本文選題：造血祖細(xì)胞激酶 + 乳腺癌細(xì)胞株��； 參考：《吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年05期

【摘要】：目的:構(gòu)建造血祖細(xì)胞激酶1(HPK1)慢病毒載體,探討HPK1過(guò)表達(dá)對(duì)乳腺癌MCF-7和MDAMB-231細(xì)胞增殖和凋亡的作用,闡明其可能的機(jī)制。方法:通過(guò)過(guò)表達(dá)HPK1的慢病毒感染細(xì)胞,獲得穩(wěn)定表達(dá)HPK1的細(xì)胞系(MCF-7-HPK1和MDA-MB-231-HPK1),將2個(gè)細(xì)胞系分別分為3組,即空白組、對(duì)照組(空載體組)和過(guò)表達(dá)組;分別采用RT-PCR法和Western blotting法檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞中HPK1mRNA和蛋白表達(dá)水平,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖率,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期和凋亡率,Transwell法分析細(xì)胞的遷移能力,Western blotting法檢測(cè)caspase 3、PTEN、MMP-9、MMP-2、Ki-67和HPK1蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:與空白組和對(duì)照組比較,乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞過(guò)表達(dá)組中HPK1 mRNA和蛋白表達(dá)水平升高(P0.05),細(xì)胞增殖率明顯降低(P0.05),細(xì)胞凋亡率明顯升高(P0.05),穿越Matrigel的細(xì)胞數(shù)明顯減少(P0.05),MCF-7細(xì)胞周期阻斷在G1期;過(guò)表達(dá)組細(xì)胞中caspase 3、PTEN蛋白表達(dá)水平上調(diào)(P0.05),MMP-9、MMP-2、Ki-67蛋白表達(dá)水平降低(P0.05)。結(jié)論:HPK1過(guò)表達(dá)可抑制乳腺癌細(xì)胞MCF-7和MDA-MB-231的增殖及遷移并誘導(dǎo)凋亡,其可能與caspase 3、PTEN蛋白的表達(dá)上調(diào)及MMP-9、MMP-2和Ki-67蛋白的表達(dá)降低有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to construct the lentivirus vector of hematopoietic progenitor cell kinase 1 (HPK1), to investigate the effect of HPK1 overexpression on the proliferation and apoptosis of breast cancer MCF-7 and MDAMB-231 cells, and to elucidate its possible mechanism. Methods: MCF-7-HPK1 and MDA-MB-231-HPK1 cells with stable expression of HPK1 were obtained by lentivirus infection with overexpression of HPK1. The two cell lines were divided into three groups: blank group, control group (empty vector group) and overexpression group. RT-PCR assay and Western blotting assay were used to detect the expression of HPK1mRNA and protein in breast cancer cells. Cell cycle and apoptosis rate were detected by flow cytometry. The migration ability of the cells was analyzed by Transwell method. The expression of MMP-9, MMP-2, Ki-67 and HPK1 protein in caspase 3 PTEN was detected by Western blotting. Results: compared with blank group and control group, In the overexpression group of MCF-7 and MDA-MB-231 cells, the expression level of HPK1 mRNA and protein increased, the cell proliferation rate decreased significantly, the cell apoptosis rate increased significantly, and the number of cells passing through Matrigel significantly decreased the cell cycle blocking of MCF-7 cells in G1 phase. In overexpression group, the expression level of caspase _ 3 was up-regulated, and the expression of MMP-9, MMP-2 and Ki-67 was decreased. Conclusion the overexpression of HPK1 can inhibit the proliferation and migration of MCF-7 and MDA-MB-231 and induce apoptosis in breast cancer cells, which may be related to the up-regulation of caspase _ 3 PTEN protein expression and the decrease of MMP-9 / MMP-2 and Ki-67 protein expression.
【作者單位】： 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院超聲科;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤科;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院生物細(xì)胞治療中心;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院綜合ICU;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥學(xué)部;
【基金】：河南省科技廳科技惠民計(jì)劃專項(xiàng)基金資助課題(2013GS410101);河南省科技廳重大科技專項(xiàng)基金資助課題(151100310800)
【分類號(hào)】：R737.9

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本文編號(hào)：1932412