IL-1β釋放。
【圖文】：

學(xué)處理各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，，采用單因素方差分析(one-wayANO-VA)，兩兩比較用turkey檢驗(yàn)，結(jié)果中數(shù)據(jù)用x±s的方式表示(n=3)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1Nutlin-3處理激活了caspase-1活化caspase-1是介導(dǎo)細(xì)胞焦亡的關(guān)鍵分子。caspase-1前體被激活后，產(chǎn)生由p20和p10兩個(gè)亞單位組成的活化caspase-1。為判斷Nutlin-3對caspase-1前體活性的影響，Westernblot檢測p20的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，Nutlin-3提高了SMMC-7721細(xì)胞中活化caspase-1的表達(dá)水平(圖1)，說明Nutlin-3能激活caspase-1。圖1Westernblot檢測SMMC-7721細(xì)胞中活化caspase-1的表達(dá)水平Fig．1Westernblotwasperformedforproteinexpressionofactivedcaspase-1Note:β-actinwasusedasloadingcontrol.圖2乳酸脫氫酶細(xì)胞毒性試劑盒檢測釋放到細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的含量Fig．2ContentofLDHincellculturesupernatantwasan-alyzedbyLDHCytotoxicityAssayKit石新麗等Nutlin-3促進(jìn)肝癌細(xì)胞SMMC-7721發(fā)生焦亡的作用第7期·1015·

2結(jié)果2.1Nutlin-3處理激活了caspase-1活化caspase-1是介導(dǎo)細(xì)胞焦亡的關(guān)鍵分子。caspase-1前體被激活后，產(chǎn)生由p20和p10兩個(gè)亞單位組成的活化caspase-1。為判斷Nutlin-3對caspase-1前體活性的影響，Westernblot檢測p20的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，Nutlin-3提高了SMMC-7721細(xì)胞中活化caspase-1的表達(dá)水平(圖1)，說明Nutlin-3能激活caspase-1。圖1Westernblot檢測SMMC-7721細(xì)胞中活化caspase-1的表達(dá)水平Fig．1Westernblotwasperformedforproteinexpressionofactivedcaspase-1Note:β-actinwasusedasloadingcontrol.圖2乳酸脫氫酶細(xì)胞毒性試劑盒檢測釋放到細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的含量Fig．2ContentofLDHincellculturesupernatantwasan-alyzedbyLDHCytotoxicityAssayKit石新麗等Nutlin-3促進(jìn)肝癌細(xì)胞SMMC-7721發(fā)生焦亡的作用第7期·1015·
【作者單位】： 河北中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院河北省中西醫(yī)結(jié)合肝腎病證重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國人民解放軍白求恩醫(yī)務(wù)士官學(xué)校醫(yī)學(xué)技術(shù)系裝備維修教研室;
【基金】：河北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(H20174230011) 河北省中西醫(yī)結(jié)合肝腎病證重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題 河北省教育廳青年基金項(xiàng)目(No.QN2014012) 河北中醫(yī)學(xué)院博士科研基金項(xiàng)目(No.BSZ2015006)
【分類號】：R735.7

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本文編號：2540390