5-Aza-CdR對(duì)DU145前列腺癌細(xì)胞系RNF180基因去甲基化作用的初步研究
本文選題:-Aza-CdR + 前列腺癌; 參考:《中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年02期
【摘要】:目的通過觀察去甲基化藥物5-Aza-Cd R對(duì)DU145前列腺癌細(xì)胞系RNF180基因的影響,探討前列腺癌細(xì)胞系中腫瘤抑制基因RNF180失活的機(jī)制和原因。方法運(yùn)用MTT法檢測(cè)不同濃度(0、1、2、5、10、15、20μmo I/L)5-Aza-Cd R對(duì)前列腺癌細(xì)胞增殖能力的影響,同時(shí)篩選出1個(gè)最適藥物濃度(5μmo I/L);分別采用Western blotting、實(shí)時(shí)PCR、甲基化特異性PCR(MSP)法檢測(cè)最適藥物濃度處理前后前列腺癌細(xì)胞中RNF180的表達(dá)情況。結(jié)果在一定范圍內(nèi),5-Aza-Cd R對(duì)前列腺癌細(xì)胞DU145增殖能力的影響隨著藥物濃度的增加和藥物處理時(shí)間的增長而加強(qiáng)(P0.05);最適藥物濃度處理后的前列腺癌細(xì)胞中RNF180蛋白及m RNA的表達(dá)量比處理前明顯升高(P0.05),而啟動(dòng)子區(qū)的甲基化程度明顯降低。結(jié)論 5-Aza-Cd R能夠逆轉(zhuǎn)RNF180基因在DU145前列腺癌細(xì)胞中的高甲基化狀態(tài),解除RNF180基因表達(dá)沉默的狀態(tài)。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism and causes of the inactivation of the tumor suppressor gene RNF180 in the prostate cancer cell line by observing the effect of the demethylation drug 5-Aza-Cd R on the RNF180 gene of the DU145 prostate cancer cell line. Methods the effect of the MTT assay on the proliferation of prostate cancer cells with different concentrations (0,1,2,5,10,15,20 Mu Mo I/L) 5-Aza-Cd R was detected. 1 optimal drug concentrations (5 mo I/L) were selected, and Western blotting, real-time PCR, and methylation specific PCR (MSP) method were used to detect the expression of RNF180 in the prostate cancer cells before and after the optimal concentration of drug concentration. The effect of 5-Aza-Cd R on the DU145 proliferation of prostate cancer cells was increased with the increase of drug concentration in a certain range. And the growth of the time of drug treatment increased (P0.05); the expression of RNF180 protein and m RNA in the prostate cancer cells after treatment with optimal drug concentration was significantly higher than that before treatment (P0.05), while the degree of methylation in the promoter region decreased significantly. Conclusion 5-Aza-Cd R can reverse the hypermethylation status of RNF180 gene in the DU145 prostate cancer cells. It relieves the state of RNF180 gene expression silencing.
【作者單位】: 錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院泌尿外科;
【分類號(hào)】:R737.25
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,本文編號(hào):1950312
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