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冷凍消融后殘存腫瘤與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2019-03-28 06:08
【摘要】:目的探究不完全冷凍消融對(duì)前列腺癌RM-1細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其產(chǎn)生機(jī)制。方法前列腺癌RM-1細(xì)胞放入-20℃冰箱中冷凍5 min,37℃水域復(fù)溫,待細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)后重復(fù)冷凍10 min、15 min。培養(yǎng)1 d后鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。20只C57/BL小鼠構(gòu)建荷瘤模型,隨機(jī)分為對(duì)照組與不完全冷凍消融組。不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)量腫瘤大小,14 d時(shí)處死小鼠、取肺組織行HE染色,統(tǒng)計(jì)腫瘤肺轉(zhuǎn)移枚數(shù)。Transwell法檢測(cè)細(xì)胞遷移及侵襲能力變化,免疫印跡檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)水平,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)細(xì)胞上清液轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β分泌量。結(jié)果經(jīng)不完全冷凍消融的RM-1細(xì)胞排列紊亂,形態(tài)發(fā)生改變,可有觸角結(jié)構(gòu)形成。術(shù)后3、7 d不完全冷凍消融組腫瘤體積略小于對(duì)照組,但僅術(shù)后7 d差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.019),術(shù)后10、14 d腫瘤體積基本相等。不完全冷凍消融組腫瘤肺轉(zhuǎn)移枚數(shù)明顯多于對(duì)照組(P0.001)。Transwell試驗(yàn)顯示不完全冷凍消融組細(xì)胞遷移及侵襲能力強(qiáng)于對(duì)照組(P0.05)。免疫印跡檢測(cè)顯示,不完全冷凍消融組與對(duì)照組相比,N-cadherin、MMP-9、vimentin、表達(dá)上調(diào),E-cadherin表達(dá)下調(diào)。ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示,不完全冷凍消融組細(xì)胞上清液中TGF-β分泌增多。結(jié)論不完全冷凍消融可使RM-1細(xì)胞遷移及侵襲能力增強(qiáng),增加荷瘤小鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移枚數(shù),影響上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白表達(dá)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of incomplete cryoablation on the biological behavior of prostate cancer RM-1 cells and its mechanism. Methods RM-1 cells of prostate cancer were frozen in a refrigerator at-20 鈩,

本文編號(hào):2448610

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