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順鉑誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在耐藥喉癌細(xì)胞中的作用

發(fā)布時(shí)間:2018-05-27 11:39

  本文選題:上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化 + 順鉑; 參考:《臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志》2017年23期


【摘要】:目的:觀察順鉑(CDDP)誘導(dǎo)的人喉癌耐藥細(xì)胞(hep-2/CDDP)中的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)情況,探討EMT在喉癌順鉑耐藥中的機(jī)制。方法:利用hep-2細(xì)胞和前期培養(yǎng)的hep-2/CDDP細(xì)胞株;Transwell、劃痕實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞的侵襲遷移能力;分別提取人喉癌順鉑耐藥細(xì)胞hep-2/CDDP及其親代細(xì)胞hep-2mRNA、總蛋白,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)、Western blot方法檢測上皮表型E-cadherin、Zo-1,上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)錄因子Snail、Slug、Twist1,間質(zhì)表型分子Vimentin mRNA及蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:Transwell結(jié)果顯示耐藥細(xì)胞穿過基質(zhì)膠的數(shù)量高于親本細(xì)胞(P0.05),劃痕實(shí)驗(yàn)示hep-2/CDDP細(xì)胞劃痕愈合面積百分比高于hep-2細(xì)胞(P0.05),hep-2/CDDP細(xì)胞上皮表型E-cad、Zo-1mRNA及蛋白表達(dá)水平較hep-2細(xì)胞降低(均P0.01),EMT轉(zhuǎn)錄因子Snail、Slug表達(dá)水平較hep-2細(xì)胞升高(均P0.01),Twist1蛋白水平表達(dá)無明顯變化(P0.05),間質(zhì)表型Vimentin mRNA及蛋白表達(dá)水平較hep-2細(xì)胞升高(均P0.01)。結(jié)論:hep-2細(xì)胞的耐藥性和侵襲遷移能力改變與順鉑誘導(dǎo)的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)變可能有關(guān),抑制EMT相關(guān)通路可能為逆轉(zhuǎn)喉癌順鉑耐藥提供新思路。
[Abstract]:Aim: to investigate the mechanism of EMT in cisplatin induced resistance to cisplatin in human laryngeal cancer cell line hep-2 / CDDP. Methods: the invasive and migration ability of hep-2 cells and hep-2/CDDP cell lines were tested by scratch test, and the total proteins of hep-2/CDDP cells and their parental cells, hep-2mRNAs, were extracted, respectively. The expression of E-cadherinine Zo-1, the transcriptional factor Snail-SlugSlugt1, the Vimentin mRNA and protein expression of the mesenchymal phenotypic molecules were detected by real-time fluorescence quantitative PCR- RT-qPCR- blot. The expression of E-cadherinine Zo-1, the transcriptional factor Slug1, and the expression of Vimentin mRNA and protein were detected. Results the results showed that the number of drug resistant cells passing through matrix glue was higher than that of parent cells P0.05.The scratch test showed that the percentage of scratch healing area of hep-2/CDDP cells was higher than that of hep-2 cells. The expression level of E-cadhe Zo-1 mRNA and protein in the epithelial phenotype of hep-2 cells was lower than that of hep-2 cells. The expression of Slug, a transcription factor of P0.01EMT, was higher than that of hep-2 cells. The expression of Twist1 protein was not changed significantly. The expression of Vimentin mRNA and protein in stromal cells was higher than that in hep-2 cells (all P0.01). Conclusion the changes of drug resistance and invasion and migration in the cell line may be related to the epithelial interstitial transition induced by cisplatin. Inhibition of EMT related pathway may provide a new way to reverse cisplatin resistance in laryngeal carcinoma.
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學(xué)耳鼻咽喉頭頸外科研究所廣州市耳鼻咽喉頭頸外科醫(yī)院廣州市第十二人民醫(yī)院;
【基金】:廣州市喉癌臨床醫(yī)學(xué)與轉(zhuǎn)化中心試點(diǎn)建設(shè)項(xiàng)目(No:201604020005)
【分類號】:R739.65

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本文編號:1941922

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