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抗原致敏DC與CIK共培養(yǎng)體外抗小細(xì)胞肺癌的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-10-26 12:45
【摘要】:目的:觀察小細(xì)胞肺癌NCI-H209細(xì)胞株抗原致敏樹突細(xì)胞(DC)與同源細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷(CIK)細(xì)胞共培養(yǎng)后的DC-CIK細(xì)胞體外對(duì)小細(xì)胞肺癌NCI-H209的殺傷活性,為小細(xì)胞肺癌的特異性細(xì)胞免疫治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:將健康成人外周血單個(gè)核細(xì)胞來(lái)源的DC經(jīng)NCI-H209細(xì)胞株抗原致敏后與同源CIK細(xì)胞共培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)分3組:NCI-H209抗原致敏DC與CIK共培養(yǎng)組(A組)、未致敏DC與CIK共培養(yǎng)組(B組)和單純CIK組(C組)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)DC及CIK免疫表型,使用CCK-8法檢測(cè)3組效應(yīng)細(xì)胞對(duì)NCI-H209細(xì)胞的殺傷活性。結(jié)果:體外誘導(dǎo)培養(yǎng)出的抗原致敏DC和未致敏DC經(jīng)流式檢測(cè),均高表達(dá)CD80、CD86、CD11c。CIK細(xì)胞隨著培養(yǎng)天數(shù)的延長(zhǎng)主要效應(yīng)細(xì)胞CD3~+CD8~+、CD3~+CD56~+表達(dá)持續(xù)升高,至第14天流式檢測(cè)結(jié)果示:A組和B組CD3~+CD8~+表型分別為71.8%和65.2%,C組CD3~+CD56~+達(dá)到31.1%。CCK-8法檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn),相同效靶比下A組對(duì)NCI-H209細(xì)胞株的殺傷活性明顯高于B、C組,且隨著效靶比增加,其殺傷效應(yīng)亦顯著增加。效靶比為5∶1時(shí)A組殺傷率為(68.82±2.55)%,B組殺傷率為(56.64±2.06)%,C組殺傷率為(55.98±2.63)%(P=0.007);效靶比為10∶1時(shí)A組殺傷率為(74.06±2.64)%,B組殺傷率為(60.11±2.74)%,C組殺傷率為(58.34±1.88)%(P=0.005);效靶比為20∶1時(shí)A組殺傷率為(79.17±3.51)%,B組殺傷率為(65.33±2.48)%,C組殺傷率為(60.47±2.85)%,(P=0.001)。結(jié)論:用NCI-H209細(xì)胞裂解物分離的混合蛋白致敏DC可以提高CIK細(xì)胞殺傷NCI-H209細(xì)胞效應(yīng),為小細(xì)胞肺癌的綜合治療提供新的策略。
[Abstract]:Aim: to observe the cytotoxicity of NCI-H209 cells co-cultured with (DC) and homologous cytokines to NCI-H209 in small cell lung cancer (SSCLC) induced by (CIK) cells in vitro, and to observe the antigen-sensitized dendritic cells (DC) in small cell lung cancer (SCLC) cells. To provide experimental evidence for specific cellular immunotherapy of small cell lung cancer. Methods: DC derived from peripheral blood mononuclear cells from healthy adults was sensitized by NCI-H209 cell line antigen and co-cultured with homologous CIK cells. The experiment was divided into three groups: group A, co-cultured with NCI-H209 antigen-sensitized DC and CIK (group A). Unsensitized DC and CIK co-cultured group (group B) and simple CIK group (group C). The immunophenotypes of DC and CIK were detected by flow cytometry and the cytotoxicity of three groups of effector cells to NCI-H209 cells was detected by CCK-8 assay. Results: both antigen-sensitized DC and unsensitized DC were detected by flow cytometry. The expression of CD3~ CD56~ in CD80,CD86,CD11c.CIK cells increased continuously with the prolongation of the days of culture. At the 14th day, CD3~ CD8~ phenotype of group A and group B were 71.8% and 65.2%, respectively. The CD3~ CD56~ of group A and B reached 31.1%.CCK-8 level. The cytotoxicity of group A to NCI-H209 cell line was significantly higher than that of group C at the same ratio, and with the increase of the ratio, the killing effect of group A also increased significantly. The killing rate was (68.82 鹵2.55)% in group A, (56.64 鹵2.06)% in group B and (55.98 鹵2.63)% in group C at 5:1. The killing rate was (74.06 鹵2.64)% in group A, (60.11 鹵2.74)% in group B and (58.34 鹵1.88)% in group C at 10:1. The killing rate was (79.17 鹵3.51)% in group A, (65.33 鹵2.48)% in group B and (60.47 鹵2.85)% in group C at 20:1. Conclusion: sensitized DC with NCI-H209 cell lysates can enhance the cytotoxicity of CIK cells to NCI-H209 cells and provide a new strategy for the comprehensive treatment of small cell lung cancer.
【作者單位】: 新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】:新疆醫(yī)科大學(xué)科研創(chuàng)新基金資助項(xiàng)目(No.XYDCX201485)
【分類號(hào)】:R734.2

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本文編號(hào):2295766

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