【摘要】：目的磷酸甘油酸脫氫酶(phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)催化糖酵解中間產(chǎn)物3-磷酸甘油酸生成3-磷酸羥基丙酮酸,將糖酵解中間產(chǎn)物引入絲氨酸生物合成途徑,它在包括乳腺癌和結(jié)腸癌等多種腫瘤中表達(dá)升高。本研究旨在探討PHGDH的表達(dá)對胃癌細(xì)胞(BGC823)增殖以及對化療藥物順鉑敏感性的影響。方法免疫組織化學(xué)染色檢測PHGDH蛋白在75例配對的胃癌和癌旁正常組織中的表達(dá)情況;siRNA轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞BGC823干擾PHGDH表達(dá),蛋白質(zhì)印跡法驗(yàn)證siRNA對PHGDH蛋白表達(dá)的干擾效率;CCK-8法和平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測PHGDH基因沉默對胃癌細(xì)胞BGC823增殖和克隆形成能力的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測PHGDH基因沉默對BGC823細(xì)胞周期的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡評估PHGDH基因沉默對胃癌細(xì)胞BGC823對化療藥物順鉑反應(yīng)性的影響。結(jié)果 PHGDH在胃癌組織中的陽性表達(dá)率為72.0%(54/75),顯著高于癌旁正常組織的41.3%(31/75),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,χ~2=14.36,P0.01;在轉(zhuǎn)染siRNA后,實(shí)驗(yàn)組BGC823-siPHGDH細(xì)胞中的PHGDH/β-actin蛋白表達(dá)相對灰度比值為0.09±0.02,顯著低于陰性對照組的0.70±0.05和空白對照組的0.74±0.06,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,F=62.35,P0.01;CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,細(xì)胞鋪板后5d,BGC823-Mock、BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH細(xì)胞各組在第5天時(shí)BGC823細(xì)胞增長倍數(shù)分別為11.13±0.35、11.30±0.72和5.58±0.66,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,F=48.61,P0.01;平板克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,細(xì)胞培養(yǎng)14d后,BGC823-Mock、BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH細(xì)胞形成的克隆數(shù)分別為182.67±11.85、173.33±7.26和28.33±10.93,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,F=71.85,P0.01;細(xì)胞周期檢測結(jié)果顯示,陰性對照組BGC823-siNC的G_0/G_1期細(xì)胞百分比為(70.3±2.4)%,實(shí)驗(yàn)組BGC823-siPHGDH的G_0/G_1期細(xì)胞百分比為(87.5±1.3)%,說明實(shí)驗(yàn)組BGC823-siPHGDH的G_0/G_1期細(xì)胞增多,PHGDH基因沉默引起胃癌細(xì)胞發(fā)生G_0/G_1細(xì)胞周期阻滯;細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果顯示,經(jīng)1μg/mL的順鉑處理BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH細(xì)胞24h后,BGC823-siNC凋亡率為(28.8±2.5)%,BGC823-siPHGDH組為(45.0±5.1)%,提示PHGDH基因沉默能夠增加胃癌細(xì)胞BGC823對順鉑的敏感性。結(jié)論 PHGDH基因沉默抑制胃癌細(xì)胞BGC823的增殖,引起細(xì)胞周期阻滯,增加對化療藥物順鉑的敏感性,這不僅為胃癌臨床治療提供一個新的靶點(diǎn),而且為腫瘤代謝在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的作用提供了新的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)西京消化病醫(yī)院·腫瘤生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;吉林大學(xué)計(jì)算機(jī)與技術(shù)學(xué)院生物識別與信息安全技術(shù)研究室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81430072;61471181)
【分類號】：R735.2

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6 王振嶺;7種抗癌藥體外抑制胃癌細(xì)胞的研究有新發(fā)現(xiàn)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

7 張中橋;胃癌細(xì)胞MDR機(jī)制研究取得新進(jìn)展[N];中國醫(yī)藥報(bào);2007年

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本文編號：2539629