【摘要】：目的:探究趨化因子受體CX3CR1(C-X3-C motif chemokine receptor 1,CX3CR1)對(duì)人肝癌細(xì)胞7721和Hep G2增殖、遷移和侵襲的影響及其機(jī)制。方法:采用Q-PCR和Western blot法分別檢測(cè)人正常肝細(xì)胞LO2和兩種肝癌細(xì)胞(7721和Hep G2)中CX3CR1的基因表達(dá)情況(mRNA和蛋白質(zhì));以過(guò)表達(dá)CX3CR1的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染7721細(xì)胞,用抑制CX3CR1的干擾RNA轉(zhuǎn)染Hep G2細(xì)胞,通過(guò)Q-PCR和Western blot法檢測(cè)CX3CR1的變化;應(yīng)用MTT和流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖能力;用集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞的自我更新和增殖能力;借助劃痕愈合和Transwell檢測(cè)各組細(xì)胞的遷移和侵襲能力;利用Western blot法檢測(cè)PI3K/AKT、MAPK/ERK信號(hào)通路的激活情況。結(jié)果:CX3CR1在7721細(xì)胞中mRNA和蛋白質(zhì)呈低表達(dá)趨勢(shì),而在Hep G2細(xì)胞中則呈高表達(dá)趨勢(shì);轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)CX3CR1質(zhì)粒后7721細(xì)胞中CX3CR1的mRNA和蛋白水平有明顯的升高,細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲能力增強(qiáng),p-AKT和p-ERK水平升高;轉(zhuǎn)染干擾RNA后Hep G2細(xì)胞中的CX3CR1表達(dá)水平明顯下降,增殖、遷移、侵襲能力減弱,p-AKT和p-ERK水平降低。結(jié)論:趨化因子受體CX3CR1可以促進(jìn)人肝癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力,該作用可能與PI3K/AKT、MAPK/ERK信號(hào)通路激活有關(guān)。
[Abstract]:Objective: To investigate the effects and mechanisms of chemokine receptor CX3CR1 (C-X3-C motilin receptor 1, CX3CR1) on the proliferation, migration and invasion of human hepatoma cells 7721 and Hep G2. Methods: The expression of CX3CR1 (mRNA and protein) was detected by Q-PCR and Western blot respectively, and the expression of CX3CR1 in human normal hepatocytes (7721 and Hep G2) was detected by using the method of Q-PCR and Western blot. The 7721 cells were transfected with the plasmid expressing the CX3CR1, and the Hep G2 cells were transfected with the interfering RNA which inhibited the CX3CR1. The changes of CX3CR1 were detected by Q-PCR and Western blot. The proliferation ability of each group was detected by MTT and flow cytometry. The self-renewal and proliferation ability of each group of cells were detected by colony formation. The migration and invasion ability of each group of cells were detected by means of scratch-healing and Transwell. The activation of PI3K/ AKT, MAPK/ ERK signal pathway was detected by Western blot. Results: The mRNA and protein of CX3CR1 in 7721 cells showed a low expression tendency, while in the Hep G2 cells, the expression of CX3CR1 mRNA and protein in 7721 cells increased significantly, and the proliferation, migration and invasion ability of the cells increased, and the levels of p-AKT and p-ERK increased. The expression level of CX3CR1 in the Hep G2 cells after transfection of the interfering RNA was significantly decreased, the proliferation, the migration, the invasion ability decreased, the p-AKT and the p-ERK levels were reduced. Conclusion: The chemokine receptor CX3CR1 can promote the proliferation, migration and invasion of human liver cancer cells, which may be related to the activation of PI3K/ AKT, MAPK/ ERK signaling pathway.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院臨床診斷教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(NSFC 81672103)
【分類號(hào)】：R735.7

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2504105