發(fā)布時(shí)間：2018-08-21 20:35

【摘要】：背景與目的:非甾體抗炎藥阿司匹林臨床防治結(jié)腸癌確切有效,近年來有研究認(rèn)為其防治結(jié)腸癌最終通過對(duì)結(jié)腸癌干細(xì)胞調(diào)控而實(shí)現(xiàn)。當(dāng)結(jié)腸癌干細(xì)胞分化成熟時(shí),結(jié)腸癌將不再進(jìn)展、甚至消退。本研究旨在探討非甾體抗炎藥阿司匹林對(duì)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞株分化的影響。方法:采用活細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒CCK-8檢測(cè)不同濃度阿司匹林抑制HT-29細(xì)胞增殖的作用,得出IC50;采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)檢測(cè)阿司匹林IC50干預(yù)24、48和72 h,腸分化標(biāo)志物黏蛋白2(mucin 2,MUC2)、三葉因子3(trefoil factor 3,TFF3)、蔗糖酶-異麥芽糖酶(sucroseisomaltase)和溶菌酶(lysozyme)的m RNA表達(dá)情況;采用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)MUC2蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)情況;采用蛋白[質(zhì)]印跡法(Western blot)檢測(cè)sucrase-isomaltase及l(fā)ysozyme的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:阿司匹林能明顯抑制HT-29細(xì)胞的增殖,且呈時(shí)間和劑量依賴性;RTFQ-PCR和Western blot結(jié)果顯示,阿司匹林干預(yù)HT-29細(xì)胞48、72 h,與對(duì)照組比較,腸杯狀細(xì)胞標(biāo)志物MUC2、TFF3的m RNA表達(dá)均上調(diào)(P0.05),腸吸收細(xì)胞標(biāo)志物sucrase-isomaltase和潘氏細(xì)胞標(biāo)志物lysozyme的m RNA及蛋白表達(dá)均下調(diào)(P0.05);免疫細(xì)胞化學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,阿司匹林干預(yù)48 h,MUC2蛋白表達(dá)較對(duì)照組上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:非甾體抗炎藥阿司匹林能影響人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞腸分化標(biāo)志物的表達(dá),且可能導(dǎo)致其向杯狀細(xì)胞表型分化。
[Abstract]:Background & AIM: nonsteroidal anti-inflammatory drug aspirin is effective in the prevention and treatment of colon cancer. In recent years, it has been considered that the prevention and treatment of colon cancer can be achieved through the regulation of colon cancer stem cells. When colon cancer stem cells mature, colon cancer will no longer progress, or even fade. The aim of this study was to investigate the effect of aspirin, a non-steroidal anti-inflammatory drug, on the differentiation of human colon cancer cell line HT-29. Methods: the effects of aspirin at different concentrations on the proliferation of HT-29 cells were detected by living cell count kit (CCK-8). The expression of m RNA in intestinal differentiation marker mucin 2 (mucin 2 MUC2), trefoil factor 3 (trefoil factor 3tff3, sucrose enzyme isomaltase (sucroseisomaltase) and lysozyme (lysozyme) were detected by real time real-time fluorescent quantitative polymerase chain reactionation polymerase chain reaction (RTFQ-PCR). The expression of MUC2 protein was detected by immunocytochemistry and the protein expression of sucrase-isomaltase and lysozyme was detected by Western blot (Western blot). Results: aspirin could significantly inhibit the proliferation of HT-29 cells. The results of RT FQ-PCR and Western blot in a time and dose-dependent manner showed that aspirin inhibited the proliferation of HT-29 cells for 4872 hours, compared with the control group. The expression of m RNA in goblet cell marker MUC2TFF3 was up-regulated (P0.05), and the expression of m RNA and protein in intestinal absorption cell marker sucrase-isomaltase and lysozyme were down-regulated (P0.05). The expression of MUC2 protein was up-regulated at 48 h after aspirin intervention compared with the control group (P 0.05). Conclusion: aspirin can affect the expression of intestinal differentiation markers in human colon cancer HT-29 cells and may lead to the phenotype differentiation of goblet cells.
【作者單位】： 遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院消化內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81560467) 貴州省科學(xué)技術(shù)基金項(xiàng)目(黔科合J字LKZ[2013]18號(hào)) 貴州省高層次人才科研條件特助經(jīng)費(fèi)資助項(xiàng)目(TZJF-2011-32號(hào)) 遵義醫(yī)學(xué)院博士科研啟動(dòng)基金(F-572)
【分類號(hào)】：R735.35

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本文編號(hào)：2196277