本文選題：子宮內(nèi)膜癌 + HEC-A細(xì)胞��； 參考：《山東醫(yī)藥》2017年45期

【摘要】：目的構(gòu)建人miR-373-3p低表達(dá)慢病毒載體,探討miR-373-3p低表達(dá)對(duì)子宮內(nèi)膜癌HEC-1A細(xì)胞增殖和遷移能力的影響。方法利用PCR擴(kuò)增包含miR-373-3p前體序列的目的基因,經(jīng)酶切后克隆入慢病毒載體GV280中構(gòu)建GV280-pre-miR-373-3p inhibitor表達(dá)載體,通過與包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,進(jìn)行慢病毒的包裝和滴度測(cè)定。分別用空載慢病毒(空載病毒組)及重組慢病毒miR-373-3p(miR-373-3p組)感染HEC-1A細(xì)胞,并設(shè)立空白對(duì)照組。采用RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞miR-373-3p mRNA的相對(duì)表達(dá)水平,CCK-8法檢測(cè)培養(yǎng)24、48、72、96 h時(shí)細(xì)胞增殖活力,細(xì)胞劃痕和Transwell小室試驗(yàn)檢測(cè)培養(yǎng)24、48 h時(shí)細(xì)胞遷移能力。結(jié)果成功構(gòu)建了人miR-373-3p低表達(dá)慢病毒載體。與空白對(duì)照組和空載病毒組比較,miR-373-3p組miR-373-3p相對(duì)表達(dá)量低,培養(yǎng)48、72、96h HEC-1A細(xì)胞增殖活力均降低(P均0.05),24、48 h HEC-1A細(xì)胞劃痕面積遷移率低,24 h穿膜細(xì)胞數(shù)少(P均0.05)�？蛰d病毒組及空白對(duì)照組各指標(biāo)比較,P均0.05。結(jié)論成功構(gòu)建了人miR-373-3p低表達(dá)慢病毒載體,miR-373-3p低表達(dá)可抑制人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞HEC-1A的增殖、遷移能力。
[Abstract]:Objective to construct a low expression lentivirus vector of human miR-373-3p and to investigate the effect of low expression of miR-373-3p on the proliferation and migration of endometrial carcinoma HEC-1A cells. Methods the target gene containing the precursor sequence of miR-373-3p was amplified by PCR and cloned into the lentivirus vector GV280. The GV280-pre-miR-373-3p inhibitor expression vector was constructed and cotransfected with the packaging plasmid 293T cells for the packaging and titer determination of lentivirus. HEC-1A cells were infected with no-load lentivirus (no-load virus group) and recombinant lentivirus miR-373-3p (miR-373-3p group), respectively. The relative expression level of miR-373-3p mRNA was detected by RT-PCR and the cell proliferation activity was detected by CCK-8 method at 24: 48 / 722 / 96 h, and the cell migration ability was detected by cell scratch and Transwell chamber test at 24: 48 h. Results the low expression lentiviral vector of human miR-373-3p was successfully constructed. The relative expression of miR-373-3p in miR-373-3p group was lower than that in blank control group and no-load virus group, and the proliferative activity of HEC-1A cells was decreased (P 0.05). The migration rate of scratch area of HEC-1A cells at 244h was lower than that of HEC-1A cells at 24 h (P 0.05). The comparison of each index between the no-load virus group and the blank control group (P < 0.05). Conclusion the low expression of human miR-373-3p can inhibit the proliferation and migration of human endometrial cancer cell line HEC-1A.
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院;
【基金】：廣西醫(yī)療衛(wèi)生適宜技術(shù)研究與開發(fā)項(xiàng)目(S201520)
【分類號(hào)】：R737.33

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本文編號(hào)：2104903