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bcl-2基因過表達(dá)致急性髓系白血病對柔紅霉素耐藥機制的初步探討

發(fā)布時間:2019-03-10 20:43
【摘要】:目的探討bcl-2基因過表達(dá)導(dǎo)致人急性髓系白血病對柔紅霉素耐藥的機制。方法通過分子克隆技術(shù)構(gòu)建質(zhì)粒pc DNA3.1(+)/bcl-2,將其轉(zhuǎn)染人急性髓系白血病U937細(xì)胞,分正常對照組、空載體對照組、轉(zhuǎn)染組,與柔紅霉素培養(yǎng)24 h,采用CCK-8法檢測細(xì)胞增殖率,Western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)變化,從而比較轉(zhuǎn)染bcl-2基因前后,U937細(xì)胞對柔紅霉素敏感性的變化。結(jié)果成功構(gòu)建質(zhì)粒pc DNA3.1(+)/bcl-2,轉(zhuǎn)染入U937細(xì)胞,PCR證實其轉(zhuǎn)染效果;CCK-8法檢測結(jié)果顯示U937/bcl-2組細(xì)胞存活率顯著高于對照組和空載體對照組;bcl-2基因過表達(dá)降低caspase-3片段的裂解活化,降低U937細(xì)胞對柔紅霉素的敏感性。結(jié)論bcl-2過表達(dá)抑制caspase-3激活、抑制柔紅霉素殺傷U937細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞對柔紅霉素耐藥。bcl-2可作為臨床治療急性髓系白血病的靶點。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of daunorubicin (daunorubicin) resistance in acute myeloid leukemia induced by overexpression of bcl-2 gene. Methods Human acute myeloid leukemia cell line U937 was transfected with plasmid pc DNA3.1 () / bcl-2, by molecular cloning technique. The cells were divided into normal control group, empty vector control group, transfection group and daunorubicin culture for 24 h, and the cells were cultured with daunorubicin for 24 h. Cell proliferation rate, Western blot was used to detect the expression of apoptosis-related proteins in U937 cells. The sensitivity of U937 cells to daunorubicin (daunorubicin) was compared before and after bcl-2 gene transfection. Results the plasmid pc DNA3.1 () / bcl-2, was successfully constructed and transfected into U937 cells, and the transfection effect was confirmed by PCR. The cell survival rate of U937/bcl-2 group was significantly higher than that of control group and empty vector control group by CCK-8 assay. The overexpression of bcl-2 gene decreased the activation of caspase-3 fragment and decreased the sensitivity of U937 cells to daunorubicin. Conclusion the overexpression of bcl-2 inhibits the activation of caspase-3, inhibits daunorubicin killing U937 cells and leads to drug resistance to daunorubicin. Bcl-2 can be used as a target for clinical treatment of acute myeloid leukemia.
【作者單位】: 南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院血液科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(編號:81200372) 江西省衛(wèi)生計生委科技計劃(編號:20165167)
【分類號】:R733.71

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本文編號:2437999

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