【摘要】：背景彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(difffuse large B cell lymphoma, DLBCL)是最常見的非霍奇金淋巴瘤,占36.2%。盡管美羅華的出現(xiàn)使得DLBCL患者生存率大大提高,但仍有部分患者存在耐藥或復(fù)發(fā)。深入研究DLBCL的發(fā)病機(jī)制至關(guān)重要。T淋巴細(xì)胞是腫瘤免疫系統(tǒng)的重要組成部分,在實(shí)體瘤患者T細(xì)胞表面的共刺激分子中常存在異常表達(dá),進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤的免疫逃逸。T細(xì)胞表面共刺激分子在DLBCL中的研究相對(duì)較少,本文對(duì)T細(xì)胞表面共刺激分子在彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者的表達(dá)和作用進(jìn)行初步探討。淋巴瘤骨髓受累在DLBCL臨床分期中地位重要,本文可進(jìn)一步分析18F-FDG PET/CT的三種評(píng)價(jià)方法在彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)患者骨髓受累中的診斷價(jià)值。目的1、明確共刺激分子在初治彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤T細(xì)胞表面的表達(dá)及其對(duì)T細(xì)胞受體下游通路關(guān)鍵分子的作用。2、明確腫瘤微環(huán)境中PD-1表達(dá)與彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者預(yù)后間的關(guān)系。3、揭示西達(dá)本胺對(duì)DLBCL患者T細(xì)胞表面PD-1表達(dá)及T細(xì)胞受體下游通路關(guān)鍵分子的作用。4、揭示18F-FDG PET/CT的三種評(píng)價(jià)方法在彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)患者骨髓受累中的診斷價(jià)值。方法納入2014年7月至2015年3月在北京協(xié)和醫(yī)院就診的45例初治彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者,和在健康體檢中心查體的39名健康志愿者。應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)分析T細(xì)胞表面共刺激分子(CD28. CTLA4、PD1)的表達(dá)水平,再采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)測(cè)定T細(xì)胞受體下游關(guān)鍵分子(ZAP70、PI3K、NFAT) mRNA表達(dá)水平；最后通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)測(cè)定血清白介素-10水平。回顧性收集2010年4月至2014年12月60例北京協(xié)和醫(yī)院診斷為DLBCL的未經(jīng)治療患者經(jīng)福爾馬林固定石蠟包埋的病理標(biāo)本及臨床資料,采用免疫組化染色,分析PD-1的表達(dá)與患者預(yù)后間的關(guān)系。體外培養(yǎng)7例初治彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞,觀察西達(dá)苯胺(3μmol/L,72h)對(duì)T細(xì)胞表面共刺激分子PD-1表達(dá)和T細(xì)胞受體下游關(guān)鍵分子(ZAP70、PI3K、NFAT) mRNA表達(dá)水平的作用。2012年7月至2014年6月的77例初治DLBCL患者資料進(jìn)行回顧性分析,所有患者均接受18F-FDG PET/CT顯像、單側(cè)髂骨骨髓穿刺活檢。以骨髓穿刺活檢組織病理學(xué)結(jié)果為參照,評(píng)價(jià)視覺比較法(髂骨骨髓FDG攝取高于正常肝臟組織)、最大標(biāo)準(zhǔn)攝取值(SUVmax)法(髂骨骨髓SUVmax≥2.5作為淋巴瘤骨髓受累的診斷閾值)、SUVmax比值法(髂骨骨髓SUVmax與正常肝臟組織SUVmax比值≥1作為淋巴瘤骨髓受累的診斷閾值)的診斷效能。結(jié)果1、與正常對(duì)照相比,初治DLBCL患者CD4+T細(xì)胞表面PD1平均熒光強(qiáng)度和CD8+T細(xì)胞表面PD1比例較對(duì)照組明顯增高(P0.001); DLBCL患者CD4+T細(xì)胞表面CTLA4平均熒光強(qiáng)度較正常人明顯增高(P0.05),其CD8+T細(xì)胞表面CTLA4比例和平均熒光強(qiáng)度較正常人均明顯增高(P0.05)。DLBCL患者CD4+T細(xì)胞表面CD28比例較正常人明顯升高(P0.05)。DLBCL患者T細(xì)胞受體下游信號(hào)通路關(guān)鍵分子(ZAP70、PI3K、NFAT) mRNA表達(dá)較對(duì)照組降低(P0.05)；血清IL-10表達(dá)明顯增高(P0.05)。與DLBCL低�；颊呦啾�,DLBCL中／高�；颊逤D4+T細(xì)胞表面PD1平均熒光強(qiáng)度明顯增高,其T細(xì)胞下游信號(hào)通路關(guān)鍵分子(ZAP70、PI3K、NFAT) mRNA表達(dá)水平明顯降低(P0.05)。DLBCL的不同亞型患者間上述指標(biāo)無(wú)明顯差異。CD4+T細(xì)胞表面PDl平均熒光強(qiáng)度≥468或CTLA4平均熒光強(qiáng)度≥997與DLBCL患者不良預(yù)后相關(guān)。2、彌漫大B細(xì)胞淋巴患者腫瘤微環(huán)境中PD-1陽(yáng)性表達(dá)較陰性表達(dá)者無(wú)進(jìn)展生存(PFS)和總生存(OS)有所降低(P0.05),PD-1強(qiáng)陽(yáng)性較弱陽(yáng)性者OS有所降低(P0.05),尚需延長(zhǎng)隨訪時(shí)間,追蹤兩者間的差異。3、在DLBCL患者中,與西達(dá)本胺作用前相比,西達(dá)本胺作用后CD4+T細(xì)胞表面CD279平均熒光強(qiáng)度明顯降低(P0.05)。T細(xì)胞受體下游通路關(guān)鍵分子NFATmRNA表達(dá)水平顯著增高(P0.05)。4、在DLBCL患者中,視覺比較法的診斷敏感性為100.00%,特異性為80.00%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為48.00%,陰性預(yù)測(cè)值為100.00%。骨髓SUVmax法的診斷敏感性為75.00%,特異性為92.31%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為64.29%,陰性預(yù)測(cè)值為95.24%。SUVmax比值法的診斷敏感度為100.00%,特異性為90.77%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值66.67%,陰性預(yù)測(cè)值100%。結(jié)論1、初治DLBCL患者存在T細(xì)胞表面共刺激分子表達(dá)異常；其T細(xì)胞受體下游信號(hào)通路關(guān)鍵分子表達(dá)降低；血清IL-10表達(dá)明顯增高。2、DLBCL患者PD-1陽(yáng)性表達(dá)較陰性表達(dá)者PFS和OS有所降低,尚需延長(zhǎng)隨訪時(shí)間,追蹤兩者間差異。3、西達(dá)本胺可降低CD4+T細(xì)胞表面PD-1的表達(dá)；并使T細(xì)胞下游信號(hào)通路分子NFAT mRNA表達(dá)明顯升高。4、髂骨骨髓SUVmax與正常肝臟組織SUVmax比值≥1作為18F-FDG PET/CT的診斷閾值在DLBCL患者骨髓受累中具有良好的診斷價(jià)值。
【圖文】：

第一信號(hào)來(lái)自ＴＣＲ與ＭＨＣ的特異性結(jié)合；第二信號(hào)來(lái)自共刺激分子，包括Ｔ細(xì)胞逡逑表面的激活性共刺激分子（ＣＤ２８）和抑制性共刺激分子（ＣＤ２７９，又稱為ＰＤ－１、逡逑ＣＤ１５２，又稱為ＣＴＬＡ－４）（圖１），其中位于Ｔ細(xì)胞表面的ＣＤ２８與位于抗原呈遞細(xì)逡逑胞（ＡＰＣｓ）表面的Ｂ７配體相互作用，形成促進(jìn)Ｔ細(xì)胞活化和增殖的信號(hào)；而ＣＤ１５２逡逑主要表達(dá)在活化Ｔ細(xì)胞表面，它與ＣＤ２８競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合ＡＰＣｓ表面的Ｂ７配體，損傷Ｔ逡逑細(xì)胞功能；ＣＤ２７９也位于活化Ｔ細(xì)胞表面，它與ＡＰＣｓ表面的ＰＤ－Ｌ１或ＰＤ－Ｌ２相逡逑結(jié)合，抑制Ｔ細(xì)胞功能Ｗ。共刺激分子在實(shí)體瘤中的研究較多，且抗ＰＤ－１抗體和逡逑抗ＣＴＬＡ－４抗體己研發(fā)并進(jìn)入臨床試驗(yàn)，其對(duì)多種實(shí)體瘤如惡性黑色素瘤、非小細(xì)逡逑胞肺癌、膀腕癌、卵巢癌、肝癌、結(jié)腸腺癌、腎細(xì)胞癌有效，其中對(duì)進(jìn)展期的惡性逡逑炓色素瘤的有效率達(dá)到３０％左右，且副作用�。祝睿疲模良航�(jīng)批準(zhǔn)抗ＣＴＬＡ－４和抗ＰＤ－１逡逑抗體在進(jìn)展期惡性黑色素瘤中的應(yīng)用。在非霍奇金淋己瘤方面

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本文編號(hào)：2533294