本文選題：AKT + 慢病毒載體�。� 參考：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2017年10期

【摘要】：目的研究敲低AKT1基因?qū)β闶笪赴┮浦擦霭⒚顾孛舾行缘挠绊憽７椒?gòu)建AKT1基因RNA干擾(RNAi)的慢病毒載體p GCSIL-sh AKT1-GFP,轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,以p GCSIL-sh CON-GFP為空載體組。獲得慢病毒顆粒后,感染胃癌BGC-823細(xì)胞,采用Western blot法檢測(cè)感染后BGC-823細(xì)胞中AKT1蛋白水平。皮下注射慢病毒感染的BGC-823細(xì)胞構(gòu)建裸鼠胃癌移植瘤模型,使用阿霉素(DOX)進(jìn)行處理,觀察處理后移植瘤體積大小并繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線,采用HE染色觀察移植瘤組織病變情況,采用組織原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)檢測(cè)移植瘤組織中細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果成功構(gòu)建AKT1基因RNAi的慢病毒載體并成功感染胃癌BGC-823細(xì)胞,感染后胃癌BGC-823細(xì)胞中AKT1蛋白水平明顯降低。敲低AKT1的BGC-823細(xì)胞裸鼠移植后,移植瘤生長(zhǎng)減慢、移植瘤細(xì)胞凋亡增加,并可增強(qiáng)DOX對(duì)移植瘤生長(zhǎng)的抑制作用。結(jié)論敲低AKT1基因可增強(qiáng)BGC-823細(xì)胞裸鼠移植瘤對(duì)DOX的敏感性。
[Abstract]:Objective to study the effect of knock-down AKT1 gene on adriamycin sensitivity in nude mice with gastric cancer xenografts. Methods the lentivirus vector pGCSIL-sh AKT1-GFP1 was constructed and transfected into HEK293T cells. The vector pGCSIL-sh CON-GFP was used as empty vector. BGC-823 cells were infected with lentivirus particles, and the AKT1 protein levels in BGC-823 cells were detected by Western blot assay. BGC-823 cells infected with lentivirus were injected subcutaneously into nude mice gastric cancer transplanted tumor model, treated with doxorubicin (DOX), the volume of transplanted tumor was observed and the tumor growth curve was plotted, and the pathological changes of transplanted tumor were observed by HE staining. Tunel was used to detect apoptosis in transplanted tumor tissue. Results the lentivirus vector of AKT1 gene RNAi was successfully constructed and successfully infected with gastric cancer BGC-823 cells. The level of AKT1 protein in BGC-823 cells decreased significantly after infection. After transplanting BGC-823 cells with low AKT1, the growth of xenografts slowed down, the apoptosis of transplanted tumor cells increased, and the inhibitory effect of DOX on the growth of xenografts was enhanced. Conclusion knock down AKT1 gene can enhance the sensitivity of BGC-823 xenografts to DOX.
【作者單位】： 武漢大學(xué)人民醫(yī)院消化內(nèi)科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81401959)
【分類號(hào)】：R735.2

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本文編號(hào)：2044301