發(fā)布時(shí)間：2018-06-13 20:53

  本文選題：脂多糖 + Toll樣受體�。� 參考：《中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志》2017年24期

【摘要】：目的檢測(cè)Toll樣受體4(TLR4)在食管鱗癌(ESCC)組織、癌旁組織、ESCC細(xì)胞系表達(dá),脂多糖(LPS)在ESCC細(xì)胞系中對(duì)TLR4是否上調(diào)、以及對(duì)自噬、增殖、細(xì)胞周期等效應(yīng)的影響。方法選取50例ESCC組織標(biāo)本(ESCC組)和50例配對(duì)癌旁正常組織標(biāo)本(癌旁正常組),用免疫組化法檢測(cè)組織中TLR4表達(dá)特征和陽(yáng)性表達(dá)情況。在ESCC細(xì)胞系Eca-109和TE-1中,1μg·mL~(-1)LPS處理作為實(shí)驗(yàn)組,不加藥物刺激作為對(duì)照組,加入siRNA-TLR4作為si-TLR4組,加入siRNA-NC作為si-NC組,檢測(cè)LPS對(duì)TLR4表達(dá)的影響,LPS、TLR4對(duì)自噬相關(guān)蛋白LC-3、ATG5、ATG7表達(dá)的影響;進(jìn)一步用CCK8和流式細(xì)胞術(shù)分析siRNA干擾TLR4表達(dá)后對(duì)ESCC細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響。結(jié)果 TLR4在ESCC組和癌旁正常組的陽(yáng)性表達(dá)率分別為68.00%和36.00%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的TLR4蛋白相對(duì)表達(dá)量在Eca-109細(xì)胞中分別為(0.11±0.05)和(0.35±0.12),在TE-1細(xì)胞中分別為(0.07±0.02)和(0.41±0.10),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05)。LPS激活TLR4表達(dá)的同時(shí)能明顯上調(diào)ESCC細(xì)胞系自噬相關(guān)蛋白LC-3、ATG5、ATG7的表達(dá),用si-RNA敲降TLR4表達(dá)后,ESCC細(xì)胞系自噬相關(guān)蛋白LC-3、ATG5、ATG7的表達(dá)顯著下調(diào)。敲降TLR4表達(dá)引起ESCC細(xì)胞周期S期停滯,si-NC組和si-TLR4組第5天細(xì)胞生存率在Eca-109細(xì)胞中分別為(1.35±0.02)和(0.92±0.04),在TE-1細(xì)胞中分別為(1.35±0.02)和(0.87±0.04),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05)。結(jié)論 TLR4蛋白在ESCC組織過(guò)表達(dá),LPS激活TLR4通路促進(jìn)ESCC細(xì)胞自噬效應(yīng)、進(jìn)而促進(jìn)ESCC發(fā)生發(fā)展。
[Abstract]:Objective to detect the expression of Toll-like receptor 4 (TLR4) in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) and its adjacent tissues. Whether lipopolysaccharide (LPS4) upregulated TLR4 and its effects on autophagy, proliferation and cell cycle in ESCC cells. Methods 50 ESCC specimens and 50 matched normal tissues (paracancerous normal tissues) were selected to detect the expression of TLR4 and the expression of TLR4 by immunohistochemical method. In ESCC cell lines Eca-109 and TE-1, 1 渭 g mLLP-1 lipopolysaccharide was treated as experimental group, without drug stimulation as control group, siRNA-TLR4 as si-TLR4 group and siRNA-NC as si-NC group. The effects of LPS on the expression of TLR4 and the expression of ATG5ATG7 in macrophage associated protein LC-3ATLR4 were detected. The effects of siRNA interference TLR4 expression on the proliferation and cell cycle of ESCC cells were further analyzed by CCK8 and flow cytometry. Results the positive expression rates of TLR4 in ESCC group and adjacent normal group were 68.00% and 36.00%, respectively. The difference was statistically significant (P 0.01). The relative expression of TLR4 protein in Eca-109 cells was 0.11 鹵0.05) and 0.35 鹵0.12 in Eca-109 cells, and 0.07 鹵0.02 in TE-1 cells and 0.41 鹵0.10 in TE-1 cells, respectively. The difference was statistically significant (all P0.05. LPS activated TLR4 expression in ESCC cell lines was significantly up-regulated at the same time. Expression of terminal protein LC-3, ATG5, ATG7, The expression of ATG7 in ESCC cell line was significantly down-regulated after TLR4 expression was reduced by si-RNA knockout. The 5th day survival rate of Eca-109 cells was 1.35 鹵0.02 and 0.92 鹵0.04, respectively, and that of TE-1 cells was 1.35 鹵0.02 and 0.87 鹵0.04, respectively. Conclusion LPS-activated TLR4 pathway in ESCC promotes autophagy of ESCC cells and promotes the development of ESCC.
【作者單位】： 武漢大學(xué)人民醫(yī)院老年病科;華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院胸外科;
【基金】：湖北省自然科學(xué)基金面上基金資助項(xiàng)目(2014CKB503)
【分類號(hào)】：R735.1

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本文編號(hào)：2015379