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miR-3619-5p對乳腺癌細(xì)胞MCF-7和T47D增殖、凋亡的影響及分子機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2018-06-22 10:38

  本文選題:乳腺腫瘤 + miR--p。 參考:《臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志》2017年11期


【摘要】:目的探討miR-3619-5p轉(zhuǎn)染對乳腺癌細(xì)胞系MCF-7和T47D增殖和凋亡的影響及可能的分子機(jī)制。方法乳腺癌培養(yǎng)至對數(shù)生長期,根據(jù)對其不同處理分為2組:對照組(轉(zhuǎn)染ds Control)和實(shí)驗(yàn)組(轉(zhuǎn)染miR-3619-5p)。5-乙炔基-2'脫氧尿嘧啶核苷(Ed U)增殖實(shí)驗(yàn)和集落形成實(shí)驗(yàn)檢測乳腺癌細(xì)胞增殖能力變化;流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,FCM)檢測乳腺癌細(xì)胞周期分布和凋亡情況;實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測p21、CDK6和Cyclin D1 mRNA的表達(dá);Western blot法檢測p21、CDK6和Cyclin D1蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果與dsControl組相比,轉(zhuǎn)染miR-3619-5p的乳腺癌細(xì)胞增殖能力顯著降低(P0.05)。轉(zhuǎn)染miR-3619-5p后,位于G_0/G_1期的細(xì)胞比例明顯升高,位于S期和G_2/M期的細(xì)胞比例明顯降低,細(xì)胞凋亡率顯著上升。與ds Control組相比,轉(zhuǎn)染miR-3619-5p后兩種細(xì)胞系中p21 mRNA均明顯上調(diào)(P0.01),而CDK6和Cyclin D1 mRNA的表達(dá)均明顯下調(diào)(P0.01)。Western blot檢測結(jié)果與qRT-PCR結(jié)果一致。結(jié)論 miR-3619-5p可顯著抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖能力,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,其分子機(jī)制可能是通過激活乳腺癌細(xì)胞中抑癌基因p21的表達(dá)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of miR-3619-5p transfection on the proliferation and apoptosis of breast cancer cell line MCF-7 and T47D and its possible molecular mechanism. Methods Breast cancer was cultured to logarithmic growth stage. According to the different treatments, the breast cancer cells were divided into two groups: control group (transfected DS Control) and experimental group (transfected miR-3619-5p) .5-acetyl-2'deoxyuridine (Ed U) proliferation test and colony forming assay to detect the proliferation ability of breast cancer cells. Flow cytometry (flow) was used to detect the cell cycle distribution and apoptosis, and the expression of p21 CDK6 and Cyclin D1 mRNA was detected by real-time quantitative polymerase chain reaction (qRT-PCR). Western blot was used to detect the expression of p21 CDK6 and Cyclin D1 protein. Results compared with dsControl group, the proliferation ability of breast cancer cells transfected with miR-3619-5p was significantly decreased (P0.05). After transfection of miR-3619-5p, the percentage of cells in G0 / GHS 1 phase was significantly increased, while that in S phase and G2 / M phase was significantly decreased, and the apoptosis rate was significantly increased. Compared with DS Control group, p21 mRNA was up-regulated (P0.01) in the two cell lines transfected with miR-3619-5p, while the expression of CDK6 and Cyclin D1 mRNA was significantly down-regulated (P0.01). The results of Western blot were consistent with those of qRT-PCR. Conclusion miR-3619-5p can significantly inhibit the proliferation of breast cancer cells and promote cell apoptosis. The molecular mechanism of miR-3619-5p may be by activating the expression of tumor suppressor gene p21 in breast cancer cells.
【作者單位】: 河南大學(xué)附屬鄭州市婦幼保健院病理科;
【分類號】:R737.9

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本文編號:2052567

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