發(fā)布時間：2018-11-19 12:19

【摘要】：第一章,緒論介紹了腫瘤這種頑固疾病及其誘發(fā)因素,并對腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行了介紹,重點介紹了microRNA。還介紹了生化分析中納米材料的應(yīng)用,并對熒光分析法和石英晶體微天平等相關(guān)分析方法進(jìn)行了理論和應(yīng)用的介紹,最后對腫瘤標(biāo)志物的檢測做出了展望。第二章,在制備氧化石墨烯的基礎(chǔ)上,以氧化石墨烯吸附單鏈核酸,并且有猝滅近距離熒光基團(tuán)的能力為基礎(chǔ),設(shè)計了通過Klenow酶實現(xiàn)信號放大,并通過熒光分析法進(jìn)行RNA檢測的方案。經(jīng)過klenow酶放大后,最低檢測濃度達(dá)到了1.0×10-11M,對RNA的線性檢測范圍為1.0×10-11M～1.0×10-9 M,并且通過不同的熒光基團(tuán)修飾DNA末端,實現(xiàn)了兩種RNA的檢測。第三章,合成了金納米粒子,并通過制備氨樹高分子,交聯(lián)得到了金膠納米簇。使用了雙聯(lián)特異性核酸酶,利用其對RNA與DNA雙鏈中DNA的特異性水解作用,實現(xiàn)對RNA的放大效果,最后使用石英晶體微天平對樣品進(jìn)行分析,對RNA的線性檢測范圍為1.0×10-11M～1.0×10-9 M,繪制了信號頻率變化值對RNA濃度的工作曲線。最后對乳腺癌細(xì)胞的全RNA提取物進(jìn)行了檢測,以檢測細(xì)胞中miR-203 RNA的含量。
[Abstract]:In the first chapter, the introduction introduces the stubborn tumor disease and its inducing factors, and introduces the tumor markers, especially microRNA.. The application of nanomaterials in biochemical analysis was also introduced. The related analytical methods such as fluorescence analysis and quartz crystal microbalance were introduced in theory and application. Finally, the detection of tumor markers was prospected. In the second chapter, based on the ability of graphene oxide to adsorb single-stranded nucleic acid and quench the short distance fluorescence group, the signal amplification by Klenow enzyme was designed. And the scheme of RNA detection by fluorescence analysis. After amplification of klenow enzyme, the lowest detection concentration was 1.0 脳 10 ~ (-11) M, and the linear detection range of RNA was 1.0 脳 10-11M~1.0 脳 10 ~ (-9) M. two kinds of RNA were detected by modifying DNA terminal with different fluorescent groups. In chapter 3, gold nanoparticles were synthesized, and gold colloidal nanoclusters were obtained by preparing ammonia tree polymer. The double specific nuclease was used to hydrolyze the DNA in RNA and DNA double strands to amplify the RNA. Finally, the quartz crystal microbalance was used to analyze the samples. The linear detection range of RNA is 1.0 脳 10-11M~1.0 脳 10 ~ (-9) M.The working curve of signal frequency variation value to RNA concentration is plotted. Finally, the total RNA extracts from breast cancer cells were detected to detect the content of miR-203 RNA in the cells.
【學(xué)位授予單位】：青島科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R730.4;O657.3

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本文編號：2342283