【摘要】：CRIP1(cysteine-rich intestinal protein 1)是含有雙鋅指結(jié)構(gòu)域的蛋白,在很多腫瘤細胞中高表達,但其在肺癌細胞中的生理學功能尚不明確。本研究應(yīng)用定量蛋白質(zhì)組學探究CRIP1過表達對肺癌順鉑耐藥細胞(A549/DDP)的影響及作用機制。運用慢病毒載體系統(tǒng)構(gòu)建了CRIP1過表達的A549/DDP穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系,利用Western Blotting證實了單克隆細胞系中CRIP1的過表達。發(fā)現(xiàn)CRIP1過表達能夠加快細胞增殖,增加細胞的耐藥性。通過定量蛋白質(zhì)組學分析,鑒定了CRIP1過表達引起的蛋白質(zhì)組的變化,并且對上調(diào)和下調(diào)的蛋白進行聚類分析。結(jié)果表明,CRIP1過表達上調(diào)了煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(NAMPT)和NAD依賴型氧化還原酶的表達,從而促進細胞的增殖,并且提高了細胞的耐藥性。
[Abstract]:CRIP1 (cysteine-rich intestinal protein 1), a protein containing double zinc finger domain, is highly expressed in many tumor cells, but its physiological function in lung cancer cells is unclear. In this study, quantitative proteomics was used to investigate the effect of CRIP1 overexpression on cisplatin resistant lung cancer cells (A549/DDP) and its mechanism. A stable A549/DDP cell line with overexpression of CRIP1 was constructed by using lentivirus vector system, and the overexpression of CRIP1 was confirmed by Western Blotting. It was found that overexpression of CRIP1 could accelerate cell proliferation and increase cell resistance. The proteome changes caused by CRIP1 overexpression were identified by quantitative proteomics analysis, and the up-regulated and down-regulated proteins were analyzed by cluster analysis. The results showed that overexpression of CRIP1 upregulated the expression of nicotinamide phosphate ribonucleosyltransferase (NAMPT) and NAD dependent oxidoreductase (NAD), which promoted cell proliferation and increased cell resistance.
【作者單位】： 清華大學生命科學學院教育部生物信息學重點實驗室;
【基金】：科技部973項目(2014CBA02005)資助
【分類號】：R734.2

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本文編號：2355065