本文選題：嵌合抗原受體 + Trop-　； 參考：《南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2017年06期

【摘要】：目的:制備靶向人滋養(yǎng)層細(xì)胞表面抗原2(human trophoblast cell surface antigen 2,Trop-2)的嵌合抗原受體T細(xì)胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T),觀察Trop-2 CAR-T細(xì)胞在體外對卵巢癌細(xì)胞增殖的影響。方法:運(yùn)用分子克隆及基因重組技術(shù)構(gòu)建Trop-2 CAR;采用Western blot檢測Trop-2 CAR在293T細(xì)胞中的表達(dá);CCK-8法檢測Trop-2 CAR-T細(xì)胞對卵巢癌細(xì)胞增殖的影響;ELISA檢測細(xì)胞因子分泌的變化。結(jié)果:酶切鑒定及測序分析結(jié)果表明,Trop-2 CAR各基因片段連接正確;Western blot檢測結(jié)果顯示,該質(zhì)粒能夠在293T細(xì)胞中有效表達(dá);CCK-8結(jié)果顯示,制備的Trop-2 CAR-T細(xì)胞在體外能明顯抑制表達(dá)Trop-2的卵巢癌細(xì)胞的增殖(P0.05);ELISA檢測結(jié)果表明Trop-2 CAR-T細(xì)胞與表達(dá)Trop-2的卵巢癌細(xì)胞共培養(yǎng)后,干擾素(interferon-γ,IFN-γ)、白介素(interleukin-2,IL-2)細(xì)胞因子分泌增加(P0.01)。結(jié)論:該研究成功制備了Trop-2 CAR-T細(xì)胞,可有效抑制Trop-2表達(dá)陽性的卵巢癌細(xì)胞的增殖。
[Abstract]:Objective: to prepare the chimeric antigen receptor T cells (chimeric antigen receptor T cell) of human trophoblast cell surface antigen 2 (human trophoblast cell surface antigen 2, Trop-2), and to observe the effect of chimeric antigen receptor T cell on the proliferation of ovarian cancer cells in vitro. Western blot was used to detect the expression of Trop-2 CAR in 293T cells; CCK-8 method was used to detect the effect of Trop-2 CAR-T cells on the proliferation of ovarian cancer cells; ELISA detected the changes of cytokine secretion by ELISA. Results: the results of enzyme digestion and sequencing analysis showed that Trop-2 CAR gene fragments were connected correctly; Western detection results showed that the plasmid could be in The effective expression of 293T cells; CCK-8 results showed that the Trop-2 CAR-T cells could inhibit the proliferation of Trop-2 cells in vitro (P0.05) in vitro (P0.05); ELISA detection results showed that Trop-2 CAR-T cells were co cultured with ovarian cancer cells expressing Trop-2, interferon (interferon-, IFN- gamma), and interleukins Conclusion: This study successfully prepared Trop-2 CAR-T cells, which can effectively inhibit the proliferation of Trop-2 positive ovarian cancer cells.
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)系;南京醫(yī)科大學(xué)國家衛(wèi)計(jì)委抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院耳鼻喉科;安徽未名細(xì)胞治療有限公司;南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京婦幼保健院婦產(chǎn)科;南京軍區(qū)軍事醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81602119) 江蘇省科學(xué)技術(shù)廳重點(diǎn)研發(fā)專項(xiàng)基金(BE2016799)
【分類號】：R737.31

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