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拉曼光譜技術(shù)在腫瘤鑒別與異物定性中的應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-21 03:08

  本文選題:拉曼光譜 + CTC。 參考:《濟(jì)南大學(xué)》2016年碩士論文


【摘要】:目的結(jié)合拉曼光譜技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用情況,本實(shí)驗(yàn)擬應(yīng)用拉曼光譜技術(shù)鑒別課題組迪夫染色的循環(huán)腫瘤細(xì)胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)與外周血淋巴細(xì)胞;鑒別瑞氏-姬姆薩染色的腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞;鑒別肝癌細(xì)胞系與外周血淋巴細(xì)胞;鑒別肝癌癌組織與合并肝硬化肝組織以及鑒定膈肌異物。方法本文運(yùn)用拉曼光譜技術(shù)在細(xì)胞層面分析了迪夫染液樣本中CTCs、CTCs旁淋巴細(xì)胞及樣本中濾膜、染料、玻片等的拉曼光譜;瑞氏-姬姆薩染色樣本中的腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞的拉曼光譜;肝癌細(xì)胞系與正常人外周血白細(xì)胞的拉曼光譜。在組織層面分析了30例肝癌手術(shù)患者的肝癌癌組織與合并肝硬化肝組織的拉曼光譜。在臨床案例中分析了腫物中異物的拉曼光譜。結(jié)果通過(guò)分析各樣本拉曼光譜,結(jié)果顯示:1)在細(xì)胞層面,532 nm波長(zhǎng)激光下經(jīng)迪夫染色的CTCs、淋巴細(xì)胞及染料的拉曼光譜在209~213 cm-1、273~278 cm-1、336~338 cm-1等峰位處都有類(lèi)似特征峰;785 nm波長(zhǎng)激光下經(jīng)迪夫染色的腫瘤細(xì)胞、濾膜與玻片的拉曼光譜在1200~2000 cm-1區(qū)域都存在高聳的熒光峰,在1200 cm-1以前區(qū)域,631~632cm-1、701~702 cm-1、883~887 cm-1、1106~1107 cm-1處鼻咽癌細(xì)胞與濾膜有拉曼特征峰,而空白玻片呈光滑曲線(xiàn)。在532nm波長(zhǎng)激光下經(jīng)瑞氏-姬姆薩染色的腫瘤細(xì)胞與淋巴細(xì)胞在208~215 cm-1、278~285 cm-1、336~341 cm-1等峰位附近都有類(lèi)似特征峰而染料由于染色較淺除在峰位640~643 cm-1、708~713 cm-1、1500~1505 cm-1、1620~1624cm-1處拉曼特征峰峰強(qiáng)較高外,其余峰強(qiáng)均較低。白細(xì)胞與細(xì)胞周?chē)椎睦庾V曲線(xiàn)平緩,沒(méi)有顯著的特征峰;而肝癌細(xì)胞在峰位1003 cm-1、1449 cm-1、1666 cm-1附近可見(jiàn)顯著特征峰。2)組織層面,從肝癌癌組織與合并肝硬化肝組織的拉曼光譜對(duì)比圖可以看出:在峰位1004 cm-1、1155 cm-1、1510 cm-1附近合并肝硬化肝組織的峰強(qiáng)高于肝癌癌組織;在峰位1642 cm-1附近合并肝硬化肝組織的峰強(qiáng)低于肝癌癌組織;在1377 cm-1和1586 cm-1附近肝癌癌組織有顯著特征峰而合并肝硬化的肝組織沒(méi)有。3)在臨床案例中,從膈肌異物、中人氟安及氟尿嘧啶注射液的拉曼光譜可以看出在412cm-1、687 cm-1、1344 cm-1、1538 cm-1、2876 cm-1等處都有明顯特征峰且高度大致相同。結(jié)論通過(guò)拉曼光譜技術(shù)分析迪夫染色樣本與瑞氏-姬姆薩染色樣本的拉曼光譜可見(jiàn)通過(guò)染色后的樣本由于染料等因素的干擾用拉曼光譜技術(shù)是無(wú)法鑒別的,通過(guò)對(duì)未染色樣本肝癌細(xì)胞系與人外周血淋巴細(xì)胞拉曼光譜的分析可見(jiàn)運(yùn)用拉曼光譜技術(shù)鑒別腫瘤細(xì)胞與淋巴細(xì)胞是可行的。通過(guò)對(duì)30例肝癌癌組織與合并肝硬化肝組織拉曼光譜的對(duì)比可以看出,運(yùn)用拉曼光譜技術(shù)鑒別肝癌癌組織與合并肝硬化的肝組織是可行的。通過(guò)拉曼光譜對(duì)臨床工作中異物性質(zhì)的確定,為我們臨床工作對(duì)異物的鑒定提供了一種新手段。
[Abstract]:Objective to identify circulating tumor cells (CTCss) and peripheral blood lymphocytes (PBL) from circulating tumor cells (CTCss) by using Raman spectroscopy in biomedicine. The tumor cell lines and peripheral blood lymphocytes were differentiated between tumor cells and normal cells stained by Ricker-Giemsa staining, liver tissues and liver tissues with liver cirrhosis and diaphragmatic foreign bodies were identified by distinguishing liver cancer cell lines from peripheral blood lymphocytes. Methods Raman spectroscopy was used to analyze the Raman spectra of the lymphocytes in CTCs and the filter membrane, dyes and glass slides in the samples of Duff dye solution at the cell level. The Raman spectra of tumor cells and normal cells in the samples stained by Rish-Jimsa, and the Raman spectra of leukocytes in peripheral blood of hepatoma cells and normal people. The Raman spectra of liver cancer tissues and liver tissues associated with liver cirrhosis in 30 patients undergoing liver cancer surgery were analyzed at the tissue level. Raman spectra of foreign bodies in tumor were analyzed in clinical cases. Results by analyzing the Raman spectra of each sample, The results showed that the Raman spectra of lymphocytes and dyes at the wavelength of 532nm at cell level had a similar characteristic peak at the peak position of 209 ~ 213 cm-1273~278 cm-1336~338 cm-1. The Raman spectra of the filter membrane and the glass plate have high fluorescence peaks in the region of 1 200 ~ 2 000 cm-1. In the region before 1200 cm-1, there is a Raman characteristic peak between nasopharyngeal carcinoma cells and the filter membrane in the region of 631C ~ 632 cm ~ (-1) ~ (-1) ~ 702 cm-1883~887 ~ (-1) C ~ (-1) ~ (-1) ~ 1106C ~ (-1) cm-1, while the blank glass sheet shows a smooth curve. Under 532nm wavelength laser, the tumor cells and lymphocytes stained by Rayleigh Giemsa have similar characteristic peaks near the isotherm position of 208 ~ 215 cm-1278~285 cm-1336~341 cm-1. The intensity of Raman characteristic peaks is higher than that at 640643 cm-1708~713 cm ~ (-1) 1505 cm ~ (-1) and 1620 ~ (-1) cm ~ (-1) due to the dye staining, but the intensity of Raman peaks at 640643 cm-1708~713 / cm ~ (-1) and 1620 ~ (-1) cm ~ (-1) is higher than that at 640 ~ 643 cm-1708~713 / cm ~ (-1). The other peaks were lower. The Raman spectra of white blood cells and their surrounding substrates were smooth, and there was no significant characteristic peak, while that of hepatoma cells was 1003 cm ~ (-1) ~ 1449 cm ~ (-1) ~ 1666 cm-1. From the Raman spectra of liver cancer tissue and liver tissue with liver cirrhosis, it can be seen that the peak intensity of liver tissue with liver cirrhosis is higher than that of liver cancer tissue at the peak of 1004 cm ~ (-1) ~ 1155 cm ~ (-1) ~ 1510 cm-1. The peak intensity of liver tissue associated with liver cirrhosis was lower than that of liver cancer tissue in the vicinity of peak position 1642 cm-1, and that of liver cancer tissue with liver cirrhosis in the vicinity of 1377 cm-1 and 1586 cm-1 was significantly higher than that of liver tissue with liver cirrhosis. The Raman spectra of human fluorine and fluorouracil injection show that there are obvious characteristic peaks at 412cm-1687 cm-1 + 1344cm-1n 1538cm-1n 2876 cm-1 and the height is about the same. Conclusion the Raman spectra of the dyed samples and the samples stained by Reich Giemsa can not be distinguished by Raman spectroscopy because of the interference of dye and other factors. The Raman spectra of unstained hepatoma cell lines and human peripheral blood lymphocytes showed that it was feasible to identify tumor cells and lymphocytes by Raman spectroscopy. By comparing the Raman spectra of 30 cases of liver cancer with liver cirrhosis, we can see that it is feasible to use Raman spectroscopy to distinguish liver tissues from liver cancer and liver cirrhosis. The determination of the properties of foreign bodies in clinical work by Raman spectroscopy provides a new method for the identification of foreign bodies in clinical work.
【學(xué)位授予單位】:濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R735.7

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本文編號(hào):2046921

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