本文選題：肝癌 + 誘騙受體3��； 參考：《首都醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：研究背景:肝細(xì)胞癌(HCC)是最常見的惡性腫瘤之一,是全球癌癥死亡的第三大原因。最新資料顯示,我國2015年肝癌發(fā)病人數(shù)約46.61萬,死亡人數(shù)約42.20萬。由于肝癌發(fā)病隱匿,診斷不及時(shí),許多患者在發(fā)現(xiàn)肝癌時(shí)已經(jīng)是中晚期,預(yù)后非常差,5年生存率不足5%。因此,研究肝癌的發(fā)病機(jī)制,尋找其新的診斷和治療靶點(diǎn),已經(jīng)成為提高肝癌預(yù)防和治療效果的當(dāng)務(wù)之急。運(yùn)用分子生物學(xué)手段抑制體內(nèi)腫瘤相關(guān)基因的表達(dá)以達(dá)到腫瘤基因治療的目的,是目前腫瘤治療的熱點(diǎn),其中,能引起腫瘤細(xì)胞的凋亡的相關(guān)基因又是人們關(guān)注的焦點(diǎn)。Fas/Fas L系統(tǒng)是體內(nèi)介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的重要途徑,在維持機(jī)體免疫自穩(wěn)及腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要作用。Fas L有兩種受體,Fas和Dc R3。Dc R3可以與Fas競爭性結(jié)合Fas L,從而抑制Fas L介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,繼而引起疾病的發(fā)生發(fā)展,其中就包括了腫瘤。有關(guān)文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)Fas L介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡與Dc R3的表達(dá)水平有直接關(guān)系,Dc R3減低了Fas L介導(dǎo)的細(xì)胞壞死。在肝癌中,相關(guān)研究并未見報(bào)道。研究目的:利用穩(wěn)定靶向敲低Dc R3表達(dá)的肝癌細(xì)胞系,通過體外、體內(nèi)兩方面實(shí)驗(yàn),觀察Fas L聯(lián)合沉默Dc R3表達(dá)在肝癌細(xì)胞系中的作用,明確Fas L對Hep G2細(xì)胞的周期、凋亡、生長、克隆增殖與侵襲能力的影響,觀察Fas L對Hep G2細(xì)胞MMP9、VEGF-C和VEGF-D的表達(dá)的影響。以期為肝癌腫瘤基因治療手段提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù),也為其他惡性腫瘤的防治提供經(jīng)驗(yàn)。研究結(jié)果:1.DcR3表達(dá)沉默后,加入FasL可導(dǎo)致肝癌細(xì)胞的凋亡增加,細(xì)胞周期改變,G0/G1期細(xì)胞增加,G2/M期細(xì)胞減少;2.Dc R3表達(dá)沉默后,加入Fas L后肝癌細(xì)胞的活力下降;3.下調(diào)Dc R3的表達(dá)后,加入Fas L后,肝癌細(xì)胞遷移、侵襲能力進(jìn)一步下降;4.經(jīng)Fas L處理后的肝癌細(xì)胞的MMP9、VEGF-C、VEGF-D的m RNA及蛋白表達(dá)水平明顯下降;5.Fas L可致小鼠皮下成瘤增長速度顯著減慢,瘤體相關(guān)轉(zhuǎn)移侵襲因子的表達(dá)亦有下降。研究結(jié)論:1.Fas L聯(lián)合Dc R3沉默可導(dǎo)致肝癌細(xì)胞凋亡增加。2.Fas L聯(lián)合Dc R3沉默可使肝癌細(xì)胞生長速度減慢,遷移和侵襲能力下降。3.Fas L聯(lián)合Dc R3沉默引起肝癌細(xì)胞中的MMP 9、VEGF-C、VEGF-D表達(dá)下降。4.Fas L聯(lián)合Dc R3沉默可以作為肝癌治療的一個(gè)新的研究方向和思路。
[Abstract]:Background: hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most common malignant tumors and the third leading cause of cancer death worldwide. According to the latest data, the incidence of liver cancer in China in 2015 was about 466100 and the death toll was about 422000. Due to the occult incidence of liver cancer, diagnosis is not timely, many patients found liver cancer has been in the middle and late stage, the prognosis is very poor, 5-year survival rate is less than 5. Therefore, it is urgent to study the pathogenesis of liver cancer and find new targets for diagnosis and treatment of liver cancer. Using molecular biological methods to inhibit the expression of tumor-related genes in vivo in order to achieve the purpose of tumor gene therapy is a hot spot in tumor therapy at present. The genes associated with apoptosis of tumor cells are also the focus of attention. Fas- / FAS / FAS L system is an important way to mediate apoptosis in vivo, which maintains immune homeostasis and tumorigenesis. FAS L has two receptors, FAS and DC R3.Dc R3, which can compete with Fas to bind to Fas L, thus inhibit the apoptosis mediated by Fas L, and then cause the occurrence and development of the disease, including tumor. It was found that apoptosis mediated by Fas L was directly related to the expression level of DC R3. DcR3 reduced the cell necrosis mediated by Fas L. In liver cancer, there are no reports of related studies. Objective: to observe the role of Fas L combined with silencing DC R3 expression in hepatocellular carcinoma cell lines with stable targeting low DC R3 expression in vitro and in vivo, and to clarify the cell cycle and apoptosis of Hep G2 cells induced by Fas L. The effects of Fas L on the expression of VEGF-C and VEGF-D in Hep G2 cells were observed. In order to provide experimental and theoretical basis for gene therapy of liver cancer, and provide experience for the prevention and treatment of other malignant tumors. Results 1. After the expression of DcR3 was silenced, the apoptosis of hepatoma cells was increased after adding FasL, and the cell cycle change increased in G _ 0 / G _ 1 phase and decreased in G _ 2 / M phase. After silencing the expression of DcR3, the activity of hepatoma cells decreased after adding Fas L. After down-regulating the expression of DC R3 and adding Fas L, hepatoma cells migrated and the invasion ability decreased further. The expression level of m RNA and protein of VEGF-C VEGF-D in hepatoma cells treated with Fas L was significantly decreased. 5. FAS L significantly decreased the growth rate of subcutaneous tumor formation and the expression of tumor-associated metastasis and invasion factor in mice. Conclusion: 1. FAS L combined with DC R3 silencing can increase apoptosis of hepatoma cells. 2. FAS L combined with DC R3 silencing can slow down the growth rate of hepatoma cells. Decreased migration and invasion. 3. FAS L combined with DC R3 silencing can induce the decrease of VEGF-D expression in hepatocellular carcinoma cells. 4. FAS L combined with DC R3 silencing may be a new research direction and thought for the treatment of liver cancer.
【學(xué)位授予單位】：首都醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R735.7

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本文編號：1964298