本文選題：造血祖細胞激酶 + 乳腺癌細胞株�。� 參考：《吉林大學學報(醫(yī)學版)》2017年05期

【摘要】：目的:構(gòu)建造血祖細胞激酶1(HPK1)慢病毒載體,探討HPK1過表達對乳腺癌MCF-7和MDAMB-231細胞增殖和凋亡的作用,闡明其可能的機制。方法:通過過表達HPK1的慢病毒感染細胞,獲得穩(wěn)定表達HPK1的細胞系(MCF-7-HPK1和MDA-MB-231-HPK1),將2個細胞系分別分為3組,即空白組、對照組(空載體組)和過表達組;分別采用RT-PCR法和Western blotting法檢測乳腺癌細胞中HPK1mRNA和蛋白表達水平,MTT法檢測細胞增殖率,流式細胞術(shù)檢測細胞周期和凋亡率,Transwell法分析細胞的遷移能力,Western blotting法檢測caspase 3、PTEN、MMP-9、MMP-2、Ki-67和HPK1蛋白表達水平。結(jié)果:與空白組和對照組比較,乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231細胞過表達組中HPK1 mRNA和蛋白表達水平升高(P0.05),細胞增殖率明顯降低(P0.05),細胞凋亡率明顯升高(P0.05),穿越Matrigel的細胞數(shù)明顯減少(P0.05),MCF-7細胞周期阻斷在G1期;過表達組細胞中caspase 3、PTEN蛋白表達水平上調(diào)(P0.05),MMP-9、MMP-2、Ki-67蛋白表達水平降低(P0.05)。結(jié)論:HPK1過表達可抑制乳腺癌細胞MCF-7和MDA-MB-231的增殖及遷移并誘導凋亡,其可能與caspase 3、PTEN蛋白的表達上調(diào)及MMP-9、MMP-2和Ki-67蛋白的表達降低有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to construct the lentivirus vector of hematopoietic progenitor cell kinase 1 (HPK1), to investigate the effect of HPK1 overexpression on the proliferation and apoptosis of breast cancer MCF-7 and MDAMB-231 cells, and to elucidate its possible mechanism. Methods: MCF-7-HPK1 and MDA-MB-231-HPK1 cells with stable expression of HPK1 were obtained by lentivirus infection with overexpression of HPK1. The two cell lines were divided into three groups: blank group, control group (empty vector group) and overexpression group. RT-PCR assay and Western blotting assay were used to detect the expression of HPK1mRNA and protein in breast cancer cells. Cell cycle and apoptosis rate were detected by flow cytometry. The migration ability of the cells was analyzed by Transwell method. The expression of MMP-9, MMP-2, Ki-67 and HPK1 protein in caspase 3 PTEN was detected by Western blotting. Results: compared with blank group and control group, In the overexpression group of MCF-7 and MDA-MB-231 cells, the expression level of HPK1 mRNA and protein increased, the cell proliferation rate decreased significantly, the cell apoptosis rate increased significantly, and the number of cells passing through Matrigel significantly decreased the cell cycle blocking of MCF-7 cells in G1 phase. In overexpression group, the expression level of caspase _ 3 was up-regulated, and the expression of MMP-9, MMP-2 and Ki-67 was decreased. Conclusion the overexpression of HPK1 can inhibit the proliferation and migration of MCF-7 and MDA-MB-231 and induce apoptosis in breast cancer cells, which may be related to the up-regulation of caspase _ 3 PTEN protein expression and the decrease of MMP-9 / MMP-2 and Ki-67 protein expression.
【作者單位】： 鄭州大學第一附屬醫(yī)院超聲科;鄭州大學第一附屬醫(yī)院腫瘤科;鄭州大學第一附屬醫(yī)院生物細胞治療中心;鄭州大學第一附屬醫(yī)院綜合ICU;鄭州大學第一附屬醫(yī)院藥學部;
【基金】：河南省科技廳科技惠民計劃專項基金資助課題(2013GS410101);河南省科技廳重大科技專項基金資助課題(151100310800)
【分類號】：R737.9

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