【摘要】：目的研究第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因(phosphatase and tensinhomolog deleted on chromosome 10,PTEN)及其磷酸酶區(qū)域突變后對(duì)胃癌細(xì)胞AKT磷酸化的影響。方法分別轉(zhuǎn)染野生型PTEN(wild-type PTEN,wt PTEN)質(zhì)粒、脂質(zhì)磷酸酶和蛋白磷酸酶活性均突變的PTEN-C124S質(zhì)粒、僅脂質(zhì)磷酸酶活性突變的PTEN-G129E質(zhì)粒至AGS細(xì)胞和BGC-823細(xì)胞。血清饑餓過(guò)夜后予各組細(xì)胞加入胰島素或者重組人表皮生長(zhǎng)因子(recombinant human epidermal growth factor,rh EGF)刺激,最后Western blot法檢測(cè)AKT磷酸化水平。結(jié)果胰島素和rh EGF均能刺激細(xì)胞引起AKT磷酸化,過(guò)表達(dá)PTEN基因能抑制胰島素或rh EGF刺激引起的AKT磷酸化(P0.05),轉(zhuǎn)入功能性突變體PTEN-C124S或PTEN-G129E對(duì)AKT磷酸化無(wú)抑制作用(P0.05)。結(jié)論 PTEN在胃癌細(xì)胞中能抑制胰島素或rh EGF刺激引起的AKT磷酸化,其磷酸酶結(jié)構(gòu)域N端第124或129位氨基酸發(fā)生點(diǎn)突變后無(wú)抑制作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of phosphatase and tension protein homologous gene (phosphatase and tensinhomolog deleted on chromosome 10 PTEN) and its phosphatase region mutation on AKT phosphorylation in gastric cancer cells. Methods the wild-type PTEN (wild-type PTEN,wt PTEN) plasmids, PTEN-C124S plasmids with both lipid phosphatase and protein phosphatase activity mutations were transfected into AGS cells and BGC-823 cells respectively. The serum was fed with insulin or recombinant human epidermal growth factor (recombinant human epidermal growth factor,rh EGF) after starvation for the night. Finally, the level of AKT phosphorylation was detected by Western blot assay. Results both insulin and rh EGF could stimulate AKT phosphorylation in cells, overexpression of PTEN gene could inhibit AKT phosphorylation induced by insulin or rh EGF (P0.05), but PTEN-C124S or PTEN-G129E could not inhibit AKT phosphorylation (P0.05). Conclusion PTEN can inhibit the phosphorylation of AKT induced by insulin or rh EGF stimulation in gastric cancer cells, but it has no inhibitory effect after point mutation of 124th or 129-amino acid in the N-terminal of phosphatase domain.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)附屬萍鄉(xiāng)醫(yī)院消化內(nèi)科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81360080) 江西省科技支撐計(jì)劃基金資助項(xiàng)目(編號(hào):20141BBG70071)
【分類號(hào)】：R735.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2259091