本文選題：雄激素非依賴前列腺癌 + PLCε、Notch1/Hes1、AR�。� 參考：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：目的:探索雄激素非依賴前列腺癌組織、雄激素依賴前列腺癌組織、前列腺增生(BPH)組織中PLCε、Notch1/Hes1、AR的表達(dá)情況及其與臨床特征的相關(guān)分析。方法:收取10例雄激素非依賴前列腺癌組織,35例雄激素依賴前列腺癌,20例前列腺增生組織,采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)所有組織中PLCε、Notch1/Hes1、AR蛋白表達(dá)情況。比較各類組織間PLCε、Notch1、Hes1和AR蛋白表達(dá)情況及Notch1、Hes1、AR與PLCε相關(guān)分析。結(jié)果:免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:前列腺癌組織中的PLCε、Notch1、Hes1蛋白表達(dá)比BPH組織中高,兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;雄激素非依賴前列腺癌組織中PLCε、Notch1、Hes1蛋白略高于前列腺癌組織,兩者間比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AR蛋白在雄激素非依賴前列腺癌組織中表達(dá)高于BPH或雄激素依賴前列腺癌組織中,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。年齡大于60歲者PLCε、Notch1、Hes1、AR蛋白表達(dá)大于小于或等于60歲者,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;T2-T4期患者PLCε、Notch1、Hes1、AR表達(dá)高于TaT1期患者,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;Gleason≥7的患者PLCε、Notch1、Hes、AR表達(dá)高于病理分級(jí)Gleason7的患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在所有前列腺癌組織中,Notch1、Hes1、AR與PLCε成正相關(guān)(P㩳0.05)。結(jié)論:雄激素非依賴前列腺癌組織中PLCε、Notch1/Hes1、AR的表達(dá)明顯高于雄激素依賴前列腺癌、前列腺增生組織。目的:探索敲除PLCε基因?qū)C-3細(xì)胞株的生物學(xué)行為的影響。方法:采用CRISPR/Cas9方法構(gòu)建PLCε基因敲除PC-3細(xì)胞株,試驗(yàn)對(duì)象分為PC-3細(xì)胞株組、PLCε基因敲除PC-3細(xì)胞組;兩組細(xì)胞分別用RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)24h、48h、72h,培養(yǎng)條件為5%的CO2、37℃。分別檢測(cè)兩組細(xì)胞的PLCεm RNA,PLCε蛋白,檢測(cè)細(xì)胞增殖,細(xì)胞的凋亡率、細(xì)胞周期和遷徙、侵襲能力。結(jié)果:PLCε敲除PC-3組細(xì)胞株的較PC-3細(xì)胞組增殖明顯被抑制,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;PLCε基因敲除組凋亡率明顯較PC-3組細(xì)胞組高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,PLCε基因敲除組S期細(xì)胞的比例明顯要高于PC-3組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:PLCε基因敲除后,PC-3細(xì)胞增殖受到抑制、凋亡增加,細(xì)胞周期被阻滯于S期,細(xì)胞遷移、侵襲能力受到抑制。目的:探索二甲雙胍是否影響PC-3細(xì)胞生物學(xué)行為。方法:細(xì)胞培養(yǎng):分為PC-3細(xì)胞組、PLCε基因敲除PC-3細(xì)胞組,分別用RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng),并分別用0、10、20或40 m M濃度二甲雙胍干預(yù),培養(yǎng)24h、48h、72h。檢測(cè)細(xì)胞增殖,凋亡率和細(xì)胞周期,細(xì)胞遷移和侵襲能力。結(jié)果:隨二甲雙胍濃度的遞增PC-3組明顯呈二甲雙胍劑量依賴抑制細(xì)胞增殖,而PLCε基因敲除組隨二甲雙胍濃度的遞增細(xì)胞增殖無明顯變化,組間比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而20m M濃度狀態(tài)下,PC-3組細(xì)胞增殖隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸降低,而PLCε基因敲除組細(xì)胞增殖隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)無明顯變化,PLCε基因敲除組細(xì)胞增殖低于PC-3組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在二甲雙胍20m M濃度,培養(yǎng)48小時(shí),PC-3組細(xì)胞凋亡率增加,而PLCε基因敲除組細(xì)胞凋亡率無明顯變化,PLCε基因敲除組細(xì)胞凋亡率比PC-3組高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;二甲雙胍處理后PC-3組細(xì)胞被阻滯于S期比例增加,PLCε基因敲除組細(xì)胞細(xì)胞周期無明顯變化,PC-3組細(xì)胞被阻滯于S期比例低于PLCε基因敲除PC-3組細(xì)胞被阻滯于S期比例,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在二甲雙胍20m M濃度,培養(yǎng)48小時(shí),PC-3組細(xì)胞遷移、侵襲能力降低,但高于PLCε基因敲除組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:二甲雙胍能抑制PC-3細(xì)胞株的增殖,增加凋亡、阻滯細(xì)胞周期于S期,抑制PC-3細(xì)胞的遷移、侵襲能力。目的:探索二甲雙胍是否通過抑制PLCε下調(diào)Notch1/Hes1和AR。方法:細(xì)胞培養(yǎng)同第三部分,采用RT PCR檢測(cè)PLCε,Notch1、Hes1,AR,PCNA,Cyclin D1,c-fos m RNA;采用Western Blot方法檢測(cè)PLCε、Notch1、Hes1,AR,PCNA,Cyclin D1,c-fos蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:隨二甲雙胍濃度的遞增,PC-3組PLCε、Notch1、Hes1,AR、PCNA,Cyclin D1和c-fos的m RNA表達(dá)有逐漸降低;PLCε基因敲除PC-3組PLCεm RNA不表達(dá),隨二甲雙胍濃度的遞增,Notch1、Hes1,AR的m RNA、PCNA,Cyclin D1和c-fos表達(dá)無明顯變化,分別和PC-3組比較,均低于PC-3細(xì)胞組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而二甲雙胍20m M濃度時(shí),PC-3組隨時(shí)間的推移,PLCε、Notch1、Hes1,AR、PCNA,Cyclin D1和c-fos的m RNA表達(dá)逐漸降低,其表達(dá)高于PLCε敲除組,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,PLCε敲除組隨時(shí)間沒有變化。各蛋白表達(dá)與其分子表達(dá)情況一致。結(jié)論:二甲雙胍能抑制能夠抑制PLCε,下調(diào)Notch1/Hes1和AR。目的:探索二甲雙胍是否增強(qiáng)PC-3細(xì)胞對(duì)多西他賽的化療敏感性。方法:細(xì)胞培養(yǎng):將PC-3細(xì)胞株分對(duì)照組、二甲雙胍組(20m M)、多西他賽組(50ng/ml)、二甲雙胍聯(lián)合多西他賽組(二甲雙胍20m M,多西他賽50ng/ml),培養(yǎng)24h、48h、及72小時(shí)。Western Blot方法檢測(cè)多西他賽組PLCε、Notch1、Hes1、AR蛋白表達(dá)情況。檢測(cè)細(xì)胞增殖,凋亡率和細(xì)胞周期,檢測(cè)細(xì)胞遷移、侵襲能力。結(jié)果:Western blot結(jié)果顯示多西他賽50ng/ml,各個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn),PC-3細(xì)胞PLCε、Notch1、Hes1的蛋白表達(dá)變化不明顯,AR蛋白隨著時(shí)間推移表達(dá)降低。對(duì)照組的細(xì)胞增殖率最高,二甲雙胍組細(xì)胞增殖情況較對(duì)照組低、多西他賽組細(xì)胞增殖率情況較二甲雙胍組低、二甲雙胍聯(lián)合多西他賽組細(xì)胞增殖率情況較多西他賽組低,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各藥物處理組凋亡率均隨著時(shí)間延長(zhǎng)凋亡率增加,與對(duì)照組比較,二甲雙胍組細(xì)胞凋亡率情況較對(duì)照組高、多西他賽組細(xì)胞凋亡率較二甲雙胍組高、二甲雙胍聯(lián)合多西他賽組凋亡率較多西他賽組高,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。藥物處理組細(xì)胞遷移、侵襲能力低于對(duì)照組,多西他賽組細(xì)胞遷移、侵襲能力低于二甲雙胍組;二甲雙胍聯(lián)合多西他賽組細(xì)胞遷移、侵襲能力低于多西他賽組,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:二甲雙胍能增強(qiáng)多西他賽對(duì)PC-3細(xì)胞的化療敏感性。
[Abstract]:Objective : To investigate the expression of PLC 蔚 , Notch1 , Hes1 and AR in prostate cancer tissue and its correlation with clinical features . The results showed that the expression of PLC 蔚 , Notch1 , Hes1 and AR in prostate cancer tissue was higher than that in the patients with BPH or androgen dependent prostate cancer . The results showed that the proliferation of PC - 3 cells was inhibited and the apoptosis rate , cell cycle and invasion ability of PC - 3 cells were significantly higher than those of PC - 3 cells . 鏈夌粺璁″鎰忎箟.鑰，

本文編號(hào)：2018945