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miR-221通過下調(diào)PTEN促進(jìn)肺癌A549細(xì)胞增殖

發(fā)布時間:2018-11-19 22:04
【摘要】:目的:探討微小RNA-221(miR-221)對肺癌A549細(xì)胞增殖的影響及其相關(guān)作用機(jī)制。方法:通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine 2000把miR-221 mimics轉(zhuǎn)染入肺癌細(xì)胞A549內(nèi),RT-q PCR檢測miR-221和PTEN mRNA的表達(dá);Western blot檢測PTEN蛋白表達(dá);CCK-8及平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖能力。構(gòu)建含PTEN 3'-UTR的螢光素酶報告載體,檢驗(yàn)miR-221對PTEN的靶向調(diào)控作用。結(jié)果:轉(zhuǎn)染miR-221后肺癌細(xì)胞中miR-221表達(dá)水平明顯高于對照組及空白組(P0.01),PTEN mRNA及蛋白表達(dá)均顯著下降(P0.05);細(xì)胞增殖及集落形成能力明顯增強(qiáng)(P0.05);miR-221能抑制PTEN的螢光素酶活性。結(jié)論:miR-221能夠抑制肺癌A549細(xì)胞中PTEN的表達(dá),并促進(jìn)細(xì)胞增殖。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of small RNA-221 (miR-221) on proliferation of lung cancer A549 cells and its related mechanism. Methods: miR-221 mimics was transfected into lung cancer cell A549 by liposome transfection reagent Lipofectamine 2000, the expression of miR-221 and PTEN mRNA was detected by RT-q PCR and PTEN protein was detected by; Western blot, and the proliferative ability of A549 cells was detected by CCK-8 and plate clone formation assay. The luciferase report vector containing PTEN 3'-UTR was constructed to test the targeting regulation of PTEN by miR-221. Results: after transfection of miR-221, the expression of miR-221 in lung cancer cells was significantly higher than that in control group and blank group (P0.01), PTEN mRNA and protein expression were significantly decreased (P0.05), cell proliferation and colony formation were significantly enhanced (P0.05). MiR-221 can inhibit the luciferase activity of PTEN. Conclusion: miR-221 can inhibit the expression of PTEN and promote the proliferation of lung cancer A549 cells.
【作者單位】: 珠海市人民醫(yī)院暨南大學(xué)附屬珠海醫(yī)院腫瘤科;
【分類號】:R734.2

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本文編號:2343552

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