【摘要】：研究目的檢測(cè)VEGF-C、VEGF-D和STAT3在胃癌組織及其相應(yīng)癌旁正常組織中的表達(dá)情況及差異;檢測(cè)AGS、SUN-1、KATO-III、BGC-823、MGC-803、SGC-7901和HGC-27各胃癌細(xì)胞系及GES-1正常細(xì)胞系中STAT3和VEGF-D的表達(dá)情況及差異。探討VEGF-C和VEGF-D在STAT3作用下促進(jìn)淋巴管生成機(jī)制的研究。研究方法收集我院2005年1月分到2006年12月分期間行胃癌根治手術(shù),經(jīng)病理學(xué)證實(shí)為腺癌并且具有完整隨訪資料的107例患者的癌組織和相應(yīng)癌旁正常組織標(biāo)本。酶免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)VEGF-C、VEGF-D和STAT3的表達(dá)情況并分析其與胃癌臨床病理特征及預(yù)后之間的關(guān)系。RT-PCR法檢測(cè)胃癌組織和相應(yīng)癌旁正常組織中VEGF-C、VEGF-D和STAT3基因水平上的差異;Western Blot檢測(cè)AGS、SUN-1、KATO-III、BGC-823、MGC-803、SGC-7901和HGC-27各胃癌細(xì)胞系及GES-1正常細(xì)胞系中VEGF-C、VEGF-D和STAT3的蛋白表達(dá)及差異。STAT3在siRNA轉(zhuǎn)染之后,基因微陣列檢測(cè)VEGF-C和VEGF-D mRNA變化情況。研究結(jié)果1、在107例胃癌組織標(biāo)本中,VEGF-C的陽(yáng)性表達(dá)率為38.3%(41/107),明顯高于相應(yīng)癌旁正常組織20.6%(22/107);VEGF-D的陽(yáng)性表達(dá)率為43.9%(47/107),明顯高于相應(yīng)癌旁正常組織14.0%(15/107)。STAT3的陽(yáng)性表達(dá)率高達(dá)62.6%(67/107),而癌旁相應(yīng)正常組織陽(yáng)性表達(dá)率僅僅為8.4%(9/107)。P-STAT3的陽(yáng)性表達(dá)率為38.3%(41/107),明顯癌旁高于相應(yīng)正常組織1.9%(2/107)。VEGF-C、VEGF-D、STAT3及p-STAT3在胃癌組織中的表達(dá)均明顯高于癌旁正常組織,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(pVEGF-C=0.009,pVEGF-D=0.031,p STAT3=0.035,p p-STAT-3=0.014)。2、對(duì)107例胃癌患者進(jìn)行生存分析顯示:性別、N分期,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移范圍、VEGF-C、VEGF-D、STAT-3和磷酸化STAT3陽(yáng)性表達(dá)與本組胃癌患者的預(yù)后密切相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。Kaplan-Meier法多生存分析顯示p-STAT3陽(yáng)性表達(dá)(HR=0.431,p0.001)和N分期(HR=1.570,p0.001)是本組胃癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(p0.05)。3、在107例胃癌中,vegf-c、vegf-d和stat3基因mrna的相對(duì)表達(dá)量均明顯高于相應(yīng)癌旁正常組織,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2.26±0.83vs0.40±0.12,pvegf-c=0.007;1.26±0.55vs0.75±0.29,pvegf-d=0.041;3.15±1.32vs1.13±0.64,pstat3=0.004)。4、stat3基因mrna的相對(duì)表達(dá)量在ags、sun-1、kato-iii、bgc-823、mgc-803、sgc-7901和hgc-27胃癌細(xì)胞系中均明顯高于ges-1正常細(xì)胞系,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(pags=0.014,psun=0.020,pkato-iii=0.026,pbgc-823=0.023,pmgc-803=0.019,psgc-7901=0.018,phgc-27=0.014)。在ags、sun-1、kato-iii、bgc-823、mgc-803、sgc-7901和hgc-27胃癌細(xì)胞系中,vegf-d基因mrna的相對(duì)表達(dá)量亦均明顯高于ges-1正常細(xì)胞系,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(pags=0.012,psun=0.025,pkato-iii=0.017,pbgc-823=0.015,pmgc-803=0.009,psgc-7901=0.014,phgc-27=0.007)。而vegf-d基因mrna在各胃癌細(xì)胞系中的相對(duì)表達(dá)量未見(jiàn)明顯高于ges-1正常細(xì)胞系,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(pags=0.064,psun=0.435,pkato-iii=0.108,pbgc-823=0.058,pmgc-803=0.235,psgc-7901=0.083,phgc-27=0.072)。5、相關(guān)性分析顯示胃癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)個(gè)數(shù)與vegf-c、vegf-d、stat3、p-stat3的表達(dá)顯著相關(guān)(pvegf-c=0.062、pvegf-d=0.034、pstat3=0.021、pp-stat3=0.004)。其中stat3的表達(dá)與vegf-c(p=0.106)、vegf-d(p=0.025)的表達(dá)顯著相關(guān);而p-stat3的表達(dá)只與vegf-d的表達(dá)相關(guān)。在107胃癌患者mrna相對(duì)表達(dá)量的相關(guān)分析中,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目與stat3mrna(p=0.018),vegf-cmrna(p=0.045)和vegf-dmrna(p=0.037)的相對(duì)表達(dá)量均顯著相關(guān)。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)stat3mrna的相對(duì)表達(dá)量與vegf-dmrna的相對(duì)表達(dá)量亦顯著相關(guān)(p=0.003)。6、sirna干擾stat3的表達(dá)后,vegf-c和vegf-d在hgc-27胃癌細(xì)胞中的蛋白表達(dá)量相對(duì)于對(duì)照組分別減少20%-30%和70%-80%。經(jīng)rna微陣列證實(shí),在sirna干擾stat3基因表達(dá)的hgc-27胃癌細(xì)胞中,5295基因的表達(dá)顯著減少,vegf-c和vegf-d的表達(dá)也顯著下降。在sirna干擾后的hgc-27胃癌細(xì)胞vegf-c的rna下降量為對(duì)照組的1.036倍,而vegf-d的下降量則為對(duì)照組的5.568倍。實(shí)驗(yàn)結(jié)論1、VEGF-C、VEGF-D和STAT3在胃癌組織和各胃癌細(xì)胞系中的表達(dá)均明顯高于相應(yīng)癌旁正常組織。2、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個(gè)數(shù)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移范圍、VEGF-C蛋白表達(dá)、VEGF-D蛋白表達(dá)、STAT3蛋白表達(dá)和p-STAT3蛋白陽(yáng)性表達(dá)對(duì)本研究中胃癌患者的預(yù)后有影響。p-STAT3蛋白表達(dá)和N分期是本組胃癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。3、在AGS、SUN-1、KATO-III、BGC-823、MGC-803、SGC-7901和HGC-27胃癌細(xì)胞系中,VEGF-C、VEGF-D和STAT3在蛋白水平和mRNA水平的表達(dá)均明顯高于GES-1胃正常細(xì)胞系。4、胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個(gè)數(shù)與VEGF-C、VEGF-D、STAT3、p-STAT3在蛋白水平和mRNA表達(dá)水平上均顯著相關(guān)。VEGF-C、VEGF-D在蛋白及mRNA表達(dá)水平上與STAT3的表達(dá)亦均顯著相關(guān)。5、干擾STAT3的表達(dá)后,VEGF-C、VEGF-D在蛋白及mRNA表達(dá)水平上均下調(diào),尤以VEGF-D下調(diào)最顯著。STAT3是通過(guò)上調(diào)VEGF-D的表達(dá)來(lái)促進(jìn)淋巴管的生成進(jìn)而導(dǎo)致淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移。
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【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;STAT-3 correlates with lymph node metastasis and cell survival in gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2010年42期

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本文編號(hào)：2387486