本文選題：乳腺癌 + 細胞程序性死亡因子配體基因��； 參考：《生物技術(shù)通報》2017年09期

【摘要】：構(gòu)建含細胞程序性死亡因子配體1(PD-L1)基因的慢病毒載體三質(zhì)粒體系,并檢測其在乳腺癌MDA-MB-231細胞中的表達情況。p MAGic 7.1慢病毒表達載體與質(zhì)�！�8.91和p VSVG用聚乙烯亞胺(PEI)共轉(zhuǎn)293T包裝病毒,感染并篩選獲得MDA-MB-231穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系,檢測PD-L1表達情況。(1)MDA-MB-231在3種乳腺癌細胞中PD-L1表達量最高;(2)三質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細胞48 h后熒光強度增強,達到90%以上;用病毒感染MDA-MB-231細胞,48 h獲得20%左右熒光強度;(3)經(jīng)篩選的MDA-MB-231穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系在m RNA水平和蛋白水平低表達PD-L1,其中由p MAGic-sh1包裝的病毒干擾能力最強;(4)分別加入病毒后,干擾組細胞增殖能力下降,p MAGic-sh1干擾組細胞在加入病毒7 d后生長速度約為陰性對照的64.77%;(5)混合淋巴實驗顯示,sh-1干擾組的腫瘤抑制率為35.8%,是正常組的3.06倍,且干擾組的T淋巴細胞活性顯著增強。成功通過PEI轉(zhuǎn)染試劑建立了三質(zhì)粒慢病毒包裝體系,該體系獲得的慢病毒可有效干擾乳腺癌MDA-MB-231細胞中PD-L1的表達量,所得的干擾細胞株細胞增殖能力下降,可增強T細胞增殖活性及腫瘤細胞殺傷活性。
[Abstract]:To construct a three-plasmid system of lentivirus vector containing PLDF ligands 1 (PD-L1) gene. The expression of pMAGIC7.1 lentivirus in MDA-MB-231 cells was detected. The vector was co-transfected with vector 8.91 and pVSVG to transfer 293T packaging virus, and MDA-MB-231 stable transformation cell line was obtained. The expression of PD-L1 MDA-MB-231 was detected in three kinds of breast cancer cells. The fluorescence intensity of 293T cells was increased to more than 90% after 48 h transfection with the three plasmids. MDA-MB-231 cells infected with MDA-MB-231 virus for 48 h, about 20% fluorescence intensity cells were obtained. The screened MDA-MB-231 cell line was low expressed PD-L1 at the level of mRNA and protein, in which pMAGic-sh1 package had the strongest ability to interfere with the virus. The mixed lymphoid test showed that the tumor inhibition rate of the sh-1 interference group was 35.8and 3.06 times that of the normal group. The T lymphocyte activity in the interference group was significantly increased. Three plasmids of lentivirus packaging system were successfully established by PEI transfection reagent. The obtained lentivirus could effectively interfere with the expression of PD-L1 in breast cancer MDA-MB-231 cells, and the cell proliferation ability of the interference cell line was decreased. It can enhance the proliferation activity of T cells and the cytotoxicity of tumor cells.
【作者單位】： 湖南大學(xué)生物學(xué)院;湖南省人民醫(yī)院社會醫(yī)學(xué)部;
【基金】：湖南大學(xué)“985工程”專項資金資助項目(531109020011)
【分類號】：R737.9

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;鈣粘素E水平低提示乳腺癌細胞轉(zhuǎn)移[J];中國腫瘤;2000年08期

2 黃嘯原;用“印度閱兵”形容乳腺癌合適嗎?[J];診斷病理學(xué)雜志;2001年02期

3 張嘉慶,王殊,喬新民;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠景[J];中華外科雜志;2002年03期

4 薛志勇;食物與乳腺癌[J];山東食品科技;2002年04期

5 王旬果,王建軍,鄭國華;乳腺癌相關(guān)標志物的研究進展[J];山東醫(yī)藥;2002年33期

6 陸尚聞;;男人也患乳腺癌[J];環(huán)境;2003年12期

7 ;新技術(shù)清晰拍攝早期乳腺癌細胞[J];上海生物醫(yī)學(xué)工程;2005年04期

8 田富國;郭向陽;張華一;;乳腺癌診治研究新進展[J];腫瘤研究與臨床;2005年S1期

9 馬濤,谷俊朝;血管內(nèi)皮生長因子與乳腺癌的臨床研究進展[J];國外醫(yī)學(xué)(外科學(xué)分冊);2005年01期

10 郭慶良,谷俊朝;乳腺癌和瘦素相關(guān)性研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;2005年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 于永利;;抗乳腺癌免疫治療融合蛋白[A];中國免疫學(xué)會第四屆學(xué)術(shù)大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

2 龐朋沙;伍會健;;乳腺癌治療靶標的研究進展[A];北方遺傳資源的保護與利用研討會論文匯編[C];2010年

3 陸勁松;邵志敏;吳炅;韓企夏;沈鎮(zhèn)宙;;新型維甲酸抑制乳腺癌細胞的生長及誘導(dǎo)凋亡的機制研究[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會論文集[C];2000年

4 劉愛國;胡冰;;乳腺癌臨床治療進展[A];安徽省抗癌協(xié)會第四次代表大會暨乳腺癌、肺癌專業(yè)委員會成立會議、安徽省腫瘤防治進展學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2001年

5 張嘉慶;王殊;喬新民;;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠景[A];第一屆全國中西醫(yī)結(jié)合乳腺疾病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2002年

6 劉清俊;;乳腺癌綜合治療的新進展[A];山西省抗癌協(xié)會第六屆腫瘤學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2003年

7 邵志敏;;21世紀乳腺癌治療的展望[A];第三屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會教育論文集[C];2004年

8 陳松旺;張明;;乳腺癌治療的回顧與展望[A];西部地區(qū)腫瘤學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

9 白霞;傅建新;丁凱陽;王兆鉞;阮長耿;;組織因子途徑抑制物-2在乳腺癌細胞中的表達研究[A];第10屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要匯編[C];2005年

10 劉俊;李繼斌;汪洋;;吲哚-3-甲醇抗雌激素效應(yīng)及對乳腺癌的預(yù)防[A];食物功效成分與健康——達能營養(yǎng)中心第九次學(xué)術(shù)年會會議論文集[C];2006年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 記者 鄭曉春;乳腺癌細胞擴散基因被找到[N];科技日報;2007年

2 辛君;乳腺癌擴散基因“浮出水面”[N];大眾衛(wèi)生報;2009年

3 記者 毛黎;美發(fā)現(xiàn)有效抑制乳腺癌細胞生長的分子[N];科技日報;2010年

4 記者 吳春燕　通訊員 王麗霞;乳腺癌治療將有新途徑[N];光明日報;2011年

5 王樂　沈基飛;我科學(xué)家發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致乳腺癌耐藥的新標志物[N];科技日報;2011年

6 劉霞;一種天然分子能阻止乳腺癌惡化[N];科技日報;2011年

7 通訊員 王樂　沈基飛;乳腺癌耐藥新標志物被發(fā)現(xiàn)[N];光明日報;2011年

8 伊遙;乳腺癌藥新舊交替[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2012年

9 記者 鄭曉春;以發(fā)現(xiàn)可促使乳腺癌細胞擴散的蛋白[N];科技日報;2007年

10 李國軍;三地腫瘤專家共商乳腺癌治療良策[N];中國醫(yī)藥報;2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李凱;ID(inhibitor of DNA binding)家族蛋白調(diào)控乳腺細胞的分化并影響乳腺癌的預(yù)后[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 江一舟;乳腺癌新輔助化療前后基因變異檢測及其功能論證[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 馬邵;酪氨酸去磷酸化增強表皮生長因子受體在乳腺癌治療中靶向性的研究[D];山東大學(xué);2015年

4 李麗麗;分泌蛋白SHON調(diào)控乳腺癌細胞EMT的分子機制研究[D];東北師范大學(xué);2015年

5 劉英;叉頭蛋白FOXK2調(diào)控雌激素受體ERα的機理[D];大連理工大學(xué);2015年

6 姜擴;單鏈抗體介導(dǎo)的CXCR4 siRNA靶向抑制HER2~+乳腺癌生長和轉(zhuǎn)移的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

7 徐玉金;Foxp3通過下調(diào)CD44表達抑制乳腺癌轉(zhuǎn)移機制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

8 曾凡才;Nodal及其受體ALK7和ALK4在乳腺癌中的表達功能和臨床意義[D];電子科技大學(xué);2014年

9 裴靜;ESR基因多態(tài)性與乳腺癌的關(guān)聯(lián)性研究及Meta分析[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

10 何浪;基于基因表達譜的乳腺癌外周血與腫瘤局部免疫微環(huán)境關(guān)聯(lián)性研究[D];電子科技大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 杜文英;乳腺癌分子亞型的臨床與病理特點[D];鄭州大學(xué);2011年

2 賈曉菲;彩色多普勒超聲與乳腺癌病理及免疫組化指標的相關(guān)性研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

3 單系金;Mfn2磷酸化修飾對其調(diào)控乳腺癌細胞增殖功能的重要性的研究[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

4 徐晶;缺氧對乳腺癌細胞miR-210表達及侵襲能力的影響[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

5 李麗;Mfn2對乳腺癌細胞MCF-7侵襲遷移能力的影響及機制探究[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

6 張碩穩(wěn);MTDH、IκB、NF-κB P65在乳腺癌組織中的表達及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

7 嚴文君;CBX7和EZH2在乳腺癌中的表達及其臨床意義[D];鄭州大學(xué);2015年

8 張鵬;乙酰肝素酶mRNA在乳腺癌中的表達及其與乳腺癌病理特征的關(guān)系[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

9 鄭璐;多基因甲基化水平調(diào)控的乳腺癌MCF-7對他莫昔芬敏感性探究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

10 王旭;YB-1與乳腺癌關(guān)系的Meta分析[D];蘇州大學(xué);2015年

，

本文編號：2039554