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多西環(huán)素對(duì)體外人小細(xì)胞肺癌H446細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2019-02-14 10:35
【摘要】:目的探討多西環(huán)素對(duì)體外人小細(xì)胞肺癌H446細(xì)胞增殖的影響及其可能的作用機(jī)制。方法不同濃度的多西環(huán)素作用于體外培養(yǎng)的人小細(xì)胞肺癌H446細(xì)胞24、48、72或96 h,采用CCK-8法檢測(cè)多西環(huán)素對(duì)H446細(xì)胞增殖的影響;采用Bliss法計(jì)算半數(shù)抑制濃度(IC50);采用TUNEL法檢測(cè)多西環(huán)素對(duì)H446細(xì)胞凋亡的影響;采用Western印跡法檢測(cè)多西環(huán)素對(duì)Bcl-2、Bax等凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響;采用實(shí)時(shí)定量-PCR法檢測(cè)多西環(huán)素對(duì)Bcl-2、Bax等凋亡相關(guān)基因m RNA表達(dá)的影響。結(jié)果多西環(huán)素可濃度-時(shí)間依賴(lài)性地抑制人小細(xì)胞肺癌H446細(xì)胞的體外增殖,作用24、48、72和96 h對(duì)應(yīng)的IC50值分別為24.10、10.98、8.20和8.03 mg/L;多西環(huán)素作用后H446細(xì)胞的凋亡指數(shù)顯著增加(P0.05);Bax的蛋白及m RNA表達(dá)水平上調(diào),Bcl-2的蛋白及m RNA表達(dá)水平下調(diào),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論多西環(huán)素可通過(guò)上調(diào)促凋亡相關(guān)蛋白Bax的表達(dá),下調(diào)抑凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的表達(dá),誘導(dǎo)人小細(xì)胞肺癌H446細(xì)胞凋亡,進(jìn)而抑制人小細(xì)胞肺癌H446細(xì)胞的體外增殖,是一種有開(kāi)發(fā)前景的小細(xì)胞肺癌治療藥物。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of doxycycline on proliferation of human small cell lung cancer cell line H446 in vitro and its possible mechanism. Methods the effects of doxycycline at different concentrations on the proliferation of H446 cells cultured in vitro were detected by CCK-8 assay and the half inhibitory concentration (IC50) was calculated by Bliss assay. The effect of doxycycline on apoptosis of H446 cells was detected by TUNEL assay, and the expression of apoptosis-related proteins such as Bcl-2,Bax was detected by Western blotting. The effect of doxycycline on the expression of Bcl-2,Bax and other apoptosis-related genes m RNA was detected by real-time quantitative PCR. Results doxycycline inhibited the proliferation of human small cell lung cancer H446 cells in a concentration-time dependent manner. The IC50 values corresponding to the effects of 2448H 72 and 96 h were 24.10 ~ 10.98 ~ 8.20 and 8.03 mg/L;, respectively. The apoptotic index of H446 cells was significantly increased after the treatment of doxycycline (P0.05). The expression level of); Bax protein and m RNA was up-regulated, and the expression level of Bcl-2 protein and m RNA was down-regulated. The difference was statistically significant (P0.05). Conclusion doxycycline can up-regulate the expression of pro-apoptosis-related protein Bax, down-regulate the expression of anti-apoptosis-related protein Bcl-2, induce apoptosis of human small cell lung cancer cell line H446, and then inhibit the proliferation of human small cell lung cancer cell line H446 in vitro. It is a promising drug for the treatment of small cell lung cancer.
【作者單位】: 開(kāi)平市第二人民醫(yī)院;南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81173014) 廣東省科技計(jì)劃資助項(xiàng)目(2014A020212197)
【分類(lèi)號(hào)】:R734.2

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