本文選題：硫酸右旋糖酐 + 人胃癌細胞�。� 參考：《寧夏醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的本研究主要闡述在低氧條件下硫酸右旋糖酐(DS)對人胃癌細胞(BGC-823)的抑制作用并探討DS是否通過影響LOX表達抑制人胃癌細胞(BGC-823)細胞的侵襲和遷移。方法1、在常氧條件下培養(yǎng)BGC-823細胞,通過CCK8實驗方法檢測DS、BAPN(LOX活性抑制劑)以及兩者聯(lián)合應用24h對人胃癌細胞(BGC-823)的增殖。2、通過流式細胞儀檢測DS對BGC-823細胞的凋亡。3、低氧條件下,應用侵襲和遷移實驗檢測比較DS、BAPN以及兩者聯(lián)合應用后對BGC-823細胞侵襲和遷移的影響。4、將BGC-823細胞分為對照組(PBS)與實驗組(DS),在低氧條件下培養(yǎng)不同時間(2h、8h、12h、24h),通過免疫細胞化學、免疫細胞熒光、RT-PCR和Western blot法檢測LOX、TGF-β的表達水平。5、,DS與BAPN單獨或聯(lián)合應用12h,通過Western blot法檢測LOX、TGF-β、E-cadherin的蛋白表達水平。結果1、CCK-8實驗表明:梯度濃度的DS和BAPN干預24h后,隨著濃度的增加細胞增殖活性逐漸降低;DS與BAPN聯(lián)合應用后細胞增殖活性降低更加明顯。2、流式細胞儀檢測表明:梯度濃度的DS干預24h后,隨著濃度的增加細胞凋亡率也逐漸增加(P0.05)。3、Transwell實驗表明:在低氧條件下,DS、BAPN均能降低BGC-823細胞的侵襲和遷移能力(P0.05);DS和BAPN聯(lián)合應用比單獨應用DS或BAPN,能顯著降低BGC-823細胞的侵襲和遷移能力(P0.05)。4、免疫細胞化學和免疫細胞熒光結果均表明:對照組LOX和TGF-β表達呈時間依賴性,DS能顯著降低不同時間點LOX和TGF-β的表達,與對照組相比,有統(tǒng)計學差異。5、RT-PCR實驗表明:DS能夠顯著降低不同時間點LOX mRNA和TGF-βmRNA的表達水平,與對照組相比,有統(tǒng)計學差異;DS能夠增加不同時間點Smad4 mRNA的表達水平,與對照組相比,有統(tǒng)計學差異。6、Western blotting結果顯示:DS能夠顯著降低不同時間點LOX、TGF-β的蛋白表達水平,與對照組相比,有統(tǒng)計學差異;DS能夠增加不同時間點Smad4、E-cadherin蛋白的表達水平,與對照組相比,有統(tǒng)計學差異。將DS與BAPN聯(lián)合應用12h后,LOX、TGF-β表達顯著下降,而E-caherin表達顯著增加,與單獨應用DS或BAPN相比,有統(tǒng)計學差異。結論1、DS對人胃癌細胞增殖和凋亡的影響呈濃度依賴性。2、DS能抑制人胃癌細胞侵襲和遷移,DS與BAPN聯(lián)合應用效果更顯著。3、DS能降低人胃癌細胞LOX、TGF-β的表達和增加Smad4、E-cadherin的表達水平,DS與BAPN聯(lián)合應用效果更明顯。LOX與TGF-β蛋白表達呈正相關性。DS可能通過影響LOX而抑制人胃癌細胞的侵襲和遷移。
[Abstract]:The expression level of LOX , TGF - 尾 and E - cadherin in human gastric cancer cells was detected by flow cytometry . Results 1 銆，

本文編號：2089411