本文選題：淫羊藿素 + 順鉑�。� 參考：《昆明醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：背景：淫羊藿素(icaritin,ICT)作為一種中藥成分,研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿素對多種實體和非實體腫瘤具有一定抗腫瘤作用,同時也具有保護心血管系統(tǒng)、促進骨骼生長發(fā)育、提高免疫力。而在非小細(xì)胞肺癌化療中,以鉑類為基礎(chǔ)的化療,其毒副作用大,且存在部分患者對鉑類化療不敏感。目的：本研究通過從細(xì)胞水平,研究淫羊藿素是否能增強順鉑抗非小細(xì)胞肺癌抑制作用,并研究其可能的作用機制,同時研究淫羊藿素和順鉑對正常支氣管上皮細(xì)胞的毒性作用。方法：用不同濃度的淫羊藿素、順鉑及淫羊藿素聯(lián)合順鉑處理A549細(xì)胞不同時間后觀察A549細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；MTT法測定不同濃度的淫羊藿素、順鉑及淫羊藿素聯(lián)合順鉑處理A549細(xì)胞、支氣管上皮細(xì)胞BEAS-2B細(xì)胞株不同時間后細(xì)胞增殖抑制影響,計算抑制率和IC50值；細(xì)胞克隆實驗檢測不同濃度的淫羊藿素、順鉑及淫羊藿素聯(lián)合順鉑處理A549細(xì)胞處理A549細(xì)胞24h后對細(xì)胞克隆形成的影響；流式細(xì)胞儀檢測不同濃度的淫羊藿素、順鉑及淫羊藿素聯(lián)合順鉑處理A549細(xì)胞處理A549細(xì)胞24h后對細(xì)胞細(xì)胞周期及凋亡的影響；Western blotting實驗檢測不同濃度的淫羊藿素、順鉑及淫羊藿素聯(lián)合順鉑處理A549細(xì)胞24h后對細(xì)胞中AKT、p-AKT、Bcl-2、Bim、Caspase-9蛋白質(zhì)表達水平的影響。結(jié)果：(1)淫羊藿素、順鉑及淫羊藿素聯(lián)合順鉑能使A549細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯改變,且隨作用時間延長細(xì)胞形態(tài)變化更加明顯；聯(lián)合組的細(xì)胞形態(tài)變化得更加明顯,。(2)淫羊藿素可抑制A549細(xì)胞增殖,其抑制作用呈時間-劑量依賴性。(3)順鉑可抑制A549細(xì)胞增殖,其抑制作用呈時間-劑量依賴性。(4)淫羊藿素聯(lián)合順鉑對A549細(xì)胞增殖抑制作用明顯高于單藥組。各聯(lián)合指數(shù)CI均小于0.9,淫羊藿素可協(xié)同增強順鉑抑制A549細(xì)胞增殖作用。(5)淫羊藿素組對BEAS-2B細(xì)胞的活性抑制較低,細(xì)胞毒性較少；順鉑組BEAS-2B細(xì)胞活性抑制相對較大,細(xì)胞毒性較大；淫羊藿素聯(lián)合順鉑后并不會大幅度增加順鉑對BEAS-2B細(xì)胞的細(xì)胞毒性。(6)淫羊藿素、順鉑單藥可抑制A549細(xì)胞克隆形成,聯(lián)合組與單藥組比較,聯(lián)合組明顯抑制A549細(xì)胞克隆形成。(7)淫羊藿素誘導(dǎo)A549細(xì)胞周期阻滯于G2/M；順鉑誘導(dǎo)A549細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期和S期；淫羊藿素聯(lián)合順鉑誘導(dǎo)A549細(xì)胞周期阻滯于S期。(8)淫羊藿素、順鉑及淫羊藿素聯(lián)合順鉑可明顯誘導(dǎo)A549細(xì)胞發(fā)生凋亡,且聯(lián)合組與單藥組比較,聯(lián)合組凋亡率明顯高于單藥組。(9)Western blotting實驗結(jié)果顯示：聯(lián)合組與單藥組比較,聯(lián)合組能夠顯著下調(diào)AKT、p-AKT的表達水平、抗凋亡蛋白Bcl-2的表達水平,并上調(diào)凋亡蛋白Bim, Caspase-9蛋白的表達水平。結(jié)論：淫羊藿素可通過細(xì)胞毒性作用、抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,與順鉑聯(lián)合后對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖具有協(xié)同抑制作用,其作用機制可能與PI3K/AKT信號通路介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑相關(guān)。淫羊藿素聯(lián)合順鉑應(yīng)用治療非小細(xì)胞肺癌,并不會大幅度增加順鉑的支氣管上皮細(xì)胞的細(xì)胞毒性,提示淫羊藿素聯(lián)合順鉑治療非小細(xì)胞肺癌具有一定可行性和臨床應(yīng)用價值。
[Abstract]:Background: icaritin (ICT) is a traditional Chinese medicine component. It has been found that icariin has a certain antitumor effect on various solid and non solid tumors, and it also protects the cardiovascular system, promotes the growth and development of bone and enhances immunity. In the chemotherapy of non-small cell lung cancer, platinum based chemotherapy, its toxic and side effects Objective: To investigate whether icariin can enhance the inhibitory effect of cisplatin against non-small cell lung cancer and to study the possible mechanism of action of cisplatin and study the toxic effect of icariin and cisplatin on normal tracheal epithelial cells. The concentration of epimedium, cisplatin and cisplatin combined with cisplatin treated A549 cells at different time to observe the morphological changes of A549 cells; MTT assay was used to determine the different concentrations of icariin, cisplatin and icariin combined with cisplatin to treat A549 cells, and the inhibitory effects of cell proliferation on the BEAS-2B cell line of the bronchial epithelial cells after different time, and the inhibition of the inhibition of cell proliferation. The effects of different concentrations of icariin, cisplatin and epimedium combined with cisplatin on the treatment of A549 cell 24h were detected by cisplatin and cisplatin in A549 cells. The flow cytometry was used to detect different concentrations of icariin, cisplatin and epimedium combined with cis platinum to treat A549 cell 24h after A549 cells were treated with A549 cells. Effect of cell cycle and apoptosis; Western blotting test was used to detect the effects of different concentrations of icariin, cisplatin and icariin combined with cisplatin on the expression of AKT, p-AKT, Bcl-2, Bim, and Caspase-9 protein in A549 cells. Results: (1) icariin, cisplatin and cisplatin combined with cisplatin can make the A549 cells thin. Cell morphogenesis was obviously changed and the morphological changes of cells were more obvious with the time of action; the cell morphology of the combined group changed more obviously. (2) Epimedium could inhibit the proliferation of A549 cells, and its inhibition was time dose dependent. (3) cisplatin inhibited the proliferation of A549 cells, and its inhibitory effect was time dose dependent. (4) prostitution sheep The inhibitory effect of Epimedium combined with cisplatin on the proliferation of A549 cells was significantly higher than that of the single drug group. The combined index CI was less than 0.9. Icariin could synergistically enhance cisplatin to inhibit the proliferation of A549 cells. (5) the inhibition of the activity of Icariin on the activity of BEAS-2B cells was lower and the cytotoxicity of cisplatin was less. The inhibition of the activity of BEAS-2B cells in cisplatin group was relatively large, and the cytotoxicity of cisplatin was relatively large. The combination of icariin and cisplatin did not significantly increase the cytotoxicity of cisplatin to BEAS-2B cells. (6) icariin and cisplatin could inhibit the formation of A549 cell clones. Compared with the single drug group, the combined group significantly inhibited the formation of A549 cell clones. (7) Herba Epimedium induced the A549 cell cycle in G2/M; cisplatin induced A549. The cell cycle was blocked in G0/G1 phase and S phase; icariin combined with cisplatin induced A549 cell cycle arrest in S phase. (8) icariin, cisplatin and cisplatin combined cisplatin could induce apoptosis in A549 cells, and the combined group was significantly higher than the single drug group in the single drug group. (9) the results of Western blotting test showed: Compared with the single drug group, the combined group could significantly reduce the expression level of AKT, p-AKT, the expression of anti apoptotic protein Bcl-2, and up regulate the expression level of apoptotic protein Bim and Caspase-9 protein. Conclusion: Epimedium can inhibit the proliferation of non small cell lung cancer cells and induce apoptosis through the cytotoxic effect of icepin, and combined with cisplatin. Non small cell lung cancer cell proliferation has a synergistic inhibitory effect, and its mechanism may be related to the apoptosis pathway mediated by PI3K/AKT signaling pathway. Icariin combined with cisplatin in the treatment of non small cell lung cancer does not significantly increase the cytotoxicity of cisplatin's bronchial epithelial cells, suggesting that icariin combined with cisplatin for the treatment of non - small cell lung cancer. Small cell lung cancer has certain feasibility and clinical application value.
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R734.2

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本文編號：2080465