【摘要】：目的:探討HLA限制性EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)表位肽EBV-潛伏膜蛋白2A(EBV-latent membrane protein2A,EBV-LMP2A)誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)對(duì)EBV陽性胃癌細(xì)胞的體外殺傷作用。方法:選用南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤中心HLA-A2陽性胃癌患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)、人胃腺癌細(xì)胞株(AGS)和人EBV陽性胃腺癌細(xì)胞株(AGSEBV),通過改良的體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)用HLA-A2限制性的EBV-LMP2A抗原肽從人PBMC中誘導(dǎo)擴(kuò)增出特異性CTL,采用四聚體技術(shù)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)抗原肽誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異性CTL的含量,通過FITC-PI標(biāo)記流式術(shù)檢測(cè)EBV-CTL對(duì)EBV陽性和EBV陰性的胃癌細(xì)胞的體外殺傷作用。結(jié)果:經(jīng)改良的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和抗原肽雙重刺激后EBV-LMP2A抗原肽可以誘導(dǎo)產(chǎn)生出高比例的抗原特異性CTL[EBV-LMP2A-356特異性T細(xì)胞占CD8+T細(xì)胞的(47.1±5.2)%];EBV-CTL對(duì)EBV陽性胃癌細(xì)胞的體外殺傷作用較EBV陰性的胃癌細(xì)胞明顯增強(qiáng)[(45.1±9.3)%vs(19.4±2.5)%,P0.05]。結(jié)論:通過改良的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)使用EBV-LMP2A抗原肽能誘導(dǎo)產(chǎn)生高比例的EBV特異性CTL,其對(duì)EBV陽性胃癌細(xì)胞有較強(qiáng)的特異性殺傷作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the cytotoxic T lymphocyte (CTL) (CTL) induced by HLA restricted EB virus (Epstein-Barr virus) epitope peptide EBV- latent membrane protein 2A (EBV-2) on EBV positive gastric cancer cells in vitro. Methods: peripheral blood mononuclear cells (PBMC),) human gastric adenocarcinoma cell line (AGS) and human EBV positive gastric adenocarcinoma cell line (AGSEBV), (AGSEBV),) were selected from HLA-A2 positive gastric cancer patients in tumor center of affiliated Cancer Hospital affiliated to Medical College of Nanjing University through improved cell culture in vitro. Specific CTLs were amplified from human PBMC by HLA-A2 restricted EBV-LMP2A antigenic peptide, and the content of specific CTL induced by antigenic peptide was detected by tetramer technique and flow cytometry. The killing effect of EBV-CTL on EBV positive and EBV negative gastric cancer cells in vitro was detected by FITC-PI labeling flow cytometry. Results: the modified cell culture technique and the double stimulation of antigenic peptides could induce the production of high proportion of antigen-specific CTL [EBV-LMP2A-356 specific T cells accounted for (47.1 鹵5.2)% of CD8 T cells] EBV-CTL could kill EBV positive gastric cancer cells in vitro. EBV negative gastric cancer cells were significantly enhanced [(45.1 鹵9.3) vs (19.4 鹵2.5) P 0.05]. Conclusion: the modified cell culture technique can induce the production of high proportion of EBV specific CTLs by using EBV-LMP2A antigenic peptide, which has a strong specific killing effect on EBV positive gastric cancer cells.
【作者單位】： 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院腫瘤中心暨南京大學(xué)臨床腫瘤研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81602077,No.81572601)~~
【分類號(hào)】：R735.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 梁衛(wèi)江,肖冰,賴卓勝,張萬岱;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-α對(duì)胃癌細(xì)胞周期的促進(jìn)作用[J];中華消化雜志;2000年05期

2 于成功,李敏,莫?jiǎng)χ?蕭樹東;胃癌細(xì)胞垂體腺苷環(huán)化酶激活肽相關(guān)受體分析[J];胃腸病學(xué);2000年02期

3 薛英威,耿敬姝,劉曉民,劉立人,高小敏,陳國(guó)林,張豈凡,趙家宏;胃癌細(xì)胞的流式分析及臨床意義[J];腫瘤防治研究;2000年03期

4 陳堅(jiān),林庚金,錢立平,程建,施冬云,張亞東,劉珊林;內(nèi)源性活性氧水平及錳型超氧化物歧化酶的表達(dá)與胃癌細(xì)胞分化、增殖相關(guān)[J];生物物理學(xué)報(bào);2003年02期

5 李瑩,藥立波,韓炯,王立峰,韓月恒,劉新平,林樹新,俞強(qiáng);胃癌細(xì)胞抗脫落凋亡的分子機(jī)制[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2004年02期

6 羅和生,王維,包鵬輝,張翼;核因子-κB活性增強(qiáng)參與胃癌細(xì)胞長(zhǎng)春新堿耐藥[J];中華消化雜志;2004年08期

7 劉冀紅,曹偉新,紀(jì)玉寶,張軼,劉炳亞,朱正綱,燕敏,林言箴;右旋甲硫氨酸對(duì)胃癌細(xì)胞作用初探[J];腸外與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng);2005年01期

8 齊元玲;于皆平;劉啟勝;鄧全軍;曹俊;于紅剛;;抑癌基因PTEN在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)及意義[J];廣東醫(yī)學(xué);2006年03期

9 何必立;呂賓;徐毅;苗青;范一宏;;溫郁金對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制作用及其對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響[J];中醫(yī)藥學(xué)刊;2006年09期

10 郭強(qiáng);李榮;李慶芳;夏紹友;杜曉輝;王立生;;高表達(dá)鞘氨醇激酶對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年12期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 韓霜;雷婷;韓者藝;劉杰;郭雪艷;丁睿;吳開春;丁杰;樊代明;;分化抑制因子1對(duì)胃癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

2 陳韶華;吳靈嬌;吳鴻儒;吳雅春;厲有名;;低濃度酒精對(duì)胃癌細(xì)胞活性及周期抑制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第12次全國(guó)內(nèi)科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

3 陳韶華;吳靈嬌;吳鴻儒;吳雅春;厲有名;;低濃度酒精對(duì)胃癌細(xì)胞活性及周期抑制[A];第二屆浙江省消化病學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2009年

4 李娜;郭瑞芳;李文梅;邵建敏;汪浩;趙康;李書婷;王敬強(qiáng);王融;徐寧志;劉斯奇;呂有勇;;大蒜素處理在胃癌細(xì)胞中引發(fā)的蛋白質(zhì)表達(dá)響應(yīng)[A];中國(guó)蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要論文集[C];2004年

5 ;多西紫杉醇對(duì)胃癌細(xì)胞作用及其機(jī)制的研究[A];第四屆中國(guó)腫瘤大會(huì)中國(guó)藥理學(xué)會(huì)腫瘤藥理專業(yè)委員會(huì)分會(huì)場(chǎng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2006年

6 樓儷泓;;15-羥基前列腺素脫氫酶對(duì)胃癌細(xì)胞周期影響的試驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

7 朗瑋;;中藥方劑1號(hào)對(duì)胃癌細(xì)胞體外生長(zhǎng)及細(xì)胞粘附分子的影響[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)消化專業(yè)第八次學(xué)術(shù)年會(huì)暨省中西醫(yī)結(jié)合消化系疾病新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2007年

8 鞏龍靜;馬君;周涵婧;鄭榮兒;;胃癌細(xì)胞的表面增強(qiáng)拉曼光譜研究[A];中國(guó)光學(xué)學(xué)會(huì)2011年學(xué)術(shù)大會(huì)摘要集[C];2011年

9 謝少茹;沈洪;趙崧;張國(guó)新;郝波;劉增巍;施瑞華;;黃芪多糖對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)制[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)脾胃病分會(huì)第十九次全國(guó)脾胃病學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2007年

10 劉文超;任軍;張學(xué)庸;劉智廣;張曉楠;;防御素對(duì)胃癌細(xì)胞殺傷的體外實(shí)驗(yàn)研究[A];2000全國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2000年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前8條

1 記者 陸葉清;發(fā)現(xiàn)抑制胃癌細(xì)胞的重要基因[N];上�？萍紙�(bào);2010年

2 衣曉峰　喬蕤琳 記者 趙宇清;抑制胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)研究有新發(fā)現(xiàn)[N];黑龍江日?qǐng)?bào);2010年

3 記者 衣曉峰　通訊員 喬蕤琳;維生素E衍生物能抑制胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)[N];健康報(bào);2010年

4 王振嶺;我國(guó)抑制胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)研究有重要發(fā)現(xiàn)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

5 王振嶺;抗癌藥抑制胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)研究獲重要發(fā)現(xiàn)[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2002年

6 王振嶺;7種抗癌藥體外抑制胃癌細(xì)胞的研究有新發(fā)現(xiàn)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

7 張中橋;胃癌細(xì)胞MDR機(jī)制研究取得新進(jìn)展[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

8 吳一福 蘇玉軍;白藜蘆醇可誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞脫落凋亡[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李雙玲;IGF-1通過抑制Fox01核保留促進(jìn)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)機(jī)制的研究[D];山東大學(xué);2015年

2 胡偉國(guó);腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞中Thy-1激活誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的研究[D];上海交通大學(xué);2014年

3 周韻斕;應(yīng)激條件下胃癌細(xì)胞高表達(dá)線粒體活性氧和前梯度蛋白2促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的研究[D];上海交通大學(xué);2014年

4 徐同鵬;SP1誘導(dǎo)的長(zhǎng)非編碼RNA TINCR通過調(diào)控KLF2 mRNA穩(wěn)定性影響胃癌細(xì)胞的增殖與凋亡[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

5 王暢;miR-34a通過miR-34a-c-myc/Bmi-1負(fù)反饋通路負(fù)調(diào)控胃癌干細(xì)胞樣特性[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

6 羅貫虹;MGr1-Ag/37LRP參與PrP~C介導(dǎo)的胃癌細(xì)胞多藥耐藥[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

7 默董亮;人類解旋酶RecQL4調(diào)控胃癌細(xì)胞耐藥性分子機(jī)制研究[D];中國(guó)科學(xué)院北京基因組研究所;2016年

8 劉皎婧;PI3K/Akt/GSK3β/p190ARhoGAP/RhoA信號(hào)通路在Wnt5a誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞遷移中作用的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2014年

9 Muhammad Kamran（卡姆拉）;[D];大連醫(yī)科大學(xué);2015年

10 王瑛;PKGⅡ?qū)PA誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞徖移及RhoA和Rac1激活的影響[D];江蘇大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 林光錟;CyclinA/CDK2介導(dǎo)BAG3 Ser291位點(diǎn)的磷酸化并影響胃癌細(xì)胞的增殖和凋亡[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 蔡洙哲;p12-LOX對(duì)胃癌細(xì)胞MKN-28的增殖和遷移的影響[D];延邊大學(xué);2015年

3 李龍;Her-2高表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲、遷移的影響[D];長(zhǎng)江大學(xué);2015年

4 趙婷婷;GPIbα對(duì)胃癌細(xì)胞粘附、遷移和侵襲能力的影響及其機(jī)制的初步探討[D];蘭州大學(xué);2015年

5 謝瑞霞;盤狀結(jié)構(gòu)域受體1調(diào)控上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響胃癌侵襲轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的研究[D];蘭州大學(xué);2015年

6 王東倉;NM23-H2通過抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路抑制胃癌細(xì)胞的侵襲遷移[D];蘭州大學(xué);2015年

7 朱瑞雪;NDRG2基因?qū)ξ赴┘?xì)胞惡性表型的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

8 董凱楠;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲遷移能力的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

9 單爭(zhēng)爭(zhēng);二甲雙胍在IL-6誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞EMT中的作用[D];鄭州大學(xué);2015年

10 田莉;NM23-H2通過誘導(dǎo)自噬抑制胃癌細(xì)胞EMT的發(fā)生[D];蘭州大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：2145154