本文選題：KCa.通道抑制劑 + TRAM-��； 參考：《中國實驗血液學(xué)雜志》2017年01期

【摘要】：目的:探討KCa3.1通道抑制劑TRAM-34對白血病細胞株HL-60細胞增殖及侵襲的影響。方法:取對數(shù)生長期HL-60細胞,給予實驗組分別加入終濃度25、50、75、100 nmol/L TRAM-34的培養(yǎng)液,給予對照組加入含10%胎牛血清RPM11640培養(yǎng)液,同步培養(yǎng)24、48和72 h后加入MTT溶液以檢測TRAM-34對HL-60細胞的增殖抑制率;在TRAM-34處理后的每個濃度收集細胞1×10~6個,采用膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素(Annexin VFITC)/碘化丙啶(PI)雙染或PI單染流式細胞術(shù)分別檢測TRAM-34處理后的細胞凋亡率和細胞周期時相分布情況,采用Transwell檢測TRAM-34各濃度24、48 h處理后的穿膜細胞數(shù),采用實時定量PCR檢測TRAM-34對CDK6、P53及MMP-2 mRNA水平的影響。結(jié)果:與對照組相比(0 nmol/L),除低濃度(25 nmol/L)TRAM-34處理24 h對HL-60細胞增殖無影響外,其余濃度和作用時間的增殖抑制率、凋亡率、G_0/G_1期細胞比例及p53 mRNA水平均升高,S期細胞比例、穿膜細胞數(shù)及CDK6、MMP-2 mRNA水平均降低,而且以上差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。TRAM-34對HL-60以上指標(biāo)的作用效果隨濃度的升高和作用時間的延長而增強,各濃度間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:TRAM-34可抑制HL-60細胞的增殖及侵襲能力,同時可誘導(dǎo)細胞凋亡及G0/G1期阻滯,且TRAM-34作用的時間和濃度均對HL-60細胞惡性行為有影響。
[Abstract]:Objective: To investigate the effect of KCa3.1 channel inhibitor TRAM-34 on the proliferation and invasion of leukemia cell line HL-60. Methods: the logarithmic growth period HL-60 cells were taken, and the experimental group was added to the final concentration of 25,50,75100 nmol/L TRAM-34, and the control group was added with the 10% fetal bovine serum RPM11640 culture solution, and the synchronous culture of 24,48 and 72 h was added. The proliferation inhibition rate of TRAM-34 to HL-60 cells was detected by MTT solution; 1 x 10~6 cells were collected at each concentration after TRAM-34 treatment. The apoptosis rate and phase distribution of cell cycle were detected by annexin V- isothiocyanate (Annexin VFITC) / PI (PI) double dye or PI single dye flow cytometry. The effects of TRAM-34 on the level of CDK6, P53 and MMP-2 mRNA were detected by real-time quantitative PCR, and the effects of TRAM-34 on the level of CDK6, P53 and MMP-2 mRNA were detected by Transwell. Results: compared with the control group (0 nmol/L), the proliferation and inhibition of the remaining concentration and time were compared with the control group (0 nmol/L) except the low concentration (25 nmol/L). The rate of production, the rate of apoptosis, the proportion of G_0/G_1 cells and the level of p53 mRNA were all increased, the proportion of S cells, the number of membrane cells and the level of CDK6 and MMP-2 mRNA were all decreased, and the above differences were statistically significant (P0.05) the effect of.TRAM-34 on the index of HL-60 increased with the increase of concentration and the prolongation of action time. Statistical significance (P0.05). Conclusion: TRAM-34 can inhibit the proliferation and invasion of HL-60 cells, and induce apoptosis and G0/G1 phase arrest, and the time and concentration of TRAM-34 effect on the malignant behavior of HL-60 cells.
【作者單位】： 四川省德陽市人民醫(yī)院輸血科;四川大學(xué)華西醫(yī)院實驗醫(yī)學(xué)科;
【分類號】：R733.7

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本文編號：2038129