【摘要】：目的:探討HLA限制性EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)表位肽EBV-潛伏膜蛋白2A(EBV-latent membrane protein2A,EBV-LMP2A)誘導(dǎo)的細胞毒性T淋巴細胞(CTL)對EBV陽性胃癌細胞的體外殺傷作用。方法:選用南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤中心HLA-A2陽性胃癌患者外周血單個核細胞(PBMC)、人胃腺癌細胞株(AGS)和人EBV陽性胃腺癌細胞株(AGSEBV),通過改良的體外細胞培養(yǎng)技術(shù)用HLA-A2限制性的EBV-LMP2A抗原肽從人PBMC中誘導(dǎo)擴增出特異性CTL,采用四聚體技術(shù)和流式細胞術(shù)檢測抗原肽誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異性CTL的含量,通過FITC-PI標記流式術(shù)檢測EBV-CTL對EBV陽性和EBV陰性的胃癌細胞的體外殺傷作用。結(jié)果:經(jīng)改良的細胞培養(yǎng)技術(shù)和抗原肽雙重刺激后EBV-LMP2A抗原肽可以誘導(dǎo)產(chǎn)生出高比例的抗原特異性CTL[EBV-LMP2A-356特異性T細胞占CD8+T細胞的(47.1±5.2)%];EBV-CTL對EBV陽性胃癌細胞的體外殺傷作用較EBV陰性的胃癌細胞明顯增強[(45.1±9.3)%vs(19.4±2.5)%,P0.05]。結(jié)論:通過改良的細胞培養(yǎng)技術(shù)使用EBV-LMP2A抗原肽能誘導(dǎo)產(chǎn)生高比例的EBV特異性CTL,其對EBV陽性胃癌細胞有較強的特異性殺傷作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the cytotoxic T lymphocyte (CTL) (CTL) induced by HLA restricted EB virus (Epstein-Barr virus) epitope peptide EBV- latent membrane protein 2A (EBV-2) on EBV positive gastric cancer cells in vitro. Methods: peripheral blood mononuclear cells (PBMC),) human gastric adenocarcinoma cell line (AGS) and human EBV positive gastric adenocarcinoma cell line (AGSEBV), (AGSEBV),) were selected from HLA-A2 positive gastric cancer patients in tumor center of affiliated Cancer Hospital affiliated to Medical College of Nanjing University through improved cell culture in vitro. Specific CTLs were amplified from human PBMC by HLA-A2 restricted EBV-LMP2A antigenic peptide, and the content of specific CTL induced by antigenic peptide was detected by tetramer technique and flow cytometry. The killing effect of EBV-CTL on EBV positive and EBV negative gastric cancer cells in vitro was detected by FITC-PI labeling flow cytometry. Results: the modified cell culture technique and the double stimulation of antigenic peptides could induce the production of high proportion of antigen-specific CTL [EBV-LMP2A-356 specific T cells accounted for (47.1 鹵5.2)% of CD8 T cells] EBV-CTL could kill EBV positive gastric cancer cells in vitro. EBV negative gastric cancer cells were significantly enhanced [(45.1 鹵9.3) vs (19.4 鹵2.5) P 0.05]. Conclusion: the modified cell culture technique can induce the production of high proportion of EBV specific CTLs by using EBV-LMP2A antigenic peptide, which has a strong specific killing effect on EBV positive gastric cancer cells.
【作者單位】： 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院腫瘤中心暨南京大學(xué)臨床腫瘤研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81602077,No.81572601)~~
【分類號】：R735.2

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 梁衛(wèi)江,肖冰,賴卓勝,張萬岱;轉(zhuǎn)化生長因子-α對胃癌細胞周期的促進作用[J];中華消化雜志;2000年05期

2 于成功,李敏,莫劍忠,蕭樹東;胃癌細胞垂體腺苷環(huán)化酶激活肽相關(guān)受體分析[J];胃腸病學(xué);2000年02期

3 薛英威,耿敬姝,劉曉民,劉立人,高小敏,陳國林,張豈凡,趙家宏;胃癌細胞的流式分析及臨床意義[J];腫瘤防治研究;2000年03期

4 陳堅,林庚金,錢立平,程建,施冬云,張亞東,劉珊林;內(nèi)源性活性氧水平及錳型超氧化物歧化酶的表達與胃癌細胞分化、增殖相關(guān)[J];生物物理學(xué)報;2003年02期

5 李瑩,藥立波,韓炯,王立峰,韓月恒,劉新平,林樹新,俞強;胃癌細胞抗脫落凋亡的分子機制[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2004年02期

6 羅和生,王維,包鵬輝,張翼;核因子-κB活性增強參與胃癌細胞長春新堿耐藥[J];中華消化雜志;2004年08期

7 劉冀紅,曹偉新,紀玉寶,張軼,劉炳亞,朱正綱,燕敏,林言箴;右旋甲硫氨酸對胃癌細胞作用初探[J];腸外與腸內(nèi)營養(yǎng);2005年01期

8 齊元玲;于皆平;劉啟勝;鄧全軍;曹俊;于紅剛;;抑癌基因PTEN在胃癌細胞中的表達及意義[J];廣東醫(yī)學(xué);2006年03期

9 何必立;呂賓;徐毅;苗青;范一宏;;溫郁金對胃癌細胞的抑制作用及其對血管內(nèi)皮生長因子表達的影響[J];中醫(yī)藥學(xué)刊;2006年09期

10 郭強;李榮;李慶芳;夏紹友;杜曉輝;王立生;;高表達鞘氨醇激酶對胃癌細胞生物學(xué)特性的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年12期

相關(guān)會議論文 前10條

1 韓霜;雷婷;韓者藝;劉杰;郭雪艷;丁睿;吳開春;丁杰;樊代明;;分化抑制因子1對胃癌細胞惡性生物學(xué)行為的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

2 陳韶華;吳靈嬌;吳鴻儒;吳雅春;厲有名;;低濃度酒精對胃癌細胞活性及周期抑制[A];中華醫(yī)學(xué)會第12次全國內(nèi)科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

3 陳韶華;吳靈嬌;吳鴻儒;吳雅春;厲有名;;低濃度酒精對胃癌細胞活性及周期抑制[A];第二屆浙江省消化病學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2009年

4 李娜;郭瑞芳;李文梅;邵建敏;汪浩;趙康;李書婷;王敬強;王融;徐寧志;劉斯奇;呂有勇;;大蒜素處理在胃癌細胞中引發(fā)的蛋白質(zhì)表達響應(yīng)[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會論文摘要論文集[C];2004年

5 ;多西紫杉醇對胃癌細胞作用及其機制的研究[A];第四屆中國腫瘤大會中國藥理學(xué)會腫瘤藥理專業(yè)委員會分會場學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年

6 樓儷泓;;15-羥基前列腺素脫氫酶對胃癌細胞周期影響的試驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

7 朗瑋;;中藥方劑1號對胃癌細胞體外生長及細胞粘附分子的影響[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會消化專業(yè)第八次學(xué)術(shù)年會暨省中西醫(yī)結(jié)合消化系疾病新進展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2007年

8 鞏龍靜;馬君;周涵婧;鄭榮兒;;胃癌細胞的表面增強拉曼光譜研究[A];中國光學(xué)學(xué)會2011年學(xué)術(shù)大會摘要集[C];2011年

9 謝少茹;沈洪;趙崧;張國新;郝波;劉增巍;施瑞華;;黃芪多糖對胃癌細胞的抑制作用及其機制[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會脾胃病分會第十九次全國脾胃病學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2007年

10 劉文超;任軍;張學(xué)庸;劉智廣;張曉楠;;防御素對胃癌細胞殺傷的體外實驗研究[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會論文集[C];2000年

相關(guān)重要報紙文章 前8條

1 記者 陸葉清;發(fā)現(xiàn)抑制胃癌細胞的重要基因[N];上�？萍紙�;2010年

2 衣曉峰　喬蕤琳 記者 趙宇清;抑制胃癌細胞生長研究有新發(fā)現(xiàn)[N];黑龍江日報;2010年

3 記者 衣曉峰　通訊員 喬蕤琳;維生素E衍生物能抑制胃癌細胞生長[N];健康報;2010年

4 王振嶺;我國抑制胃癌細胞生長研究有重要發(fā)現(xiàn)[N];中國醫(yī)藥報;2002年

5 王振嶺;抗癌藥抑制胃癌細胞生長研究獲重要發(fā)現(xiàn)[N];中國中醫(yī)藥報;2002年

6 王振嶺;7種抗癌藥體外抑制胃癌細胞的研究有新發(fā)現(xiàn)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

7 張中橋;胃癌細胞MDR機制研究取得新進展[N];中國醫(yī)藥報;2007年

8 吳一福 蘇玉軍;白藜蘆醇可誘導(dǎo)胃癌細胞脫落凋亡[N];中國醫(yī)藥報;2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李雙玲;IGF-1通過抑制Fox01核保留促進胃癌細胞生長機制的研究[D];山東大學(xué);2015年

2 胡偉國;腫瘤相關(guān)成纖維細胞中Thy-1激活誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進胃癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移的研究[D];上海交通大學(xué);2014年

3 周韻斕;應(yīng)激條件下胃癌細胞高表達線粒體活性氧和前梯度蛋白2促進腫瘤進展的研究[D];上海交通大學(xué);2014年

4 徐同鵬;SP1誘導(dǎo)的長非編碼RNA TINCR通過調(diào)控KLF2 mRNA穩(wěn)定性影響胃癌細胞的增殖與凋亡[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

5 王暢;miR-34a通過miR-34a-c-myc/Bmi-1負反饋通路負調(diào)控胃癌干細胞樣特性[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

6 羅貫虹;MGr1-Ag/37LRP參與PrP~C介導(dǎo)的胃癌細胞多藥耐藥[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

7 默董亮;人類解旋酶RecQL4調(diào)控胃癌細胞耐藥性分子機制研究[D];中國科學(xué)院北京基因組研究所;2016年

8 劉皎婧;PI3K/Akt/GSK3β/p190ARhoGAP/RhoA信號通路在Wnt5a誘導(dǎo)胃癌細胞遷移中作用的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2014年

9 Muhammad Kamran（卡姆拉）;[D];大連醫(yī)科大學(xué);2015年

10 王瑛;PKGⅡ?qū)PA誘導(dǎo)的胃癌細胞徖移及RhoA和Rac1激活的影響[D];江蘇大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 林光錟;CyclinA/CDK2介導(dǎo)BAG3 Ser291位點的磷酸化并影響胃癌細胞的增殖和凋亡[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 蔡洙哲;p12-LOX對胃癌細胞MKN-28的增殖和遷移的影響[D];延邊大學(xué);2015年

3 李龍;Her-2高表達對胃癌細胞侵襲、遷移的影響[D];長江大學(xué);2015年

4 趙婷婷;GPIbα對胃癌細胞粘附、遷移和侵襲能力的影響及其機制的初步探討[D];蘭州大學(xué);2015年

5 謝瑞霞;盤狀結(jié)構(gòu)域受體1調(diào)控上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響胃癌侵襲轉(zhuǎn)移分子機制的研究[D];蘭州大學(xué);2015年

6 王東倉;NM23-H2通過抑制Wnt/β-catenin信號通路抑制胃癌細胞的侵襲遷移[D];蘭州大學(xué);2015年

7 朱瑞雪;NDRG2基因?qū)ξ赴┘毎麗盒员硇偷挠绊慬D];鄭州大學(xué);2015年

8 董凱楠;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對胃癌細胞侵襲遷移能力的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

9 單爭爭;二甲雙胍在IL-6誘導(dǎo)胃癌細胞EMT中的作用[D];鄭州大學(xué);2015年

10 田莉;NM23-H2通過誘導(dǎo)自噬抑制胃癌細胞EMT的發(fā)生[D];蘭州大學(xué);2015年

，

本文編號：2145154