【摘要】：隨著人類生存環(huán)境的惡化,惡性腫瘤成為世界上致死率最高的疾病之一,肺癌的發(fā)病率及致死率居所有惡性腫瘤之首。肺癌可以分為非小細(xì)胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)和小細(xì)胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)。其中NSCLC約占肺癌總數(shù)的80%-85%,NSCLC中的肺腺癌占比逐年升高。其病情發(fā)展迅速,轉(zhuǎn)移速度快,大部分病人發(fā)現(xiàn)時(shí)已發(fā)展至中晚期,手術(shù)機(jī)會(huì)少,術(shù)后復(fù)發(fā)率高,預(yù)后差,晚期患者的5年生存率不足15%,肺腺癌已經(jīng)成為了臨床治療的難點(diǎn)。目前化療和分子靶向治療均遇到了瓶頸,為了提升患者的治療效果和延長(zhǎng)其生存時(shí)間,探求新的更為有用的治療方法有著非常重要的臨床意義。免疫卡控點(diǎn)抑制劑很有可能成為肺癌常規(guī)治療的重要組成部分,聯(lián)合靶向和免疫治療將是未來(lái)的一種新型治療模式。本研究試圖探討這兩種治療方法的目標(biāo)靶點(diǎn)之間的聯(lián)系和相關(guān)性,為將來(lái)的聯(lián)合治療模式尋求治療依據(jù)和目標(biāo)人群。免疫卡控點(diǎn)(Immune checkpoints)的重要成員,如B7家族負(fù)性協(xié)同刺激分子,PD-L1、B7-H3、B7-H4等,可異常表達(dá)于諸多人類腫瘤組織及腫瘤浸潤(rùn)的免疫細(xì)胞中,參與腫瘤免疫逃逸并與患者的臨床病理參數(shù)及預(yù)后密切相關(guān),是腫瘤微環(huán)境的重要組成部分。它們一方面通過(guò)負(fù)性調(diào)控T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤應(yīng)答,另一方面通過(guò)調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞自身的生物學(xué)行為,共同參與腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。研究表明,PD-L1可作為肺癌治療的重要免疫干預(yù)靶點(diǎn)。但是,截至目前,PD-L1在肺癌中異常表達(dá)的臨床意義、生物學(xué)功能及作用機(jī)制亟待深入探討。本文首先通過(guò)RNAi技術(shù)、慢病毒感染、流式分選、細(xì)胞增殖、劃痕試驗(yàn)、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期及凋亡分析、T細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)等系列研究,論證肺癌細(xì)胞株異常表達(dá)PD-L1的生物學(xué)作用;其次,結(jié)合肺腺癌術(shù)后的臨床病例進(jìn)行回顧性研究,探討肺腺癌患者EGFR及KARS突變情況、PD-L1及PD-1表達(dá)水平等重要生物學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性,以期了解肺腺癌免疫卡控點(diǎn)干預(yù)聯(lián)合靶向治療對(duì)患者預(yù)后的影響,為尋求肺癌綜合治療模式奠定基礎(chǔ)。本研究結(jié)果顯示:(1)免疫卡控點(diǎn)PD-L1在肺癌細(xì)胞株中高表達(dá),我們通過(guò)RNAi技術(shù)、慢病毒感染、流式分選技術(shù),在肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549(腺癌),SK-MES-1(鱗癌)中成功構(gòu)建了PD-L1下調(diào)表達(dá)的模型;(2)細(xì)胞增殖、劃痕試驗(yàn)、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期及凋亡分析等研究結(jié)果表明,免疫卡控點(diǎn)分子PD-L1在肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549,SK-MES-1中下調(diào)表達(dá)后,均顯著抑制上述細(xì)胞系的增殖能力、遷移能力、侵襲能力,并可導(dǎo)致細(xì)胞周期阻滯;(3)鑒于靶向治療在肺癌中的重要作用,我們同時(shí)檢測(cè)了免疫卡控點(diǎn)分子PD-L1在肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549,SK-MES-1中下調(diào)表達(dá)后EGFR的基因表達(dá)水平,結(jié)果顯示PD-L1在A549,SK-MES-1中下調(diào)表達(dá)后,EGFR的基因表達(dá)水平顯著下調(diào);(4)我們進(jìn)一步收集100例肺腺癌患者手術(shù)后石蠟組織樣本,免疫組織化學(xué)檢測(cè)PD-L1的表達(dá)水平,分析其臨床意義并回顧性分析其預(yù)后價(jià)值,結(jié)果表明PD-L1低表達(dá)60例(60/100,60%),PD-L1高表達(dá)40例(40/100,40%),我們發(fā)現(xiàn)肺癌組織中PD-L1表達(dá)水平與患者預(yù)后成顯著負(fù)相關(guān)(P=0.032),與其它臨床病理參數(shù)無(wú)顯著相關(guān)性;(5)我們進(jìn)一步運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)其EGFR基因突變情況檢測(cè),結(jié)果表明PD-L1低表達(dá)患者中EGFR突變?nèi)藬?shù)為42人(42/60,70%);PD-L1高表達(dá)患者中EGFR突變?nèi)藬?shù)為18人(18/40,45%)。PD-L1表達(dá)水平、病理分期、EFGR突變狀態(tài)可以作為肺腺癌患者的一個(gè)獨(dú)立預(yù)后因素。(6)我們進(jìn)一步通過(guò)免疫組織化學(xué)檢測(cè)100例肺癌患者中PD-1的表達(dá)水平,運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)其KRAS基因突變情況,結(jié)果表明,PD-1低表達(dá)47人(47/100,47%),PD-1低表達(dá)患者中KRAS突變?nèi)藬?shù)為8人(8/47,17%);PD-1高表達(dá)53人(53/100,53%),PD-1高表達(dá)患者中KRAS突變?nèi)藬?shù)為2人(2/53,3.8%),PD-1的表達(dá)與KRAS突變呈負(fù)相關(guān)。綜上所述,我們探討了免疫卡控點(diǎn)分子PD-L1在肺癌中表達(dá)的生物學(xué)作用及臨床意義,證實(shí)了免疫卡控點(diǎn)分子PD-L1可以通過(guò)調(diào)控肺癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲、轉(zhuǎn)移及細(xì)胞周期調(diào)控等途徑參與促進(jìn)肺癌的發(fā)生與進(jìn)展。同時(shí),我們發(fā)現(xiàn)肺癌靶向治療的重要靶點(diǎn)EGFR基因的突變情況與PD-L1表達(dá)水平及患者預(yù)后密切相關(guān)。肺腺癌的靶向治療以及基于PD-L1的免疫治療,將為未來(lái)肺腺癌綜合治療模式提供新思路和新策略,具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R734.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 許運(yùn)龍,郭昭揚(yáng),張?jiān)婆d,許賢榮;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在人非小細(xì)胞肺癌中表達(dá)的臨床研究[J];中華腫瘤雜志;2000年05期

2 王繼營(yíng),高珊,崔黎,黃麗春,宋立友;“雙異”聯(lián)合治療晚期非小細(xì)胞肺癌37例[J];中國(guó)肺癌雜志;2000年02期

3 田靜,李蓓蘭;老年晚期非小細(xì)胞肺癌的化療:一種新趨勢(shì)[J];中國(guó)肺癌雜志;2000年05期

4 張世雯,周清華;不同的分割方案與化療聯(lián)合治療非小細(xì)胞肺癌[J];中國(guó)肺癌雜志;2000年05期

5 胡發(fā)明,華波;血清白介素-10水平是晚期非小細(xì)胞肺癌病人的一項(xiàng)預(yù)后因素[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊(cè));2000年11期

6 于亮,王梅,張燦灼;微血管在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義[J];泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年04期

7 朱建英;預(yù)計(jì)2009年非小細(xì)胞肺癌藥物市場(chǎng)將達(dá)20億美元[J];國(guó)外醫(yī)藥(合成藥 生化藥 制劑分冊(cè));2001年02期

8 張利偉,劉樹(shù)秋,陳海英,萬(wàn)錦華;立體定向適形放療配合常規(guī)放療治療非小細(xì)胞肺癌近期療效分析[J];黑龍江醫(yī)藥科學(xué);2001年05期

9 王肇炎;晚期非小細(xì)胞肺癌的解救化療[J];腫瘤研究與臨床;2001年01期

10 朱堯武,楊宇飛;非小細(xì)胞肺癌的術(shù)后輔助治療[J];中國(guó)臨床醫(yī)生;2001年12期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 張新民;唐蜜;李代強(qiáng);;磷酸化酪氨酸蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

2 胡旭東;楊國(guó)仁;霍宗偉;方永存;陳鳴陸;;~(99m)Tc-MIBI SPECT顯像觀察非小細(xì)胞肺癌多藥耐藥的研究[A];首屆全國(guó)腫瘤核醫(yī)學(xué)新技術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

3 秦慶亮;熊海健;王愛(ài);邊海蓉;盧振國(guó);楊培英;朱斌耀;王蕓;;立體定向放射治療放療后復(fù)發(fā)非小細(xì)胞肺癌[A];2007第六屆全國(guó)放射腫瘤學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2007年

4 馮耘;萬(wàn)歡英;高蓓莉;項(xiàng)軼;劉嘉琳;;血管緊張素轉(zhuǎn)換酶二在非小細(xì)胞肺癌腫瘤生長(zhǎng)和血管生成中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第五屆全國(guó)胸部腫瘤及內(nèi)窺鏡學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

5 ;非小細(xì)胞肺癌術(shù)后輔助治療及一線治療[A];天津市抗癌協(xié)會(huì)肺癌專業(yè)委員會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

6 蔣峰;許林;史美祺;;1560例非小細(xì)胞肺癌患者多因素預(yù)后分析[A];第13屆全國(guó)肺癌學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2013年

7 張華;;術(shù)前中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞比值對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的影響[A];第13屆全國(guó)肺癌學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2013年

8 王子平;;老年晚期非小細(xì)胞肺癌治療思考[A];第三屆中國(guó)腫瘤內(nèi)科大會(huì)教育集暨論文集[C];2009年

9 張沂平;;非小細(xì)胞肺癌個(gè)體化化療[A];2009年浙江省腫瘤學(xué)術(shù)年會(huì)暨腫瘤診治新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2009年

10 劉嘉湘;施志明;李和根;徐振曄;朱晏偉;趙麗紅;高虹;劉苓霜;朱惠蓉;張暉;;益肺抗瘤飲治療271例非小細(xì)胞肺癌臨床觀察[A];中醫(yī)藥優(yōu)秀論文選（下）[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 李穎;特羅凱對(duì)中國(guó)非小細(xì)胞肺癌患者效果佳[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

2 曉白;非小細(xì)胞肺癌研究獲重大進(jìn)展[N];人民日?qǐng)?bào);2008年

3 記者 張文天;非小細(xì)胞肺癌中醫(yī)藥綜合醫(yī)療方案研究進(jìn)展順利[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

4 辛勇　張先穩(wěn);早期非小細(xì)胞肺癌的治療進(jìn)展[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2004年

5 記者高新軍;專家提出 建非小細(xì)胞肺癌中醫(yī)臨床指南[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2009年

6 上海長(zhǎng)海醫(yī)院呼吸科 夏陽(yáng) 整理 邱志濤;非小細(xì)胞肺癌放虎歸山還是乘勝追擊[N];健康報(bào);2013年

7 記者 王丹;新研究揭示炎癥促非小細(xì)胞肺癌發(fā)生機(jī)制[N];健康報(bào);2014年

8 記者 李穎;凱美納成晚期非小細(xì)胞肺癌治療優(yōu)選方案[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

9 白京麗;非小細(xì)胞肺癌最佳治療方案[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2000年

10 ;表皮生長(zhǎng)因子受體抑制劑在治療非小細(xì)胞肺癌中的作用[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 白艷（Bai Sally）;整合素αvβ5合并EGFR檢測(cè)用于非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后評(píng)估的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

2 王筱恬;PLZF和DACH1的異常表達(dá)影響非小細(xì)胞肺癌發(fā)生與發(fā)展的分子機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

3 洪專;木犀草素治療EGF受體繼發(fā)性突變的非小細(xì)胞肺癌的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京大學(xué);2014年

4 張沛;ILT4在非小細(xì)胞肺癌中的作用及分子機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

5 王世坤;RBP2誘導(dǎo)非小細(xì)胞肺癌和食管鱗癌表皮間質(zhì)化[D];山東大學(xué);2015年

6 趙世俊;~(18)F-FDG PET/CT在非小細(xì)胞肺癌預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

7 邱晨;影響非小細(xì)胞肺癌手術(shù)后遠(yuǎn)期生存的相關(guān)因素分析[D];山東大學(xué);2015年

8 姜遠(yuǎn)矚;術(shù)前血液學(xué)指標(biāo)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后關(guān)系的研究[D];山東大學(xué);2015年

9 朱良明;STAT3及其靶基因?qū)Ψ切〖?xì)胞肺癌生物學(xué)行為調(diào)控機(jī)制的初步實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2015年

10 周菊;HPV-16感染對(duì)非小細(xì)胞肺癌和A549細(xì)胞的影響及miRNAs表達(dá)改變的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王勇;誘導(dǎo)型一氧化氮合酶在非小細(xì)胞肺癌中表達(dá)的臨床意義[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2006年

2 陳婷;非小細(xì)胞肺癌調(diào)強(qiáng)放射治療預(yù)后因素分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 王波;單向式全胸腔鏡下解剖性肺葉切除術(shù)治療早期非小細(xì)胞肺癌的學(xué)習(xí)曲線[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 施桂清;血管內(nèi)皮抑制素聯(lián)合放化療治療非小細(xì)胞肺癌的療效及安全性研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

5 王靜;Eg5、Ki-67在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 覃建穎;IL-21和Tc1細(xì)胞在非小細(xì)胞肺癌患者外周血及癌灶中的變化及相互作用[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

7 張瑞;ⅢA-N2期非小細(xì)胞肺癌手術(shù)治療和放射治療的療效對(duì)比及相關(guān)預(yù)后因素的分析[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

8 石姣姣;基于多肽構(gòu)建抗腫瘤靶向藥物的應(yīng)用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

9 胡世霖;非小細(xì)胞肺癌中醫(yī)辨證分型與Napsin A、TTF-1在肺癌組織中表達(dá)的相關(guān)性研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2015年

10 王婷婷;細(xì)胞因子活化殺傷細(xì)胞治療非小細(xì)胞肺癌臨床研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：2392906