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體外不完全射頻消融后肝癌細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)長鏈非編碼RNA差異表達

發(fā)布時間:2018-11-13 09:25
【摘要】:目的研究上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)長鏈非編碼RNA(LncRNA)在不完全射頻消融(RFA)肝細胞癌(HCC)病灶的差異表達譜變化。方法采用Huh7細胞47℃水浴加熱,獲取體外模擬的不完全RFA HCC細胞。鏡下及免疫印跡檢測Huh7-H細胞EMT改變,Transwell檢測細胞遷移與侵襲能力,CCK-8檢測細胞增殖能力。采用Lnc Path~(TM) Human EMT Array芯片分析Huh7-H和Huh7差異表達的EMT相關(guān)LncRNA,RT-PCR驗證。結(jié)果鏡下顯示Huh7-H呈現(xiàn)EMT形態(tài)學(xué)改變。免疫印跡檢測顯示Huh7-H細胞上皮表型標志分子E-cadherin表達降低,間質(zhì)表型標志分子N-cadherin、vimentin表達增加。Transwell遷移及侵襲實驗顯示,Huh7-H、Huh7穿膜細胞數(shù)分別為(138.0±11.8)和(61.0±5.2)、(82.7±39.4)和(33.3±7.8),Huh7-H細胞遷移及侵襲能力明顯增強(P0.05)。CCK-8檢測顯示Huh7-H細胞增殖能力明顯增強(P0.05)。Lnc Path~(TM) Human EMT Array芯片篩選出3個差異表達LncRNA(P≤0.05,變化倍數(shù)≥1.5),即2條LncRNA(FUNDC2P4、RPL27P7)下調(diào),1條LncRNA(MTND4LP14)上調(diào)。RT-PCR驗證HUH7-H組FUNDC2P4、RPL27P7、MTND4LP14基因表達豐度分別是HUH-7組的0.137、0.869、1.037倍。臨床標本驗證LncRNA FUNDC2P4在癌旁組織表達高于HCC組織,HCC組織高于RFA術(shù)后殘余HCC組織。結(jié)論篩選出不完全RFA后HCC細胞低表達的EMT相關(guān)LncRNA FUNDC2P4,為深入探討該基因功能及分子機制提供了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to study the differential expression profile of (EMT) associated long chain noncoding RNA (LncRNA) in incomplete radiofrequency ablation (RFCA) of (RFA) hepatocellular carcinoma (HCC). Methods Huh7 cells were heated in water bath at 47 鈩,

本文編號:2328685

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