本文關(guān)鍵詞：構(gòu)建多功能Exosome用于抗腫瘤藥物輸送及腫瘤靶向治療，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：Exosome是由活細(xì)胞分泌的直徑為50-100nm的膜結(jié)構(gòu)囊泡。細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成含有多個(gè)小囊泡的多泡內(nèi)涵體后，與細(xì)胞膜融合，釋放其中的小囊泡，即為exosome。Exosome由磷脂雙分子層包繞，富含膽固醇、鞘磷脂、神經(jīng)酰胺以及膜蛋白等，其腔內(nèi)含有大量水溶性的蛋白質(zhì)、核酸（mRNA，microRNA等）、脂質(zhì)及多種小分子物質(zhì)。研究發(fā)現(xiàn)，exosome不僅是細(xì)胞在新陳代謝過程中排除代謝產(chǎn)物的重要途徑，同時(shí)也是細(xì)胞間進(jìn)行物質(zhì)、信息交流的重要媒介。它能夠?qū)⑵淠讣?xì)胞來源的蛋白，核酸等物質(zhì)運(yùn)輸?shù)绞荏w細(xì)胞，并影響受體細(xì)胞的功能。作為一種天然的物質(zhì)運(yùn)輸載體，exosome已經(jīng)被開發(fā)運(yùn)用于核酸類藥物的靶向運(yùn)輸，并運(yùn)用于阿爾茨海默病及腫瘤等疾病的治療。與傳統(tǒng)的藥物載體相比，exosome可以從病人自身獲得，從而可極大的減少載體自身的毒性及免疫原性，另外，exosome作為一種膜結(jié)構(gòu)載體，能夠通過其表面的膜蛋白介導(dǎo)與靶細(xì)胞膜融合，從而將其負(fù)載的藥物直接注入受體細(xì)胞中，避免了細(xì)胞吞噬-溶酶體途徑帶來的藥物釋放及細(xì)胞毒性等問題。因此，exosome作為一種新型藥物載體，具有強(qiáng)大的應(yīng)用前景。 阿霉素（Dox）是臨床上廣泛應(yīng)用的一種抗腫瘤藥物，，具有廣譜的抗腫瘤活性，它通過嵌入到細(xì)胞的DNA雙螺旋中，對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。然而，Dox本身并不具有細(xì)胞選擇性，在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，對(duì)正常細(xì)胞也具有強(qiáng)烈的毒副作用，尤其隨著治療劑量的升高而產(chǎn)生的嚴(yán)重的心臟毒性，往往限制了其應(yīng)用。因此，開發(fā)一種具有腫瘤靶向性的藥物載體，實(shí)現(xiàn)將Dox定向輸送到腫瘤部位，以增加治療效果，并減小其毒副作用具有一定的必要性。鑒于此，本研究運(yùn)用exosome作為Dox載體，通過基因工程技術(shù)改造exosome，使其具有腫瘤靶向性，并應(yīng)用于乳腺癌的治療。 我們選用小鼠自身來源的未成熟DC細(xì)胞（imDCs）作為exosome供體細(xì)胞，以期減少毒性，降低免疫原性，增加藥物輸送效率。通過轉(zhuǎn)染表達(dá)腫瘤靶向肽iRGD及exosome膜蛋白Lamp2b的融合蛋白質(zhì)粒，獲得具有腫瘤組織靶向性的exosome結(jié)構(gòu)即iRGD-Exos。利用電穿孔的方法將Dox負(fù)載到iRGD-Exos中，得到iRGD-Exos-Dox。體外細(xì)胞毒性分析結(jié)果顯示，iRGD-Exos-Dox能夠特異性殺死乳腺癌細(xì)胞。小鼠活體實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，iRGD-Exos顯示出很好的腫瘤靶向能力，通過與腫瘤細(xì)胞的膜融合作用，可將Dox高效運(yùn)送到腫瘤細(xì)胞中。在裸鼠乳腺癌腫瘤模型中，iRGD-Exos-Dox顯著的抑制了腫瘤生長(zhǎng)，并且大大降低了Dox的心臟毒性。綜上所述，我們成功構(gòu)建了一種生物源性抗腫瘤藥物輸送載體，能夠高效地將Dox輸送到腫瘤部位，對(duì)乳腺癌起到了顯著的抑制效果，并且極大的降低了Dox的心臟毒性，顯示出較好的臨床應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：exosome iRGD 阿霉素 腫瘤治療
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R73-362
【目錄】：

• 內(nèi)容提要4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-12
• 第一章 緒論12-17
• 1.1 Exosome 簡(jiǎn)介12-14
• 1.2 藥物載體的開發(fā)14-15
• 1.3 立題依據(jù)及實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新15-17
• 第二章 主要儀器與試劑耗材17-19
• 2.1 主要儀器17-18
• 2.2 主要試劑耗材18-19
• 第三章 構(gòu)建腫瘤靶向藥物載體 iRGD-Exos19-28
• 3.1 序言19-20
• 3.2 材料與方法20-25
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-27
• 3.4 小結(jié)27-28
• 第四章 iRGD-Exos 與腫瘤細(xì)胞作用機(jī)制及靶向性分析28-30
• 4.1 序言28
• 4.2 材料方法28
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-29
• 4.4 小結(jié)29-30
• 第五章 藥物負(fù)載及腫瘤靶向運(yùn)輸30-34
• 5.1 序言30
• 5.2 材料方法30-31
• 5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-32
• 5.4 小結(jié)32-34
• 第六章 iRGD-Exos-Dox 的抗腫瘤效果及安全性評(píng)價(jià)34-38
• 6.1 序言34
• 6.2 材料方法34-35
• 6.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-37
• 6.4 小結(jié)37-38
• 第七章 全文總結(jié)38-39
• 參考文獻(xiàn)39-45
• 發(fā)表文章目錄45-46
• 致謝46

【共引文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：構(gòu)建多功能Exosome用于抗腫瘤藥物輸送及腫瘤靶向治療，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：253305