發(fā)布時(shí)間：2018-08-13 09:01

【摘要】：目的探討外分泌的GRP78和細(xì)胞膜表面EGFR相互作用的情況,確定外分泌GRP78和EGFR在肝癌細(xì)胞產(chǎn)生索拉非尼耐藥過程中的作用及其機(jī)制,根據(jù)外分泌GRP78含量的不同以及其產(chǎn)生的耐藥機(jī)制的原理,將其作為臨床診斷的標(biāo)志和治療的靶點(diǎn)。方法1.用蛋白質(zhì)印跡分析各肝癌細(xì)胞外分泌GRP78的含量和細(xì)胞表面EGFR的表達(dá),并選擇合適的細(xì)胞株。2.收集肝癌患者的血清和正常人的血清,利用ELISA分析肝癌患者血清中GRP78含量和正常人血清中GRP78含量的差異。3.在細(xì)胞水平檢測(cè)rh GRP78是否影響索拉非尼對(duì)肝癌細(xì)胞的敏感性及其作用機(jī)制。利用MTT,Western blot,GST pull down和集落形成實(shí)驗(yàn)分析rh GRP78存在情況下肝癌細(xì)胞對(duì)索拉非尼敏感性的影響和rh GRP78與EGFR相互作用產(chǎn)生耐藥性的信號(hào)傳導(dǎo)通路。4.在動(dòng)物水平建立腫瘤模型,并將動(dòng)物分為三組,rh GRP78組,索拉非尼組和rh GRP78+索拉非尼組,采用灌胃方式進(jìn)行治療,一段時(shí)間后取出小鼠腫瘤組織進(jìn)行瘤體稱重和免疫組化檢測(cè),比較三組結(jié)果的差異。結(jié)果1.GRP78可以由HCC細(xì)胞分泌2.外分泌的GRP78促進(jìn)細(xì)胞增殖并抑制索拉非尼誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡3.分泌的GRP78與EGFR相互作用并誘導(dǎo)其活化4.EGFR介導(dǎo)HCC細(xì)胞對(duì)分泌的GRP78的反應(yīng)結(jié)論由腫瘤細(xì)胞分泌的GRP78可以以自分泌或旁分泌的方式激活EGFR-Src-STAT3信號(hào)通路導(dǎo)致肝癌細(xì)胞對(duì)索拉非尼的耐藥。并且EGFR決定HCC細(xì)胞對(duì)外分泌GRP78的反應(yīng)性
[Abstract]:Objective to investigate the interaction between exocrine GRP78 and EGFR on cell membrane, and to determine the role and mechanism of exocrine GRP78 and EGFR in the production of solafenib resistance in hepatoma cells. According to the different levels of exocrine GRP78 and the mechanism of drug resistance, it is regarded as a marker of clinical diagnosis and a target of treatment. Method 1. The content of exocrine GRP78 and the expression of EGFR on the surface of hepatoma cells were analyzed by Western blot, and the appropriate cell line. 2. The serum levels of GRP78 in HCC patients and those in normal controls were analyzed by ELISA. 3. 3. To determine whether rh GRP78 affects the sensitivity of Solafenib to hepatoma cells and its mechanism at cell level. The effects of rh GRP78 on the sensitivity of hepatoma cells to Solafenil and the signal transduction pathway of drug resistance between rh GRP78 and EGFR were analyzed by using MTTX Western blottle pull down and colony formation assay. The tumor model was established at the animal level, and the animals were divided into three groups: GRP78 group, Solafenil group and rh GRP78 sorafenil group. The tumor tissues of mice were taken out for weighing and immunohistochemical examination after a period of time. The differences among the three groups were compared. Results 1.GRP78 could be secreted by HCC cells. Exocrine GRP78 promotes cell proliferation and inhibits the apoptosis induced by Solafenib. The secreted GRP78 interacts with EGFR and induces its activation 4.EGFR mediates the response of HCC cells to secreted GRP78. Conclusion GRP78 secreted by tumor cells can activate the EGFR-Src-STAT3 signaling pathway in an autocrine or paracrine manner leading to the drug resistance of HCC cells to Solafenib. And EGFR determines the response of HCC cells to exocrine GRP78
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R735.7

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 呂允鳳;封宇飛;胡欣;畢開順;;索拉非尼的藥理及臨床研究[J];中國(guó)新藥雜志;2007年01期

2 丁麗;程剛;;多靶點(diǎn)抗腫瘤新藥索拉非尼的藥理作用及臨床研究進(jìn)展[J];藥物不良反應(yīng)雜志;2007年03期

3 張小麗;王鴻;;索拉非尼及其抗腫瘤作用[J];安徽醫(yī)藥;2008年03期

4 崔瑤;羅榮城;李愛民;崔斐;;索拉非尼聯(lián)合肝素抑制血管生成的研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2008年05期

5 逯華;陳日新;;多激酶抑制藥索拉非尼的研究進(jìn)展[J];右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年04期

6 孫敏;魏紅濤;蔡進(jìn);吉民;;索拉非尼的合成[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;2009年05期

7 郭玉峰;;索拉非尼的最近研究概況[J];中國(guó)醫(yī)療前沿;2009年05期

8 陳金麟;李鐵;張沂平;;索拉非尼臨床研究進(jìn)展[J];腫瘤學(xué)雜志;2009年08期

9 葉麗芬;張春紅;;口服甲苯磺酸索拉非尼患者的觀察及護(hù)理[J];臨床合理用藥雜志;2009年22期

10 劉健穎;唐偉方;陸濤;;索拉非尼研究進(jìn)展[J];海峽藥學(xué);2010年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 鄧覲云;陳悅;;索拉非尼最新研究進(jìn)展[A];第十二屆全國(guó)肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

2 劉韜;林子超;陳倩超;魏雪;黃偉強(qiáng);黃紅兵;;索拉非尼藥物不良反應(yīng)臨床特征分析與防治[A];2010年廣東省藥師周大會(huì)論文集[C];2011年

3 王哲;張陽;吳濤;;索拉非尼聯(lián)合伊立替康對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2抑制作用的時(shí)序性依賴機(jī)制探索與研究[A];第三屆中國(guó)腫瘤內(nèi)科大會(huì)教育集暨論文集[C];2009年

4 李珍;;索拉非尼治療肝癌不良反應(yīng)的觀察及護(hù)理[A];中華護(hù)理學(xué)會(huì)全國(guó)腫瘤護(hù)理新進(jìn)展研討會(huì)論文匯編[C];2012年

5 莊莉;俞軍;吳健;張珉;沈恬;蔣國(guó)平;郭華;鄭樹森;;肝癌肝移植術(shù)后預(yù)防性服用索拉非尼有效改善受者生存[A];2012中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2012年

6 李珍;劉紅麗;張寧;;索拉非尼治療肝癌不良反應(yīng)的觀察及護(hù)理[A];2012年“河南省腫瘤�？谱o(hù)士職業(yè)安全防護(hù)及新技術(shù)交流”學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

7 鄭家平;邵國(guó)良;羅君;陳玉堂;姚征;曾暉;郝偉遠(yuǎn);;索拉非尼治療中晚期肝細(xì)胞癌安全性和生存因素分析[A];2013年浙江省放射學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2013年

8 劉淼;;索拉非尼常見不良反應(yīng)及對(duì)策[A];中國(guó)成人醫(yī)藥教育論壇（2009）[C];2009年

9 趙振宇;戈偉;;索拉非尼靶向治療非小細(xì)胞肺癌研究進(jìn)展[A];第二屆湖北省腫瘤靶向治療學(xué)術(shù)會(huì)議論文選[C];2007年

10 成炳祥;方煊;朱承良;婁s，

本文編號(hào)：2180508