【摘要】：結(jié)腸癌是常見的消化道惡性腫瘤之一,近年來(lái)發(fā)病率逐年升高,5年生存率仍較低,腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致結(jié)腸癌患者死亡及影響預(yù)后的重要因素,但具體機(jī)制目前尚不清楚。近年來(lái)研究表明炎癥微環(huán)境與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān),慢性炎癥可能是導(dǎo)致腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的重要原因之一。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)是腫瘤炎癥微環(huán)境中的重要炎癥細(xì)胞和促炎癥細(xì)胞因子,研究發(fā)現(xiàn)它們誘導(dǎo)靶細(xì)胞DNA突變、惡性轉(zhuǎn)化、細(xì)胞增殖以及血管增生,同時(shí)與腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移密切相關(guān),促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。但TAMs和TNF-α如何介導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有待進(jìn)一步探討。腫瘤相關(guān)鈣信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白-2(tumor-associated calcium signal transducer-2,TROP-2)是一種跨膜糖蛋白,目前發(fā)現(xiàn)多種人類上皮源性腫瘤中高表達(dá),其與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后評(píng)估密切相關(guān)。但是結(jié)腸癌相關(guān)慢性炎癥反應(yīng)中TAMs和TNF-α高表達(dá)是否與TROP-2密切相關(guān)?炎癥細(xì)胞因子TNF-α是否通過(guò)上調(diào)TROP-2而介導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移?目前仍不清楚。揭示這一作用機(jī)制,可能為采用生物靶向治療方案抑制結(jié)腸癌細(xì)胞浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移提供理論依據(jù)。在本研究中,我們檢測(cè)結(jié)腸癌組織中TROP-2、TAMs和TNF-α的表達(dá)情況;并探討慢性炎癥因子TNF-α對(duì)結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞中TROP-2蛋白表達(dá)的影響及其在結(jié)腸癌細(xì)胞侵襲和遷移中的作用。第一部分結(jié)腸癌中TROP-2的表達(dá)及其臨床意義目的:檢測(cè)TROP-2蛋白在結(jié)腸癌標(biāo)本組織及結(jié)腸癌細(xì)胞中的表達(dá)水平,結(jié)合臨床病理資料探討TROP-2與結(jié)腸癌進(jìn)展的相關(guān)性及臨床預(yù)后意義。方法:收集河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院結(jié)腸癌患者的新鮮手術(shù)切除標(biāo)本和病理石蠟切片,應(yīng)用免疫組化染色法檢測(cè)TROP-2蛋白在結(jié)腸癌組織、癌旁組織及正常結(jié)腸組織中的表達(dá)情況,回顧患者的臨床資料,分析TROP-2蛋白水平與不同臨床病理特征的相關(guān)性及臨床預(yù)后意義。應(yīng)用Western blot法檢測(cè)TR0P-2蛋白在新鮮組織標(biāo)本和結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞株中的表達(dá)情況。應(yīng)用免疫熒光法觀察TROP-2蛋白的定位情況。結(jié)果： 1免疫組化檢測(cè)結(jié)腸癌組織中TROP-2蛋白的表達(dá)82例結(jié)腸癌組織中TROP-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)75例(91.5%),高表達(dá)55例(67.1%),低表達(dá)20例(24.4%);癌旁組織中TROP-2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)10例(12.2%),高表達(dá)2例(2.4%),低表達(dá)8例(9.8%)。正常結(jié)腸組織中基本無(wú)表達(dá)。結(jié)腸癌組織中TROP-2蛋白的表達(dá)強(qiáng)度明顯高于癌旁組織和正常組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。2結(jié)腸癌組織中TROP-2的表達(dá)與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系結(jié)腸癌組織中TROP-2蛋白的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤分化程度無(wú)相關(guān)性(P0.05),而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及Dukes分期有顯著相關(guān)性;伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌TROP-2的陽(yáng)性率明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。隨著腫瘤Dukes分期的進(jìn)展,TROP-2的陽(yáng)性率逐漸升高,C+D期中TROP-2的陽(yáng)性率明顯高于A+B期,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。3激光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)腸癌組織中TROP-2的免疫熒光染色CLSM下觀察熒光,細(xì)胞核呈紅色,TROP-2呈環(huán)形綠色熒光,主要是腫瘤細(xì)胞膜表達(dá),TROP-2在胞質(zhì)內(nèi)、細(xì)胞核則少量表達(dá)或不表達(dá)。正常結(jié)腸組織基本無(wú)TROP-2蛋白的綠色熒光表達(dá),提示TROP-2在正常結(jié)腸組織中無(wú)表達(dá)。隨著Dukes分期的進(jìn)展,TROP-2的綠色熒光呈逐漸增多的趨勢(shì),提示隨著腫瘤Dukes分期的進(jìn)展,TROP-2的表達(dá)量逐漸升高。4 Western blot檢測(cè)結(jié)腸癌組織中TROP-2蛋白的表達(dá)正常結(jié)腸組織、癌旁組織及結(jié)腸癌組織中均有TROP-2蛋白的表達(dá),結(jié)腸癌組織中TROP-2蛋白的表達(dá)量明顯高于癌旁組織和切緣正常組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌組織TROP-2的表達(dá)量明顯高于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);隨著腫瘤Dukes分期的進(jìn)展,結(jié)腸癌組織中TROP-2的表達(dá)量逐漸升高,各組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5 Western blot檢測(cè)結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞中TROP-2蛋白的表達(dá)TROP-2蛋白在結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞株中有明顯的表達(dá)。故后續(xù)細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)以結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)?zāi)０濉?結(jié)腸癌中TROP-2的表達(dá)與預(yù)后的相關(guān)性分析Kaplan-Meier生存曲線和Log-rank檢驗(yàn)顯示,TROP-2高表達(dá)組的5年生存率明顯低于TROP-2低表達(dá)的患者(38.2%vs.63.6%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(卡方=34.520,P=0.005)。單因素生存分析結(jié)果顯示TROP-2高表達(dá)(P0.001)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P0.001)、腫瘤Dukes分期(P0.001)與術(shù)后的不良預(yù)后相關(guān),多因素回歸分析表明TROP-2蛋白的高表達(dá)(P0.001,RR=17.209,95%CI:4.239-69.857)是結(jié)腸癌患者不良預(yù)后的獨(dú)立因子。小結(jié):結(jié)腸癌組織中存在TROP-2蛋白的高表達(dá),其表達(dá)量與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes分期呈正相關(guān),與預(yù)后呈負(fù)相關(guān),TROP-2蛋白的表達(dá)水平可作為臨床評(píng)價(jià)結(jié)腸癌病人預(yù)后的有價(jià)值指標(biāo)。隨著腫瘤Dukes分期的進(jìn)展,結(jié)腸癌中TROP-2的表達(dá)量逐漸升高,提示TROP-2在結(jié)腸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中可能發(fā)揮著重要的作用。第二部分結(jié)腸癌中炎癥細(xì)胞TAMs和炎癥因子TNF-a的表達(dá)及其與TROP-2的相關(guān)性研究目的:研究結(jié)腸癌組織中炎癥細(xì)胞TAMs和炎癥因子TNF-α的表達(dá)情況及其與臨床病理特征間的相關(guān)性,并分析結(jié)腸癌中TROP-2與TAMs和TNF-α之間的相關(guān)性,旨在探討結(jié)腸癌中TROP-2高表達(dá)與慢性炎癥的相關(guān)性,為進(jìn)一步探討TNF-α/TROP-2在結(jié)腸癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用機(jī)制提供理論依據(jù)。方法:選取河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院病理科的結(jié)腸癌組織石蠟切片,應(yīng)用免疫組化染色法分別檢測(cè)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達(dá)情況,回顧患者的臨床資料,分析TAMs和TNF-α與各臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性,分析TROP-2與TAMs和TNF-α的相關(guān)性。結(jié)果： 1結(jié)腸癌組織中TAMs的免疫組化染色82例結(jié)腸癌組織切片中均可見CD68陽(yáng)性巨噬細(xì)胞,CD68陽(yáng)性巨噬細(xì)胞主要位于腫瘤間質(zhì)內(nèi),正常結(jié)腸組織中無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。結(jié)腸癌組織中TAMs計(jì)數(shù)明顯高于正常結(jié)腸組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。隨著Dukes分期的進(jìn)展,結(jié)腸癌組織中TAMs計(jì)數(shù)逐漸升高。根據(jù)TAMs計(jì)數(shù)的中位數(shù)將本組病例分為高密度組和低密度組。2結(jié)腸癌組織中TAMs與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系結(jié)腸癌組織中TAMs浸潤(rùn)密度與患者的性別、年齡無(wú)相關(guān)性(P0.05),與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及臨床Dukes分期有顯著相關(guān)性(P0.05);伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者TAMs浸潤(rùn)密度明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P0.05)。隨著Dukes分期的進(jìn)展,TAMs浸潤(rùn)密度逐漸升高,其中B期與C期間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其他各組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。3結(jié)腸癌組織中TNF-α表達(dá)的免疫組化染色82例結(jié)腸癌組織中TNF-α陽(yáng)性表達(dá)70例(85.3%),其中,高表達(dá)48例(58.5%),低表達(dá)22例(26.8%);切緣正常結(jié)腸組織中僅有少量TNF-α陽(yáng)性染色顆粒。結(jié)腸癌組TNF-α的陽(yáng)性率明顯高于正常結(jié)腸組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)腸癌組織中TNF-α的表達(dá)強(qiáng)度明顯高于正常結(jié)腸組織。4結(jié)腸癌組織中TNF-α與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系結(jié)腸癌組織中TNF-α的表達(dá)與患者的性別、年齡無(wú)相關(guān)性(P0.05),與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及臨床Dukes分期有顯著相關(guān)性(P0.05);伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌中TNF-α的表達(dá)量及陽(yáng)性率明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。隨著Dukes分期的進(jìn)展,TNF-α的表達(dá)量及陽(yáng)性率亦逐漸升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。5結(jié)腸癌中TAMs和TNF-α與預(yù)后的相關(guān)性分析通過(guò)COX回歸單因素分析及Kaplan-Meier生存分析發(fā)現(xiàn),結(jié)腸癌患者總生存率與年齡、性別、腫瘤分化程度無(wú)關(guān),而與有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤Dukes分期、TAMs的浸潤(rùn)密度以及TNF-α的表達(dá)相關(guān)。TAMs高密度組的五年的生存率是41.7%;而低表達(dá)組五年的生存率是61.5%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Log-rank檢驗(yàn),卡方=18.444,P0.001)。TNF-α陰性組的五年生存率為83.3%,TNF-α高表達(dá)組的五年的生存率是42.9%;而TNF-α低表達(dá)組五年的生存率是69.7%,三組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Log-rank檢驗(yàn),卡方=18.503,P0.001)。Cox多因素分析結(jié)果顯示TAMs浸潤(rùn)密度(P=0.189)和TNF-α表達(dá)量(P=0.284)均不是獨(dú)立的預(yù)后因子。6結(jié)腸癌中TROP-2與TAMs、TNF-α表達(dá)的相關(guān)性分析在TAMs高密度組中TROP-2的陽(yáng)性率為85.7%(36/42),而TAMs低密度組中TROP-2的陽(yáng)性率為47.5%(19/40),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);結(jié)腸癌組織中TROP-2蛋白的表達(dá)量與TAMs浸潤(rùn)密度呈正相關(guān)((rs=0.569,P0.001);隨著TAMs浸潤(rùn)密度的增加,TROP-2蛋白的表達(dá)量亦逐漸增加。TNF-α陽(yáng)性表達(dá)的70例結(jié)腸癌中TROP-2的陽(yáng)性率為94.3%(66/70),而TNF-α陰性表達(dá)組TROP-2的陽(yáng)性率為66.7%(8/12),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);TNF-α高表達(dá)的48例結(jié)腸癌中TROP-2的高表達(dá)率為91.7%(44/48),而TNF-α低表達(dá)的22例結(jié)腸癌中TROP-2的高表達(dá)率36.4%(8/22),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);結(jié)腸癌組織中TROP-2的表達(dá)量與TNF-α的表達(dá)量呈正相關(guān)(rs=0.592,P0.001);隨著TNF-α表達(dá)量的增加,TROP-2蛋白的表達(dá)量亦逐漸增加。小結(jié):結(jié)腸癌中存在炎癥細(xì)胞TAMs的大量浸潤(rùn)和炎癥因子TNF-α的高表達(dá),二者均與結(jié)腸癌的進(jìn)展相關(guān),可作為結(jié)腸癌預(yù)后評(píng)估的有價(jià)值參考指標(biāo)。結(jié)腸癌中TROP-2蛋白的表達(dá)與炎癥細(xì)胞TAMs的浸潤(rùn)密度和炎癥因子TNF-α的表達(dá)呈正相關(guān),提示結(jié)腸癌中炎癥細(xì)胞TAMs和炎癥因子TNF-α可能參與TROP-2蛋白表達(dá)的上調(diào)。第三部分炎癥因子TNF-α通過(guò)上調(diào)TROP-2表達(dá)促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞侵襲遷移的體外研究目的:本部分研究旨在探討炎癥因子TNF-α對(duì)結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞中TROP-2蛋白表達(dá)的調(diào)控及其對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響,探討TNF-α是否通過(guò)調(diào)控TROP-2表達(dá)而影響結(jié)腸癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。方法:體外培養(yǎng)人結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞株,首先應(yīng)用不同濃度炎癥因子TNF-α刺激結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞,MTT法檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞增殖的影響,確定最佳藥物濃度及作用時(shí)間。選擇濃度為20ng/m L的TNF-α處理HCT-116細(xì)胞,用Western blot方法檢測(cè)細(xì)胞中TROP-2蛋白表達(dá)量的變化,用劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)低濃度TNF-α處理前后結(jié)腸癌細(xì)胞侵襲和遷移能力的變化。此外,應(yīng)用RNA干擾技術(shù)沉默結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞的TROP-2基因,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)TROP-2m RNA及蛋白表達(dá)水平,再次檢測(cè)低濃度TNF-α對(duì)低表達(dá)TROP-2蛋白的HCT-116細(xì)胞的侵襲和遷移能力的影響。結(jié)果： 1 TNF-α對(duì)結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞增殖的影響低濃度TNF-α(≤50ng/m L)處理24小時(shí)和48小時(shí)均對(duì)于HCT-116細(xì)胞無(wú)明顯細(xì)胞毒性作用,細(xì)胞增殖無(wú)明顯抑制。高濃度TNF-α(≥100ng/m L)則產(chǎn)生明顯細(xì)胞毒性作用,對(duì)細(xì)胞增殖有抑制作用。故后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇的TNF-α濃度為20ng/m L,作用時(shí)間不超過(guò)48小時(shí)。2 TNF-α對(duì)HCT-116細(xì)胞TROP-2蛋白表達(dá)的影響用不同濃度TNF-α(0、10、20、30、50、100、200ng/m L)處理HCT-116細(xì)胞24小時(shí),用Western blot法檢測(cè)TROP-2蛋白的表達(dá),低濃度TNF-α(≤50ng/m L)處理HCT-116細(xì)胞24小時(shí),TROP-2蛋白的表達(dá)量升高,其中以濃度20ng/m L時(shí)TROP-2表達(dá)量最高;而高濃度TNF-α(≥100ng/m L)時(shí)TROP-2蛋白的表達(dá)量逐漸下降。3 TNF-α對(duì)結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響實(shí)驗(yàn)共分兩組:TNF-α組(給予濃度為20ng/mL的TNF-α)和正常對(duì)照組(給予PBS代替TNF-α)。劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,TNF-α組24h時(shí)的劃痕愈合率較對(duì)照組顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,TNF-α組中結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞的穿膜細(xì)胞數(shù)明顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4 TROP-2si RNA對(duì)HCT-116細(xì)胞TROP-2 mRNA和蛋白的影響實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Western blot結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染TROP-2si RNA后TROP-2基因的m RNA水平和蛋白水平均明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5 TNF-α對(duì)RNA干擾前后HCT-116細(xì)胞的遷移和侵襲能力的影響實(shí)驗(yàn)分為兩組:si RNA組和正常對(duì)照組。劃痕實(shí)驗(yàn)顯示si RNA組與對(duì)照組相比,24h時(shí)的細(xì)胞劃痕愈合率顯著下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。Transwell實(shí)驗(yàn)顯示si RNA組的穿膜細(xì)胞數(shù)較對(duì)照組明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。小結(jié):低濃度炎癥因子TNF-α促進(jìn)結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞侵襲和遷移的機(jī)制是通過(guò)上調(diào)TROP-2蛋白的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。第四部分炎癥因子TNF-α上調(diào)結(jié)腸癌細(xì)胞TROP-2表達(dá)的分子機(jī)制研究目的:旨在探討MAPK信號(hào)通路在TNF-α上調(diào)TROP-2蛋白表達(dá)而促進(jìn)結(jié)腸癌侵襲和遷移過(guò)程中的作用機(jī)制。方法:本部分實(shí)驗(yàn)以人結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116為研究對(duì)象,選取三條MAPK信號(hào)通路為研究重點(diǎn),體外培養(yǎng)結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞,給予濃度為20ng/m L的TNF-α處理(0min、15min、30min、1h、2h、3h)后,應(yīng)用Western blot法檢測(cè)三條MAPK信號(hào)通路中關(guān)鍵蛋白p-p38、p-JNK及p-ERK1/2的表達(dá)水平,確定可能被激活的信號(hào)通路。應(yīng)用該激活通路關(guān)鍵蛋白的特異性抑制劑預(yù)處理HCT-116細(xì)胞30分鐘,阻斷該信號(hào)通路后,再給予炎癥因子TNF-α處理,Western blot檢測(cè)該通路關(guān)鍵蛋白及TROP-2蛋白的表達(dá)情況。再應(yīng)用劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)特異性抑制劑阻斷該信號(hào)通路后能否影響TNF-α的促侵襲和促遷移能力。結(jié)果： 1濃度為20ng/m L的TNF-α處理結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞15分鐘后即出現(xiàn)p-ERK1/2表達(dá)量的升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而p-JNK和p-p38的表達(dá)量無(wú)明顯變化。2用ERK1/2通路的特異性抑制劑PD98059(20μM)預(yù)處理HCT-116細(xì)胞30分鐘,特異性阻斷ERK1/2通路后,再給予20ng/m L的TNF-α處理24小時(shí),提取細(xì)胞總蛋白行Western blot,分別檢測(cè)p-ERK1/2和TROP-2蛋白的表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)共分四組:control組、PD98059組、TNF-α組和PD98059+TNF-α組。TNF-α組的p-ERK1/2和TROP-2的表達(dá)量均明顯升高,而PD98059+TNF-α組的p-ERK1/2和TROP-2的表達(dá)量均明顯低于TNF-α組,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,PD98059+TNF-α組24h時(shí)的細(xì)胞劃痕寬度較TNF-α組顯著增寬,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,PD98059+TNF-α組的穿膜細(xì)胞數(shù)較TNF-α組明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。小結(jié):在結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞中,低濃度炎癥因子TNF-α是通過(guò)激活ERK1/2信號(hào)通路上調(diào)TROP-2蛋白的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞侵襲和遷移。p38和JNK這兩條MAPK信號(hào)通路在炎癥因子TNF-α上調(diào)TROP-2蛋白表達(dá)過(guò)程中可能不發(fā)揮作用。結(jié)論:結(jié)腸癌中存在TROP-2蛋白的高表達(dá),隨著腫瘤Dukes分期的進(jìn)展,其表達(dá)量逐漸升高,TROP-2蛋白可作為結(jié)腸癌預(yù)后評(píng)價(jià)的有價(jià)值指標(biāo)。結(jié)腸癌中還存在炎癥細(xì)胞TAMs的大量浸潤(rùn)和炎癥因子TNF-α的高表達(dá),隨著腫瘤的進(jìn)展,TAMs的浸潤(rùn)密度和TNF-α的表達(dá)量逐漸升高,二者與TROP-2的表達(dá)呈正相關(guān),提示慢性炎癥上調(diào)TROP-2表達(dá)可能是導(dǎo)致結(jié)腸癌侵襲和轉(zhuǎn)移的原因。體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),炎癥因子TNF-α通過(guò)激活ERK1/2信號(hào)通路上調(diào)TROP-2蛋白的表達(dá),進(jìn)而增強(qiáng)結(jié)腸癌細(xì)胞的侵襲和遷移能力。進(jìn)而提示在結(jié)腸癌相關(guān)慢性炎癥反應(yīng)中,炎癥細(xì)胞因子TNF-α上調(diào)TROP-2表達(dá)促進(jìn)癌細(xì)胞浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.35

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本文編號(hào)：2137207