【摘要】：第一部分:血清miRNA-206預(yù)測(cè)中晚期宮頸鱗狀細(xì)胞癌同步放化療抵抗的價(jià)值[背景與目的]宮頸癌(Cervival Carcinoma)是世界范圍內(nèi)女性最常見的惡性生殖系統(tǒng)腫瘤之一。在我國(guó),ⅡB期以上的中晚期患者約占60%-70%。在臨床中,部分同樣接受標(biāo)準(zhǔn)的同步放化療(ConcurrentChemoradiotherapy,CCRT)的患者,其治療預(yù)后卻存在較大的差異。究其原因,從臨床病理因素方面分析,患者對(duì)于同步放化療反應(yīng)的不同,可能與以下因素相關(guān),包括病理分型、臨床期別、療前血清鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原(Squamous Cell Carcinoma Antigen,SCC)水平、腫瘤大小、分化程度以及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等相關(guān)。然而,有少部分臨床病理因素相似的患者對(duì)于CCRT的反應(yīng)也存在較大的差異,這提示了治療反應(yīng)的差異可能與腫瘤的內(nèi)在敏感性相關(guān)。近年來,miRNA(microRNA,微小核糖核酸)因其特殊的穩(wěn)定性及特異性,在腫瘤分子診斷標(biāo)志物方面有明顯的優(yōu)越性。其中,循環(huán)miRNA備受關(guān)注,即存在于血液和體液中的miRNA,具有取材便捷、相對(duì)無創(chuàng)、性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)勢(shì),臨床推廣前景較好,日漸成為研究的熱點(diǎn)。我們課題組前期采用血清標(biāo)本進(jìn)行相關(guān)miRNA研究,已使用芯片篩選出CCRT敏感組與抗拒組的中晚期宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者之間血清miRNA差異表達(dá)譜,現(xiàn)擬繼續(xù)擴(kuò)大血清樣本進(jìn)行驗(yàn)證,分析其與臨床預(yù)后的相關(guān)性,為驗(yàn)證與CCRT反應(yīng)相關(guān)的生物標(biāo)志物,并為今后進(jìn)一步探索能夠針對(duì)CCRT抵抗的治療新靶點(diǎn)打下基礎(chǔ)。[材料與方法]收集2013年9月至2015年11月期間在中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院婦科后裝接受同步放化療的FIGO(2009版)分期為ⅡB～ⅢB期的中晚期宮頸鱗癌患者的治療前血清標(biāo)本。以治療結(jié)束后12個(gè)月為標(biāo)準(zhǔn),在12個(gè)月內(nèi)腫瘤持續(xù)或出現(xiàn)進(jìn)展,或發(fā)現(xiàn)了新生腫瘤病灶者納入CCRT抗拒組,而12個(gè)月內(nèi)未發(fā)現(xiàn)腫瘤證據(jù)者納入CCRT敏感組。結(jié)合患者臨床病理資料以及隨訪結(jié)果,挑選臨床病理因素高度匹配的患者20例(CCRT抗拒組和敏感組各10例),進(jìn)行microRNA表達(dá)譜芯片篩選,篩選出兩組中表達(dá)具有差異(變化兩倍以上)的microRNAs作為候選。采用RQ manager 1.2和DataAsistV2.0軟件分析篩選得到兩組間差異表達(dá)顯著(P0.05)的microRNAs。進(jìn)一步在131例患者血清中采用實(shí)時(shí)定量PCR對(duì)候選microRNAs進(jìn)行擴(kuò)大樣本量驗(yàn)證。結(jié)合患者臨床病理資料及隨訪結(jié)果,分析候選microRNAs表達(dá)水平與腫瘤放化療抵抗以及各種臨床病理因素之間的關(guān)系。[結(jié)果]前期的篩選階段結(jié)果發(fā)現(xiàn),CCRT抗拒組和敏感組間差異表達(dá)的microRNAs共214個(gè),其中有顯著性差異表達(dá)的microRNAs(變化倍數(shù)大于2倍且P0.05)有3個(gè):miR-136-5p(以敏感組為標(biāo)準(zhǔn),抗拒組下調(diào))、miR-152-3P(抗拒組上調(diào))和miR-206(抗拒組上調(diào))。經(jīng)過我們后期的預(yù)實(shí)驗(yàn)的初步驗(yàn)證發(fā)現(xiàn),miR-136-5p和miR-152-3P在血清樣本中表達(dá)量極低,在不進(jìn)行預(yù)擴(kuò)增的情況下無法檢測(cè)到,而其中只有miR-206能夠被檢測(cè)�？紤]到實(shí)驗(yàn)的可操作性和今后臨床的應(yīng)用價(jià)值,我們選擇血清miR-206作為目標(biāo)miRNA,進(jìn)一步在131例血清樣本中進(jìn)行了驗(yàn)證,其結(jié)果顯示:血清miR-206(抗拒組上調(diào))在CCRT敏感組與抗拒組的表達(dá)差異明顯,其表達(dá)為:敏感組2.715±0.2115 vs抗拒組14.64±1.184,且其之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0001)。血清miRNAs的表達(dá)水平與臨床病理因素的相關(guān)性分析顯示血清miR-206高表達(dá)與腫瘤期別高及局部腫瘤大相關(guān)。進(jìn)行單因素分析顯示血清miR-206的表達(dá)水平、腫瘤分化以及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是無復(fù)發(fā)間隔時(shí)間(Disease Free Survival,DFS)的獨(dú)立預(yù)后因素(P=0.008,0.000,0.000)。Cox多因素回歸模型分析顯示血清miR-206表達(dá)水平是患者DFS的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。使用ROC曲線分析血清miRNA-206預(yù)測(cè)患者CCRT治療結(jié)局的AUC(Area Under Curve)為 91.3%(敏感性 79.3%,特異性 92.2%)。[結(jié)論]CCRT抵抗的中晚期宮頸鱗癌患者血清miR-206高表達(dá);血清miR-206表達(dá)水平與患者預(yù)后呈負(fù)相關(guān)。單獨(dú)使用血清miR-206預(yù)測(cè)患者治療結(jié)局的準(zhǔn)確性高于使用臨床病理因素的預(yù)測(cè)。這些結(jié)果均提示血清miRNA-206有可能作為新型分子標(biāo)志物用于篩選中晚期宮頸鱗癌CCRT抗拒的患者。第二部分術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)陽性對(duì)臨床早期宮頸腺癌患者預(yù)后的意義[背景與目的]宮頸癌是婦科常見的惡性腫瘤,病理類型主要包括宮頸鱗癌和宮頸腺癌。宮頸腺癌較宮頸鱗癌少見,但近年來有上升趨勢(shì),約占到原發(fā)性宮頸癌的20%。宮頸癌的分期標(biāo)準(zhǔn)不同于卵巢癌與子宮內(nèi)膜癌,不是通過手術(shù)病理進(jìn)行分期,而是通過治療前的臨床檢查(婦科檢查+影像學(xué)檢查)分期。因此,術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)檢查一直未列入宮頸癌的分期指南中,且目前對(duì)于宮頸癌的治療沒有明確的指導(dǎo)意義。自從1970年Creasman等第一次報(bào)道腹腔細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸癌中的意義,此后相關(guān)研究逐漸增多,但是眾多的結(jié)果并不一致。多數(shù)學(xué)者的研究結(jié)果表明,腹腔細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸鱗癌患者的預(yù)后中無明確意義。但在宮頸腺癌中,術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)檢查是否是一項(xiàng)有意義的臨床預(yù)后因素,是否對(duì)于治療有指導(dǎo)價(jià)值,目前尚無定論。本研究擬通過回顧性分析于2000年12月1日至2015年12月31日期間在我院接受了手術(shù)治療,并在術(shù)中留取腹腔細(xì)胞學(xué)檢查的136例臨床早期宮頸腺癌患者的臨床病理資料及預(yù)后情況,旨在探討術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)結(jié)果陽性在臨床早期宮頸腺癌患者預(yù)后中的意義。[材料與方法]回顧性分析2000年12月1日至2015年12月31日期間在中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院接受手術(shù)治療,并在術(shù)中留取腹腔細(xì)胞學(xué)檢查的136例早期宮頸腺癌患者的臨床資料及隨訪資料。分析術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)陽性與患者臨床病理因素之間的關(guān)系,并通過Kaplan-Meier法和Cox回歸模型來分析術(shù)中陽性腹腔細(xì)胞學(xué)在患者預(yù)后中的意義。[結(jié)果]共有136名患者符合入組標(biāo)準(zhǔn)并具有完整的隨訪資料。其中術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)陽性的患者有13例(9.6%),陰性患者123例(90.4%)。在這136例患者中,術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)陽性和陰性患者的5年總生存(5-year Overall Survival)率分別為69.2%和95.7%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。3年無復(fù)發(fā)生存率(3-year Recurrence Free Survival,RFS)在術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)陽性和陰性兩組患者中分別是76.2%和91.3%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.041)。分析結(jié)果顯示,術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)陽性患者的復(fù)發(fā)率較陰性患者的復(fù)發(fā)率高,分層分析顯示,兩組間的差異在總復(fù)發(fā)率(P=0.002)、局部復(fù)發(fā)率(P=0.012)中有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.15)。Cox回歸模型分析顯示術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)陽性不是臨床早期宮頸腺癌患者獨(dú)立的預(yù)后因素,而盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和宮旁受累與患者的預(yù)后顯著相關(guān)。[結(jié)論]在臨床早期宮頸腺癌患者中,術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)陽性雖然不是患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,但術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)結(jié)果陽性的患者復(fù)發(fā)率明顯高于陰性患者,且術(shù)中腹腔細(xì)胞學(xué)結(jié)果陽性組的患者預(yù)后明顯較陰性組患者差。
[Abstract]:First part : Serum miRNA - 206 is one of the most common malignant reproductive system tumors in the middle and late stage of cervical squamous cell carcinoma . The results showed that the expression of miR - 136 - 5p and miR - 152 - 3P in serum samples was significantly lower than that in patients without pre - amplification . The results showed that the expression of miR - 136 - 5p and miR - 152 - 3P was significantly different between the two groups . The clinical pathological data and prognosis of patients with cervical squamous cell carcinoma were analyzed retrospectively .
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R737.33

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本文編號(hào)：2131249