AQP-5對結(jié)直腸癌細(xì)胞生長的影響及機(jī)制
本文選題:結(jié)直腸癌 + AQP-; 參考:《南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年10期
【摘要】:目的探討水通道蛋白-5(AQP-5)對細(xì)胞增殖及凋亡影響及可能的機(jī)制。方法體外常規(guī)培養(yǎng)人結(jié)直腸癌COLO 205和SW480細(xì)胞,取對數(shù)生長期的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。通過siRNA技術(shù)抑制內(nèi)源性AQP-5的表達(dá),并經(jīng)免疫熒光、PCR檢測AQP-5-siRNA轉(zhuǎn)染效率,利用MTT法檢測細(xì)胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI和TUNEL檢測細(xì)胞凋亡情況,RT-PCR和Western blot檢測Bax、Bcl-2表達(dá)變化。結(jié)果在COLO 205和SW480細(xì)胞株中,轉(zhuǎn)染AQP-5-siRNA后AQP-5表達(dá)下調(diào)達(dá)90%。MTT分析結(jié)果顯示,與轉(zhuǎn)染NS-siRNA組相比,轉(zhuǎn)染AQP-5-siRNA組的細(xì)胞增殖抑制率顯著增加(P0.05);流式細(xì)胞分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),與NSsiRNA組細(xì)胞相比,轉(zhuǎn)染AQP-5-siRNA后細(xì)胞凋亡率顯著增加(P0.05);熒光實(shí)時定量RT-PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測結(jié)果顯示:與轉(zhuǎn)染NS-siRNA組相比,轉(zhuǎn)染AQP-5-siRNA明顯提升Bax/Bcl-2 mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)論 AQP-5-siRNA可體外促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞凋亡,其機(jī)制可能與Bax/Bcl表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of aquaporin-5 (AQP-5) on cell proliferation and apoptosis and its possible mechanism. Methods Colo 205 and SW480 cells were cultured in vitro. The expression of endogenous AQP-5 was inhibited by siRNA technique, and the transfection efficiency of AQP-5-siRNA was detected by immunofluorescence PCR. The cell proliferation ability was detected by MTT assay. The apoptosis of cells was detected by Annexin V-FITC / Pi and Tunel. RT-PCR and Western blot were used to detect the expression of Baxfen Bcl-2. Results in COLO205 and SW480 cell lines, the expression of AQP-5-siRNA was down-regulated by 90% MTT assay. The results of MTT analysis showed that the inhibition rate of cell proliferation was significantly increased compared with that of NS-siRNA group (P0.05), and the results of flow cytometry showed that compared with NSsiRNA group, the inhibition rate of AQP-5 expression was significantly higher than that of NSsiRNA group. After transfection of AQP-5-siRNA, the apoptosis rate increased significantly (P0.05). The results of real-time quantitative RT-PCR and Western blotting showed that the expression of Bax-Bcl-2 mRNA and protein was significantly increased after transfection of AQP-5-siRNA compared with the group of NS-siRNA transfection. Conclusion AQP-5-siRNA can promote apoptosis of colorectal cancer cells in vitro and its mechanism may be related to the expression of Bax / Bcl.
【作者單位】: 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部第二附屬醫(yī)院普通外科;淄博市中心醫(yī)院胃腸外科;西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部第一附屬醫(yī)院普通外科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81402583) 陜西省自然科學(xué)基金(2014JQ4165) 西安交通大學(xué)教育基金(xjj2014077) 西安交大二附院院基金(RC(XM)201402;YJ(QN)201521)~~
【分類號】:R735.3
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