發(fā)布時間：2018-10-09 11:02

【摘要】：目的研究第10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因(phosphatase and tensinhomolog deleted on chromosome 10,PTEN)及其磷酸酶區(qū)域突變后對胃癌細胞AKT磷酸化的影響。方法分別轉(zhuǎn)染野生型PTEN(wild-type PTEN,wt PTEN)質(zhì)粒、脂質(zhì)磷酸酶和蛋白磷酸酶活性均突變的PTEN-C124S質(zhì)粒、僅脂質(zhì)磷酸酶活性突變的PTEN-G129E質(zhì)粒至AGS細胞和BGC-823細胞。血清饑餓過夜后予各組細胞加入胰島素或者重組人表皮生長因子(recombinant human epidermal growth factor,rh EGF)刺激,最后Western blot法檢測AKT磷酸化水平。結(jié)果胰島素和rh EGF均能刺激細胞引起AKT磷酸化,過表達PTEN基因能抑制胰島素或rh EGF刺激引起的AKT磷酸化(P0.05),轉(zhuǎn)入功能性突變體PTEN-C124S或PTEN-G129E對AKT磷酸化無抑制作用(P0.05)。結(jié)論 PTEN在胃癌細胞中能抑制胰島素或rh EGF刺激引起的AKT磷酸化,其磷酸酶結(jié)構(gòu)域N端第124或129位氨基酸發(fā)生點突變后無抑制作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of phosphatase and tension protein homologous gene (phosphatase and tensinhomolog deleted on chromosome 10 PTEN) and its phosphatase region mutation on AKT phosphorylation in gastric cancer cells. Methods the wild-type PTEN (wild-type PTEN,wt PTEN) plasmids, PTEN-C124S plasmids with both lipid phosphatase and protein phosphatase activity mutations were transfected into AGS cells and BGC-823 cells respectively. The serum was fed with insulin or recombinant human epidermal growth factor (recombinant human epidermal growth factor,rh EGF) after starvation for the night. Finally, the level of AKT phosphorylation was detected by Western blot assay. Results both insulin and rh EGF could stimulate AKT phosphorylation in cells, overexpression of PTEN gene could inhibit AKT phosphorylation induced by insulin or rh EGF (P0.05), but PTEN-C124S or PTEN-G129E could not inhibit AKT phosphorylation (P0.05). Conclusion PTEN can inhibit the phosphorylation of AKT induced by insulin or rh EGF stimulation in gastric cancer cells, but it has no inhibitory effect after point mutation of 124th or 129-amino acid in the N-terminal of phosphatase domain.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)附屬萍鄉(xiāng)醫(yī)院消化內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(編號:81360080) 江西省科技支撐計劃基金資助項目(編號:20141BBG70071)
【分類號】：R735.2

【參考文獻】

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本文編號：2259091