杜仲葉綠原酸提取物聯(lián)合西紅花苷對(duì)肝癌細(xì)胞膽固醇代謝的影響
本文選題:脂類代謝紊亂 + 肝癌細(xì)胞; 參考:《山東醫(yī)藥》2017年08期
【摘要】:目的觀察杜仲葉綠原酸提取物(CAEF)聯(lián)合西紅花苷對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep G2膽固醇代謝的影響,并探討其可能的作用機(jī)制。方法將人肝癌細(xì)胞Hep G2隨機(jī)分為空白對(duì)照組、油酸誘導(dǎo)組、辛伐他汀組、CAEF組、聯(lián)合用藥組。油酸誘導(dǎo)組、辛伐他汀組、CAEF組、聯(lián)合用藥組分別加入油酸誘導(dǎo)脂肪變性模型;同時(shí),辛伐他汀組加入10μmol/L的辛伐他汀10μL,CAEF組加入25 mg/L的CAEF 10μL,聯(lián)合用藥組加入含1μmol/L西紅花苷、30μmol/L綠原酸、10μmol/L京尼平苷、10μmol/L槲皮素的混合液10μL;空白對(duì)照組僅加入等體積培養(yǎng)基。取各組干預(yù)48 h細(xì)胞,行油紅O染色,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)中性脂滴含量。取干預(yù)24、48 h細(xì)胞上清液,檢測(cè)TC、TG含量。采用RT-PCR法檢測(cè)膽固醇代謝相關(guān)基因(ABCA1、SREBP2、CYP7A1、LXRα、AMPK2α、HMGCR)表達(dá),免疫細(xì)胞化學(xué)法和Western blotting法檢測(cè)HMGCR蛋白表達(dá)。結(jié)果辛伐他汀組、CAEF組、聯(lián)合用藥組干預(yù)48 h,細(xì)胞內(nèi)中性脂滴含量明顯降低,其作用強(qiáng)度依次為聯(lián)合用藥組CAEF組辛伐他汀組(P均0.05);與對(duì)照組比較,CAEF組、聯(lián)合用藥組干預(yù)24、48 h時(shí)細(xì)胞外液TC、TG含量明顯增加,細(xì)胞外液TC、TG含量依次為聯(lián)合用藥組CAEF組辛伐他汀組(P均0.05)。CAEF組、聯(lián)合用藥組ABCA1、CYP7A1、AMPK2αmRNA表達(dá)明顯升高,SREBP2、HMGCR mRNA表達(dá)明顯降低(P均0.05);此外,聯(lián)合用藥組LXRαmRNA表達(dá)明顯降低(P0.05)。辛伐他汀組、CAEF組、聯(lián)合用藥組HMGCR蛋白表達(dá)明顯降低,以聯(lián)合用藥組降低最明顯(P均0.05)。結(jié)論 CAEF聯(lián)合西紅花苷可協(xié)同抑制肝癌細(xì)胞脂質(zhì)積聚,其作用機(jī)制可能與調(diào)控肝癌細(xì)胞膽固醇代謝相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of Lv Yuan acid extract from Eucommia ulmoides leaves and crocetin on cholesterol metabolism in HepG2 cells and its possible mechanism. Methods HepG2 cells were randomly divided into control group, oleic acid induced group, simvastatin group and combined treatment group. Oleic acid induction group, simvastatin group, CAEF group, combined treatment group were added oleic acid induced fatty degeneration model, at the same time, In simvastatin group, 10 渭 mol / L simvastatin 10 渭 L CAEF was added to 25 mg / L CAEF10 渭 L, and 1 渭 mol / L Crocin 30 渭 mol / L Lv Yuan was added to 10 渭 mol / L quercetin mixture of 10 渭 mol / L geniposide 10 渭 mol / L and 10 渭 mol / L quercetin in blank control group. After 48 h of intervention, the cells were stained with oil red O and the content of neutral lipid droplets in the cells was detected. The supernatant of the cells was taken after 24 hours of intervention and the content of TCU TG was detected. The expression of LXR 偽 AMPK2 偽 and HMGCRs were detected by RT-PCR, and the expression of HMGCR protein was detected by immunocytochemistry and Western blotting. Results in the simvastatin group and CAEF group, the content of intracellular neutral lipid droplets was significantly decreased after 48 h intervention in the combined treatment group, and the effect intensity was in turn as follows: the simvastatin group in the combined treatment group (P 0.05), and the CAEF group in comparison with the control group. In the combined group, the content of TCN TG in extracellular fluid increased significantly at 24 h after intervention, and the content of TCN TG in extracellular fluid in CAEF group was 0.05%. In CAEF group, the expression of CYP7A1AMPK2 偽 mRNA in simvastatin group was significantly higher than that in CAEF group, and the expression of HMGCR mRNA in SREBP2HMGCR was significantly decreased (P 0.05) in combination group, and the expression of CYP7A1AMPK2 偽 mRNA in CAEF group was significantly lower than that in CAEF group (P < 0.05). The expression of LXR 偽 mRNA in combined treatment group was significantly decreased (P 0.05). The expression of HMGCR protein in simvastatin group and CAEF group was significantly lower than that in combined treatment group (P < 0.05). Conclusion CAEF combined with crocetin can synergistically inhibit lipid accumulation in hepatoma cells, and its mechanism may be related to the regulation of the expression of genes and proteins related to cholesterol metabolism in hepatoma cells.
【作者單位】: 遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū);廣東省第二人民醫(yī)院;貴州省人民醫(yī)院;
【基金】:貴州省中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)研究開(kāi)發(fā)專項(xiàng)項(xiàng)目(黔科合ZY字[2013]3018號(hào)) 珠海市優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)計(jì)劃
【分類號(hào)】:R735.7
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,本文編號(hào):2021781
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