發(fā)布時間：2017-03-17 19:04

  本文關鍵詞：構建多功能Exosome用于抗腫瘤藥物輸送及腫瘤靶向治療，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：Exosome是由活細胞分泌的直徑為50-100nm的膜結構囊泡。細胞內吞泡膜向內凹陷形成含有多個小囊泡的多泡內涵體后，與細胞膜融合，釋放其中的小囊泡，即為exosome。Exosome由磷脂雙分子層包繞，富含膽固醇、鞘磷脂、神經(jīng)酰胺以及膜蛋白等，其腔內含有大量水溶性的蛋白質、核酸（mRNA，microRNA等）、脂質及多種小分子物質。研究發(fā)現(xiàn)，exosome不僅是細胞在新陳代謝過程中排除代謝產(chǎn)物的重要途徑，同時也是細胞間進行物質、信息交流的重要媒介。它能夠將其母細胞來源的蛋白，核酸等物質運輸?shù)绞荏w細胞，并影響受體細胞的功能。作為一種天然的物質運輸載體，exosome已經(jīng)被開發(fā)運用于核酸類藥物的靶向運輸，并運用于阿爾茨海默病及腫瘤等疾病的治療。與傳統(tǒng)的藥物載體相比，exosome可以從病人自身獲得，從而可極大的減少載體自身的毒性及免疫原性，另外，exosome作為一種膜結構載體，能夠通過其表面的膜蛋白介導與靶細胞膜融合，從而將其負載的藥物直接注入受體細胞中，避免了細胞吞噬-溶酶體途徑帶來的藥物釋放及細胞毒性等問題。因此，exosome作為一種新型藥物載體，具有強大的應用前景。 阿霉素（Dox）是臨床上廣泛應用的一種抗腫瘤藥物，，具有廣譜的抗腫瘤活性，它通過嵌入到細胞的DNA雙螺旋中，對細胞產(chǎn)生毒性作用。然而，Dox本身并不具有細胞選擇性，在殺死腫瘤細胞的同時，對正常細胞也具有強烈的毒副作用，尤其隨著治療劑量的升高而產(chǎn)生的嚴重的心臟毒性，往往限制了其應用。因此，開發(fā)一種具有腫瘤靶向性的藥物載體，實現(xiàn)將Dox定向輸送到腫瘤部位，以增加治療效果，并減小其毒副作用具有一定的必要性。鑒于此，本研究運用exosome作為Dox載體，通過基因工程技術改造exosome，使其具有腫瘤靶向性，并應用于乳腺癌的治療。 我們選用小鼠自身來源的未成熟DC細胞（imDCs）作為exosome供體細胞，以期減少毒性，降低免疫原性，增加藥物輸送效率。通過轉染表達腫瘤靶向肽iRGD及exosome膜蛋白Lamp2b的融合蛋白質粒，獲得具有腫瘤組織靶向性的exosome結構即iRGD-Exos。利用電穿孔的方法將Dox負載到iRGD-Exos中，得到iRGD-Exos-Dox。體外細胞毒性分析結果顯示，iRGD-Exos-Dox能夠特異性殺死乳腺癌細胞。小鼠活體實驗結果表明，iRGD-Exos顯示出很好的腫瘤靶向能力，通過與腫瘤細胞的膜融合作用，可將Dox高效運送到腫瘤細胞中。在裸鼠乳腺癌腫瘤模型中，iRGD-Exos-Dox顯著的抑制了腫瘤生長，并且大大降低了Dox的心臟毒性。綜上所述，我們成功構建了一種生物源性抗腫瘤藥物輸送載體，能夠高效地將Dox輸送到腫瘤部位，對乳腺癌起到了顯著的抑制效果，并且極大的降低了Dox的心臟毒性，顯示出較好的臨床應用前景。
【關鍵詞】：exosome iRGD 阿霉素 腫瘤治療
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R73-362
【目錄】：

• 內容提要4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-12
• 第一章 緒論12-17
• 1.1 Exosome 簡介12-14
• 1.2 藥物載體的開發(fā)14-15
• 1.3 立題依據(jù)及實驗創(chuàng)新15-17
• 第二章 主要儀器與試劑耗材17-19
• 2.1 主要儀器17-18
• 2.2 主要試劑耗材18-19
• 第三章 構建腫瘤靶向藥物載體 iRGD-Exos19-28
• 3.1 序言19-20
• 3.2 材料與方法20-25
• 3.3 實驗結果25-27
• 3.4 小結27-28
• 第四章 iRGD-Exos 與腫瘤細胞作用機制及靶向性分析28-30
• 4.1 序言28
• 4.2 材料方法28
• 4.3 實驗結果28-29
• 4.4 小結29-30
• 第五章 藥物負載及腫瘤靶向運輸30-34
• 5.1 序言30
• 5.2 材料方法30-31
• 5.3 實驗結果31-32
• 5.4 小結32-34
• 第六章 iRGD-Exos-Dox 的抗腫瘤效果及安全性評價34-38
• 6.1 序言34
• 6.2 材料方法34-35
• 6.3 實驗結果35-37
• 6.4 小結37-38
• 第七章 全文總結38-39
• 參考文獻39-45
• 發(fā)表文章目錄45-46
• 致謝46

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 王世坤;張立平;馬鳳英;田鏵;張華;張向紅;王立言;李鑫;;內皮微粒促進單核細胞介導的內皮細胞增殖作用的研究[J];中國現(xiàn)代普通外科進展;2011年04期

2 李飛;李莉;;胞外體的表征及其功能[J];現(xiàn)代免疫學;2013年03期

3 張鳳;熊思東;;巨噬細胞的極化及其意義[J];細胞生物學雜志;2007年01期

4 王寧方;李慧玉;杜雯;李小青;鄭金娥;張佳華;黃士昂;;乳腺癌患者白細胞來源微泡的特性及其臨床意義[J];腫瘤;2012年03期

5 Hwa Jin Jung;Yousin Suh;;Circulating miRNAs in Ageing and Ageing-Related Diseases[J];Journal of Genetics and Genomics;2014年09期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 張利銘;多發(fā)性骨髓瘤微泡抑制MSCs成骨分化及機制研究[D];華中科技大學;2012年

2 馬婧薇;天然免疫細胞產(chǎn)生的微顆粒在肝癌細胞侵襲和轉移中的作用及其機制[D];華中科技大學;2012年

3 徐靜;腫瘤新靶點HAb18G/CD147與癌—基質的交互作用[D];第四軍醫(yī)大學;2008年

4 黃詩韻;精漿游離mRNA一般特征及附睪液游離mRNA功能的初步研究[D];華中科技大學;2010年

5 徐靜瑋;日本血吸蟲抗原誘導巨噬細胞極化的分子證據(jù)[D];南京醫(yī)科大學;2012年

6 熊薇;微泡microRNAs在肝癌診斷及發(fā)病機制中的作用研究[D];華中科技大學;2012年

7 榮磊;乳腺癌細胞釋放的EXO在機體腫瘤免疫反應中的初步研究[D];南方醫(yī)科大學;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李康;不同性別背景下巨噬細胞極化的差異及其對病毒性心肌炎發(fā)病的影響[D];復旦大學;2008年

2 劉安全;通過exosomes途徑分泌的hepaCAM蛋白對腎癌細胞增殖的影響[D];重慶醫(yī)科大學;2012年

  本文關鍵詞：構建多功能Exosome用于抗腫瘤藥物輸送及腫瘤靶向治療，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：253305