長鏈非編碼基因MALAT1在乳腺癌組織中的表達及其甲基化情況的研究
本文選題:MALAT1 + 甲基化 ; 參考:《昆明醫(yī)科大學》2015年碩士論文
【摘要】:目的:通過實時熒光定量RT-PCR(Real Time-PCR, RT-PCR)技術,研究在乳腺癌及癌旁正常乳腺組織中MALAT1基因的表達情況,經甲基化特異性PCR(Methylmion Specific PCR, MSP)對乳腺癌和癌旁正常乳腺組織兩組間MALAT1基因DNA甲基化的表達差異進行檢測,對MALAT1基因DNA甲基化在乳腺癌中的表達進行分析研究,探討MALAT1基因在乳腺癌中的表達與甲基化的關系及相關臨床意義。方法:采集乳腺癌組織及癌旁正常乳腺組織30對,所采集癌旁正常乳腺組織距離原發(fā)惡性腫瘤組織應該至少大于50mm,并且在同側乳腺不同象限取材。分別提取總RNA,進行逆轉錄,對MALAT1在兩組中的表達水平行RT-PCR方法定量,檢定乳腺癌組織、癌旁正常乳腺組織中,MALAT1基因的表達情況:選用離心柱法采集乳腺癌組織、癌旁正常乳腺組織的基因組DNA,對乳腺癌組織和癌旁正常乳腺組織使用MSP法檢查MALAT1的DNA甲基化情況;使用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行處理,結果行統(tǒng)計學分析。結果:1.在30例配對乳腺癌組織及癌旁正常乳腺組織中,MALAT1在乳腺癌組織中的表達(6.56±2.64)顯著較癌旁正常標本(4.84±3.82)高,有顯著統(tǒng)計學差異(P=0.046)。2.30例乳腺癌組織中出現(xiàn)甲基化5例,未甲基化25例;30例癌旁正常乳腺組織中出現(xiàn)甲基化12例,未甲基化18例,具有顯著統(tǒng)計學差異(P=0.04)。結論:1.乳腺癌組織中MALAT1表達水平較癌旁正常乳腺組織中明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義,提示MALAT1在乳腺癌組織中表達上調與乳腺癌的發(fā)展有關,可能起到促進乳腺癌發(fā)展的作用。2.乳腺癌組織中MALAT1甲基化水平較癌旁正常乳腺組織中明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義,MALAT1基因啟動子甲基化是導致MALAT1基因表達下調的重要機制,而且MALAT1基因啟動子的異常甲基化及MALAT1基因的功能失活對乳腺癌的發(fā)展起抑制作用,MALAT1甲基化可能是一個有價值的分子標志。
[Abstract]:Objective: to study the expression of MALAT1 gene in breast cancer and adjacent normal breast tissues by real-time quantitative RT-PCR(Real Time-PCR (RT-PCR) technique. The difference of DNA methylation of MALAT1 gene between breast cancer and adjacent normal breast tissues was detected by methylation specific PCR(Methylmion Specific PCR, MSP), and the expression of MALAT1 gene DNA methylation in breast cancer was studied. To investigate the relationship between methylation and MALAT1 gene expression in breast cancer and its clinical significance. Methods: 30 pairs of breast cancer tissues and adjacent normal breast tissues were collected. The adjacent normal breast tissues should be at least more than 50 mm from the primary malignant tumor tissues, and the samples were obtained from different quadrants of the ipsilateral breast. Total RNAs were extracted, reverse transcription was performed, the expression level of MALAT1 in the two groups was quantified by RT-PCR method, and the expression of MALAT1 gene in breast cancer tissues and adjacent normal breast tissues was verified. The DNA methylation of MALAT1 in breast cancer tissues and adjacent normal breast tissues was detected by MSP method, and the experimental data were processed by SPSS17.0 software, and the results were analyzed statistically. The result is 1: 1. The expression of MALAT1 in 30 matched breast cancer tissues and adjacent normal breast tissues was significantly higher than that in adjacent normal tissues (4.84 鹵3.82). There was significant difference in methylation in 5 cases of breast cancer tissues. There were 12 cases of nonmethylation and 18 cases of unmethylation in 30 cases of normal breast tissue adjacent to carcinoma. There was a significant difference between them (P < 0.04). Conclusion 1. The expression of MALAT1 in breast cancer tissues was significantly higher than that in adjacent normal breast tissues, indicating that the up-regulation of MALAT1 expression in breast cancer tissues was related to the development of breast cancer and might play a role in promoting the development of breast cancer. The level of MALAT1 methylation in breast cancer tissues was significantly lower than that in adjacent normal breast tissues, and the difference was statistically significant. The promoter methylation of MALAT1 gene was an important mechanism leading to the down-regulation of MALAT1 gene expression. The abnormal methylation of MALAT1 promoter and the functional inactivation of MALAT1 gene may inhibit the development of breast cancer. MALAT1 methylation may be a valuable molecular marker.
【學位授予單位】:昆明醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R737.9
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本文編號:1940507
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