【摘要】：第一部分血清鉻粒素A對(duì)胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷價(jià)值研究背景和目的胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(pancreatic neuroendocrine tumors, PNETs)是一類(lèi)少見(jiàn)腫瘤,但近年來(lái)歐美和亞洲的發(fā)病率均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。鉻粒素A(chromogranin A, CgA)是診斷PNETs有效的血清標(biāo)志物,在歐美已廣泛應(yīng)用于臨床診斷,但國(guó)內(nèi)的相關(guān)研究很少,目前中國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局還沒(méi)有批準(zhǔn)檢測(cè)外周血CgA應(yīng)用于臨床診斷PNETs.我們?cè)谘芯恐幸馔獾匕l(fā)現(xiàn)血清CgA濃度在胰島素瘤和非胰島素瘤PNETs之間存在著巨大的差別,臨床實(shí)踐中這一點(diǎn)尚未得到應(yīng)有的關(guān)注。本研究的目的就是評(píng)估血清CgA對(duì)不同亞類(lèi)PNETs特別是胰島素瘤患者的診斷價(jià)值。研究方法用ELISA方法檢測(cè)57例胰島素瘤患者、32例非胰島素瘤PNETs患者和86位健康志愿者的血清CgA水平,繪制受試者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲線來(lái)評(píng)估其診斷價(jià)值。用免疫組化檢測(cè)26個(gè)PNETs組織的CgA表達(dá)。按照歐洲神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤學(xué)會(huì)(European Neuroendocrine Tumor Society, ENETS)制定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行腫瘤分級(jí)和分期。研究結(jié)果89例PNETs患者的血清CgA水平顯著高于健康對(duì)照組(P=7.2×10-9)。57例胰島素瘤患者的血清CgA水平(中位數(shù)為64.8 ng/ml,范圍25.0-164.2 ng/ml)略高于健康對(duì)照組(中位數(shù)為53.4 ng/ml,范圍39.1-94.1 ng/ml),顯著低于非胰島素瘤PNETs患者(中位數(shù)為192.5 ng/ml,范圍26.9-9020.7 ng/ml), P=0.001.ROC曲線分析顯示血清CgA濃度為60.4 ng/ml時(shí),診斷胰島素瘤的靈敏度和特異性分別為66.7%和73.3%；而血清CgA濃度為73.9 ng/ml時(shí),診斷非胰島素瘤PNETs的靈敏度和特異性分別為65.6%和91.9%。研究結(jié)論血清CgA是診斷非胰島素瘤PNETs患者的可靠分子標(biāo)志物,但不適合診斷胰島素瘤。第二部分中、美胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤臨床病理特征的異同和判斷預(yù)后的臨床病理指標(biāo)研究背景和目的胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(pancreatic neuroendocrine tumors, PNETs)是一類(lèi)少見(jiàn)腫瘤,但近年來(lái)歐美和亞洲的發(fā)病率均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。歐美神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤學(xué)會(huì)制訂的分級(jí)和分期系統(tǒng)是否適用于判斷中國(guó)PNETs患者的預(yù)后,歐美PNETs患者的臨床病理特征與中國(guó)患者有無(wú)差異,未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。本研究的主要目的是比較中、美PNETs患者臨床病理特征和預(yù)后的異同并評(píng)估預(yù)判PNETs患者預(yù)后的臨床病理指標(biāo)。研究方法腫瘤分級(jí)和分期按照歐洲神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤學(xué)會(huì)(ENETS)制定的標(biāo)準(zhǔn)。運(yùn)用t檢驗(yàn)、非參數(shù)檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)或Fisher精確檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法,比較517例中國(guó)PNETs患者和450例美國(guó)PNETs患者臨床病理特征的異同。運(yùn)用Kaplan-Meier生存分析和Cox回歸模型分析來(lái)評(píng)估判斷預(yù)后的臨床指標(biāo)。研究結(jié)果1、中國(guó)PNETs患者的中位發(fā)病年齡比美國(guó)患者年輕,表現(xiàn)在：無(wú)功能PNETs,46歲vs.57歲,P=1.2 x 10-15；功能性PNETs,46歲vs.53歲,P=0.003;胰島素瘤,46歲vs.54歲,P=0.033;非胰島素瘤PNETs,46歲vs.56歲,P=5.4 x 10-15。2、中國(guó)無(wú)功能PNETs的直徑中位數(shù)比美國(guó)的大,4 cm vs.3 cm, P=2.1×10-9。3、中、美PNETs的原發(fā)部位有差異。65.2%的美國(guó)無(wú)功能PNETs發(fā)生在胰腺體尾部,而55.9%的中國(guó)無(wú)功能PNETs發(fā)生在胰腺頭頸部,二者差異顯著(P=2.8×10-6)。73.9%的美國(guó)胰島素瘤發(fā)生于胰腺體尾部,而52.1%的中國(guó)胰島素瘤發(fā)生在胰腺體尾部,二者差異明顯(P=0.006)。4、分析發(fā)現(xiàn),PNETs患者的腫瘤分級(jí)高、分期高、Ki-67指數(shù)升高、腫瘤大以及發(fā)生轉(zhuǎn)移,他們的預(yù)后則差。Cox分析發(fā)現(xiàn),腫瘤分級(jí)和分期是PNETs患者總生存的獨(dú)立影響因素(P值分別為3.12×10-8和8.25×10-6),也是無(wú)病生存的獨(dú)立影響因素(P值分別為5.37×10-18和3.54×10-5)。5、性別是美國(guó)PNETs患者總生存的獨(dú)立影響因素,女性患者的總生存更長(zhǎng)(P=0.042),但是中國(guó)患者總生存與性別無(wú)關(guān)。研究結(jié)論中、美兩國(guó)PNETs患者的臨床病理特征存在明顯差異。腫瘤分級(jí)和分期是判斷PNETs患者預(yù)后的可靠臨床病理指標(biāo)。第三部分胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤預(yù)后分子標(biāo)志物探索研究背景和目的臨床病理指標(biāo)能有效地判斷PNETs患者的預(yù)后,但有一定的局限性。我們以往胰島素瘤蛋白質(zhì)組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)蛋白α-internexin和UCH-L1在腫瘤中表達(dá),且a-internexin可以判斷PNETs患者的總生存,但不適合判斷無(wú)病生存。本研究的第一個(gè)目的是在兩個(gè)獨(dú)立隊(duì)列中驗(yàn)證該兩種蛋白共同表達(dá)可否更好地判斷PNETs預(yù)后。2011年美國(guó)報(bào)道DAXX基因突變與PNETs預(yù)后好相關(guān),DAXX突變導(dǎo)致蛋白表達(dá)缺失。2014年瑞士的研究則認(rèn)為DAXX突變導(dǎo)致的DAXX蛋白表達(dá)下調(diào)和PNETs預(yù)后差相關(guān)。鑒于此不一致的結(jié)論,本研究的第二個(gè)目的是在較大的PNETs樣本中檢測(cè)DAXX蛋白表達(dá)并明確其表達(dá)和患者預(yù)后的關(guān)系,同時(shí)測(cè)定DAXX和α-internexin兩種蛋白的共同表達(dá)并評(píng)判其表達(dá)和預(yù)后的關(guān)系。研究方法用免疫組化染色方法檢測(cè)UCH-L1和α-internexin兩種蛋白在286個(gè)腫瘤組織中的表達(dá),并在兩個(gè)獨(dú)立PNETs隊(duì)列中分析這兩種蛋白同時(shí)表達(dá)與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系。免疫組化檢測(cè)295個(gè)PNETs組織的DAXX蛋白表達(dá)。分析DAXX表達(dá)、DAXX和α-internexin同時(shí)表達(dá)及以上三種蛋白同時(shí)表達(dá)與PNETs患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。用Sanger法檢測(cè)PNETs患者的DAXX基因外顯子突變。研究結(jié)果在兩個(gè)獨(dú)立隊(duì)列和總隊(duì)列中,UCH-L1和α-internexin兩種蛋白在PNETs中同時(shí)表達(dá)與患者的預(yù)后好顯著相關(guān)(log rank P=8.77×10-5)。DAXX表達(dá)陽(yáng)性與PNETs患者無(wú)病生存延長(zhǎng)顯著相關(guān)(P=4.78×10-5)。DAXX和α-internexin兩種蛋白同時(shí)表達(dá)不僅與PNETs患者無(wú)病生存延長(zhǎng)顯著相關(guān)(P=0.03)而且與較好的總生存顯著相關(guān)(P=0.009)。UCH-L1、α-internexin和DAXX三種蛋白同時(shí)表達(dá)與PNETs患者較好的無(wú)病生存顯著相關(guān)(P=0.002)。研究結(jié)論同時(shí)測(cè)定兩種蛋白比檢測(cè)單一蛋白能更好地判斷PNETs患者的預(yù)后,UCH-L1和α-internexin兩種蛋白是獨(dú)立判斷PNETs患者預(yù)后的分子標(biāo)志物,同樣DAXX和α-internexin兩種蛋白同時(shí)表達(dá)和患者較好的預(yù)后相關(guān)。同時(shí)測(cè)定三種蛋白的表達(dá)判斷患者的預(yù)后,特異性更高。
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【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.9

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;Characterization of Genes Associated with Different Phenotypes of Human Bladder Cancer Cells[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;2006年09期

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本文編號(hào)：2396630