發(fā)布時間：2018-06-16 23:50

  本文選題：Smad + MCF-細胞　； 參考：《吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2017年05期

【摘要】：目的:研究降低Smad4表達對乳腺癌MCF-7細胞增殖和凋亡的影響,并探討其可能的作用機制。方法:體外培養(yǎng)人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231細胞,采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測MCF-7細胞和MDA-MB-231細胞中Smad4 mRNA表達水平;Smad4-shRNA與Scramble-shRNA質(zhì)粒分別穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Smad4高表達MCF-7細胞,實驗分為未轉(zhuǎn)染MCF-7細胞組(正常對照組),采用Smad4基因沉默組和Scramble組(陰性對照組);采用CCK-8法檢測各組細胞增殖能力,流式細胞術(shù)檢測各組細胞凋亡率,實時熒光定量PCR(Real-time PCR)法檢測增殖相關(guān)基因CDKN1A、CDK1和CDK2以及凋亡相關(guān)基因Suvivin、bcl-2、caspase 3和caspase 9mRNA表達水平。結(jié)果:各組細胞增殖能力比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),各組細胞CDKN1A、CDK1和CDK2mRNA表達水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與正常對照組和陰性對照組比較,Smad4基因沉默組細胞凋亡率明顯降低(P0.01),Smad4基因沉默組細胞Suvivin和bcl-2mRNA表達水平明顯升高(P0.01),caspase 3和caspase 9mRNA表達水平明顯降低(P0.05)。結(jié)論:Smad4可以通過下調(diào)Suvivin和bcl-2的表達、上調(diào)caspase 3和caspase 9表達引起細胞凋亡。
[Abstract]:Aim: to study the effect of decreasing Smad4 expression on the proliferation and apoptosis of breast cancer MCF-7 cells and to explore its possible mechanism. Methods: human breast cancer MCF-7 and MDA-MB-231 cells were cultured in vitro. The expression levels of Smad4 mRNA in MCF-7 cells and MDA-MB-231 cells were detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Smad4-shRNA and Scramble-shRNA plasmids were stably transfected into MCF-7 cells. The experiment was divided into untransfected MCF-7 cells group (normal control group, Smad4 gene silencing group and scramble group (negative control group), CCK-8 method to detect cell proliferation ability, flow cytometry to detect cell apoptosis rate in each group, Smad4 gene silencing group and scramble group (negative control group). The expression of proliferation-related genes CDK1 and CDK2 and the apoptosis-related genes Suvivin-bcl-2 caspase-3 and caspase 9 mRNA were detected by real-time PCR. Results: there was no significant difference in cell proliferation ability among the three groups (P 0.05), but there was no significant difference in the expression of CDKN1A, CDK1 and CDK2 mRNA, and the apoptosis rate of Smad4 gene silencing group was significantly higher than that of normal control group and negative control group. The mRNA expression levels of Suvivin and bcl-2 in the P0.01Smad4 gene silencing group were significantly increased, and the expression levels of caspase-3 and caspase 9 in P0.01P0.01Smad4 gene silencing group were significantly decreased (P 0.05). Conclusion: Smad4 can up-regulate the expression of caspase _ 3 and caspase _ 9 and induce apoptosis by down-regulating the expression of Suvivin and bcl-2.
【作者單位】： 北華大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室;吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生物學(xué)教育部重點實驗室;北華大學(xué)化學(xué)與生物學(xué)院生命科學(xué)研究中心;吉林大學(xué)第一醫(yī)院病理科;
【基金】：國家科技部支撐計劃項目資助課題(2012BAI19B05)
【分類號】：R737.9

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本文編號：2028582