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HELQ對骨肉瘤細(xì)胞增殖、侵襲、遷移的影響及機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2019-01-07 13:48
【摘要】:目的探討POLQ樣蛋白解旋酶(HELQ)對骨肉瘤細(xì)胞增殖、侵襲、遷移的影響及作用機(jī)制。方法將體外培養(yǎng)的人源骨肉瘤細(xì)胞系U2-OS、143B隨機(jī)分為Lv-HELQ組、NC組、Lv-sh HELQ組,分別轉(zhuǎn)染Lv-HELQ、Lv-Negative、Lv-sh HELQ慢病毒載體。轉(zhuǎn)染48 h時(shí),采用Western blotting法檢測HELQ蛋白表達(dá),結(jié)果顯示兩種細(xì)胞Lv-HELQ組HELQ蛋白相對表達(dá)量均高于NC組,Lv-sh HELQ組均低于NC組,組間比較P均0.05,提示HELQ轉(zhuǎn)染成功。三組(兩種細(xì)胞)轉(zhuǎn)染48 h時(shí),采用CCK8法檢測細(xì)胞增殖情況(光密度值),采用Wound healing法檢測細(xì)胞遷移率,采用Transwell invasion法檢測細(xì)胞穿膜細(xì)胞數(shù)(侵襲能力),采用彗星實(shí)驗(yàn)檢測彗星尾部DNA百分比。結(jié)果兩種細(xì)胞Lv-HELQ組光密度值均高于NC組,Lv-sh HELQ組光密度值均低于NC組,組間比較P0.05或0.01。兩種細(xì)胞Lv-HELQ組細(xì)胞遷移率、穿膜細(xì)胞數(shù)及均彗星尾部DNA百分比均低于NC組,Lv-sh HELQ組均高于NC組,組間比較P均0.05。結(jié)論 HELQ可抑制人骨肉瘤細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移,修復(fù)DNA損傷可能是其作用機(jī)制。
[Abstract]:Objective to investigate the effect and mechanism of POLQ like protein helicase (HELQ) on proliferation, invasion and migration of osteosarcoma cells. Methods Human osteosarcoma cell line U2-OS-143B was randomly divided into Lv-HELQ group, NC group and Lv-sh HELQ group. The cells were transfected with Lv-HELQ,Lv-Negative,Lv-sh HELQ lentivirus vector. At 48 h after transfection, the expression of HELQ protein was detected by Western blotting method. The results showed that the relative expression of HELQ protein in Lv-HELQ group was higher than that in NC group, and that in Lv-sh HELQ group was lower than that in NC group (P 0.05), indicating that HELQ transfection was successful. After 48 h transfection of three groups of cells (two kinds of cells), the cell proliferation (optical density) was detected by CCK8 assay, the cell migration rate was measured by Wound healing assay, and the number of cell transmembrane cells (invasiveness) was measured by Transwell invasion method. Comet assay was used to detect the percentage of comet tail DNA. Results the optical density of Lv-HELQ group was higher than that of NC group, and that of Lv-sh HELQ group was lower than that of NC group. The cell mobility, the number of transmembrane cells and the percentage of DNA in the tail of comet were lower in Lv-HELQ group than in NC group, but higher in Lv-sh HELQ group than in NC group (P 0.05). Conclusion HELQ can inhibit the proliferation, invasion and metastasis of human osteosarcoma cells and repair the damage of DNA.
【作者單位】: 井岡山大學(xué)附屬醫(yī)院;南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院;深圳市南山區(qū)人民醫(yī)院;
【分類號】:R738.1

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9 朱U,

本文編號:2403737


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