【摘要】：自噬(Autophagy)是真核細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的,依靠兩個(gè)泛素樣結(jié)合系統(tǒng)(Atg12和Atg8/LC3結(jié)合系統(tǒng))形成的雙層膜結(jié)構(gòu),將包裹的胞內(nèi)成分傳遞到溶酶體進(jìn)行降解,從而維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)成分穩(wěn)態(tài)的代謝機(jī)制。NK細(xì)胞(Natural killer cells)是機(jī)體固有免疫系統(tǒng)中重要的一員,在機(jī)體抗腫瘤和抗感染免疫中起著不可缺少的作用。關(guān)于NK細(xì)胞自噬活性的改變對(duì)NK細(xì)胞殺傷功能的影響,目前國內(nèi)外未見報(bào)道。因此,本課題利用自噬基因Atg3和Atg7條件性敲除小鼠對(duì)上述內(nèi)容進(jìn)行了探究。 我們利用他莫昔芬先敲除Atg3f/f ER-cre小鼠的Atg3自噬基因和Atg7f/f UbiER-cre小鼠的Atg7自噬基因,發(fā)現(xiàn)敲除組小鼠的NK細(xì)胞體外殺傷能力明顯增強(qiáng),并且胞內(nèi)具有更多的殺傷分子穿孔素和顆粒酶B。小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果也顯示,自噬缺陷的小鼠具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性并且存活期延長。進(jìn)一步機(jī)制研究發(fā)現(xiàn),自噬缺陷NK細(xì)胞的分化成熟以及活化程度(IFN-y合成)并沒有變化。同時(shí)自噬缺陷并不改變NK細(xì)胞表面活化性受體或者抑制性受體的表達(dá)水平。此外,通過CD107a檢測(cè)證實(shí)自噬不影響到NK細(xì)胞的殺傷性顆粒外排功能。這些結(jié)果說明NK細(xì)胞殺傷功能的增強(qiáng)主要是由于穿孔素和顆粒酶B的表達(dá)增加,其具體分子機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。
[Abstract]:Autophagy (Autophagy) is produced in eukaryotic cells. It is formed by two ubiquitin like binding systems (Atg12 and Atg8/LC3 binding systems), and the encapsulated intracellular components are transferred to lysosomes for degradation. NK cell (Natural killer cells) is an important member of the innate immune system and plays an indispensable role in anti-tumor and anti-infection immunity. The effect of autophagy activity of NK cells on the cytotoxicity of NK cells has not been reported at home and abroad. Therefore, in this study, autophagy gene Atg3 and Atg7 conditional knockout mice were used to explore the above contents. Using tamoxifen to knockout the Atg3 autophagy gene of Atg3f/f ER-cre mice and Atg7 autophagy gene of Atg7f/f UbiER-cre mice, we found that the killing ability of NK cells in the knockout group was significantly enhanced in vitro. And there are more cytotoxic perforin and granzyme B in the cell. The results also showed that the mice with autophagy deficiency had strong antitumor activity and prolonged survival time. Further studies showed that the differentiation, maturation and activation of autophagy deficient NK cells (IFN-y synthesis) did not change. At the same time, autophagy deficiency did not change the expression of activated or inhibitory receptors on the surface of NK cells. In addition, autophagy did not affect the efflux function of NK cells by CD107a detection. These results suggest that the enhancement of cytotoxicity of NK cells is mainly due to the increased expression of perforin and granzyme B. the specific molecular mechanism of the increase in the cytotoxicity of NK cells remains to be further studied.
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R73-3

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2381415