【摘要】：目的近年來,PD-1/PD-L1抑制劑通過抑制PD-1/PD-L1信號通路,激活自身免疫系統(tǒng),在多種腫瘤的臨床應(yīng)用中取得了不錯的療效,成為研究熱點。檢測腫瘤細(xì)胞PD-L1的表達(dá)水平已成為免疫檢測點阻斷性抗體療效評價的重要手段。放療聯(lián)合PD-1/PD-L1抑制劑免疫治療可能是非小細(xì)胞肺癌患者的最新治療方案,但其聯(lián)合治療的優(yōu)勢人群及治療時機(jī)仍未闡明。血清可溶性PD-L1可能和患者的腫瘤組織PD-L1及免疫狀態(tài)相關(guān),闡明其在肺癌患者中的表達(dá)具有重要意義。該研究擬采用ELISA方法檢測不同分期非小細(xì)胞肺癌患者外周血血清中可溶性PD-L1的表達(dá)水平,并動態(tài)檢測sPD-L1在放射治療前、中、后的表達(dá)水平,分析其變化趨勢和患者的療效、生存的相關(guān)性,評估檢測血清中sPD-L1表達(dá)水平在NSCLC患者的臨床診斷、療效預(yù)測、預(yù)后判斷中的潛在作用。探討PD-1/PD-L1抑制劑和放射治療聯(lián)合治療NSCLC患者的時機(jī),為進(jìn)一步的基礎(chǔ)研究和臨床試驗提供一定的參考。方法我們將2013年10月至2016年10月間收治的經(jīng)組織活檢病理診斷明確且無EGFR基因敏感型突變的136例NSCLC患者和隨機(jī)抽取的健康體檢人群中的61名志愿者作為受試對象。按照腫瘤分期不同分組,把NSCLC患者分為立體定向放療治療組(Ⅰ-Ⅱ期NSCLC患者,命名為SBRT組)和調(diào)強(qiáng)放射治療組(Ⅲ期NSCLC患者,命名為IMRT組)。SBRT組患者接受針對局部病灶的射波刀立體定向放射治療,采用CYBER-KNIFE治療系統(tǒng),給予PTV處方劑量為DT 48-60 Gy,采用大分割照射技術(shù),8-15Gy/f/d,1f/d,共3-6f。IMRT組患者接受調(diào)強(qiáng)放射治療,采用直線加速器6MV-X線常規(guī)分割照射,要求95%等劑量線覆蓋PTV,處方劑量DT60Gy,2Gy/f/d,5f/w。IMRT組患者聯(lián)合同步化療加序貫化療,腺癌患者選用多西他賽聯(lián)合順鉑方案,鱗癌患者選用吉西他濱聯(lián)合順鉑方案。在未經(jīng)干預(yù)情況下,抽取全部受試對象空腹靜脈血5ml,提取血清后置于-80℃的低溫冰箱儲存?zhèn)溆谩２⒎謩e在SBRT組患者射波刀開始治療日的第14天和射波刀治療結(jié)束日第3個月,以及IMRT組患者放射治療開始日的第14天、第28天、第42天和放療結(jié)束日的第3個月的不同時間點,同法抽取血樣并儲存?zhèn)溆谩＿m時對所采集血樣行ELISA法檢測其sPD-L1表達(dá)濃度。方法:將0.1ml樣品血清置于包被過PD-L1抗體的反應(yīng)孔中,經(jīng)孵育、洗滌后,加酶標(biāo)抗體并加底物液顯色后終止反應(yīng),在酶標(biāo)儀上檢測sPD-L1濃度并記錄。隨訪并登記患者的療效、疾病無進(jìn)展時間、總生存時間等信息。近期療效采用RECIST實體瘤療效評價標(biāo)準(zhǔn)評估。放射反應(yīng)采用RTOG急性放射損傷分級標(biāo)準(zhǔn)與RTOG/EORTC晚期放射損傷分級標(biāo)準(zhǔn)評價。統(tǒng)計學(xué)處理:應(yīng)用GraphPadPrism 6.0軟件繪制sPD-L1表達(dá)水平的散點圖、趨線圖。所有統(tǒng)計數(shù)據(jù),采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析并繪制生存曲線圖。正態(tài)分布數(shù)據(jù)以?±S描述,統(tǒng)計分析采用t檢驗,非正態(tài)分布數(shù)據(jù)以M(Q1,Q3)描述,統(tǒng)計分析采用非參數(shù)分析,計量資料用率表示,行x2檢驗,方差不齊數(shù)據(jù)的相關(guān)性分析采用秩和檢驗,單因素生存分析采用Kaplan-Meier法,多因素生存分析采用Cox Regression法,均以P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果健康對照組,男女比例2.1:1,平均年齡63.7歲(36-76歲),均滿足以下要求:無嚴(yán)重的各系統(tǒng)慢性疾病,無全身免疫性疾病,無傳染性疾病,3個月內(nèi)無外傷史和急性感染病史,無家族性腫瘤病史的。所有非小細(xì)胞肺癌患者總體男女比例1.89:1,平均年齡66.4歲(36-85)。SBRT組治療結(jié)果:共29例非小細(xì)胞肺癌患者納入SBRT組,男女比例2.63:1,平均年齡72.5歲。CR 5例(17.2%),PR 21例(72.4%),SD 2例(6.9%),PD1例(3.45%),近期有效率(CR+PR)89.7%,臨床受益率(CR+PR+SD)96.6%,中位總生存期(OS)21個月,3年總生存率82.6%。IMRT組治療結(jié)果:共107例非小細(xì)胞肺癌患者納入,男女比例1.74:1,平均年齡61.8歲。CR 0例(0%),PR75例(70.1%),SD 32例(29.9%),PD 2例(1.9%),近期有效率(CR+PR)70.1%,臨床受益率(CR+PR+SD)98.1%,中位OS17個月,3年生存率39.4%。ELISA檢測血清中sPD-L1的結(jié)果顯示健康對照組、SBRT組和IMRT組初始狀態(tài)下的sPD-L1表達(dá)水平分別為176.97pg/ml(168.92,185.04),188.44pg/ml(181.69,193.74)和208.44pg/ml(196.95,223.45)。非參數(shù)檢驗結(jié)果提示三組總體和每兩組間初始狀態(tài)下的sPD-L1表達(dá)水平存在顯著性差異,有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。再將所有非小細(xì)胞肺癌患者按詳細(xì)腫瘤分期分為ⅠA3、ⅠB、ⅡA期、ⅢA期、ⅢB期、ⅢC期共6個亞組,進(jìn)行各亞組初始狀態(tài)下sPD-L1表達(dá)水平的非參數(shù)檢驗,結(jié)果顯示分組之間存在漸進(jìn)顯著性差異(P0.01),可以說明腫瘤分期越晚,sPD-L1表達(dá)水平越高。根據(jù)全部受試者初始狀態(tài)下血清中sPD-L1的表達(dá)值繪制ROC曲線,ROC積分面積為0.870,P0.01,95%可信區(qū)間是0.820-0.921,取得cutoff值為187.17pg/ml,敏感性0.787,特異性0.779。提示檢測sPD-L1表達(dá)對診斷NSCLC有參考意義。按照SBRT和IMRT分組,分別進(jìn)行治療前后sPD-L1表達(dá)數(shù)據(jù)的秩和檢驗,結(jié)果顯示sPD-L1表達(dá)水平在開始放療后呈進(jìn)行性下降趨勢,其變化幅度存在顯著差異(P0.01),且和治療療效相關(guān),治療療效越好,sPD-L1表達(dá)水平降低幅度越大。IMRT組放療結(jié)束3個月后,部分患者腫瘤進(jìn)展,其sPD-L1表達(dá)水平上升,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),提示sPD-L1表達(dá)水平和判定預(yù)后有關(guān)。按組別不同,分別在治療前(sPD-L1d0)和治療后(SBRT組取sPD-L1d14;IMRT組取sPD-L1d42)檢測到的sPD-L1表達(dá)值之間求差,再把差值排秩,取其中位數(shù)作為分界點,將各組內(nèi)患者分為sPD-L1表達(dá)值高變化率組和sPD-L1表達(dá)值低變化率組,采用Kaplan-Meier法進(jìn)行組間生存率分析,結(jié)果顯示:SBRT兩亞組間生存率無顯著性差異(P=0.926)。IMRT兩亞組間生存率有顯著差異,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.003),說明放射治療前后sPD-L1表達(dá)值降低幅度大者的生存時間更長,多因素生存分析證實sPD-L1表達(dá)值降低幅度大是一個獨立預(yù)后因素(HR=0.381,P=0.033)。進(jìn)一步分析顯示sPD-L1表達(dá)值降低幅度隨著放療照射劑量的增加而加大,但尚無法排除時間因素的干擾,仍有待進(jìn)一步的研究。結(jié)論通過本研究,我們發(fā)現(xiàn)sPD-L1在健康人群和非小細(xì)胞肺癌患者的外周血中均有表達(dá),NSCLC患者的表達(dá)水平高于正常人水平,且隨著腫瘤分期越晚其表達(dá)水平越高。當(dāng)給予患者放射治療(聯(lián)合或不聯(lián)合化療)后,sPD-L1的表達(dá)水平呈現(xiàn)下降趨勢,這種趨勢又和NSCLC患者的療效、預(yù)后相關(guān),其降幅越大,越提示有效和生存期的延長。當(dāng)患者腫瘤進(jìn)展時,其sPD-L1表達(dá)水平又隨之升高,這些變化的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。因此,用ELISA法檢測NSCLC患者血清中sPDL1的表達(dá)水平,可以為NSCLC的診斷提供一定的參考,并且可以通過動態(tài)檢測sPD-L1表達(dá)值的變化,來預(yù)測療效以及預(yù)后,其臨床參考意義的價值有待進(jìn)一步的相關(guān)研究結(jié)果予以驗證。
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【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R734.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 胡曉燕;張煒;胡悅;張用;龔瑞;梁金燕;劉莉;;A Meta-analysis Reveals Prognostic Role of Programmed Death Ligand-1 in Asian Patients with Non-small Cell Lung Cancer[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2016年03期

2 Jingwu Xie;Xiaoli Zhang;;The Impact of Genomic Prof ling for Novel Cancer Therapy Recent Progress in Non-Small Cell Lung Cancer[J];Journal of Genetics and Genomics;2016年01期

3 Zhixue Zheng;Zhaode Bu;Xijuan Liu;Lianhai Zhang;Ziyu Li;Aiwen Wu;Xiaojiang Wu;Xiaojing Cheng;Xiaofang Xing;Hong Du;Xiaohong Wang;Ying Hu;Jiafu Ji;;Level of circulating PD-L1 expression in patients with advanced gastric cancer and its clinical implications[J];Chinese Journal of Cancer Research;2014年01期

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本文編號：2487214