miR-6867及其宿主基因RAPGEFL1在食管鱗狀細(xì)胞癌組織和細(xì)胞系中的表達(dá)及甲基化狀態(tài)
本文選題:食管鱗狀細(xì)胞癌 + Rap型鳥苷酸交換因子基因; 參考:《中國(guó)腫瘤生物治療雜志》2017年10期
【摘要】:目的:檢測(cè)miR-6867及其宿主基因Rap型鳥苷酸交換因子1(rap guanine nucleotide exchange factor like 1,RAPGEFL1)在食管癌細(xì)胞系及食管鱗狀細(xì)胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)組織中的表達(dá)水平及甲基化狀態(tài),并探討其在ESCC發(fā)生發(fā)展中的作用。方法:選取河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院2014年1月至2016年1月收治的ESCC手術(shù)患者組織標(biāo)本87例。應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)miR-6867及RAPGEFL1在食管癌細(xì)胞系和ESCC組織及其相應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)水平,分析miR-6867和RAPGEFL1基因表達(dá)之間的相關(guān)性。應(yīng)用甲基化特異性PCR法(MSP)檢測(cè)RAPGEFL1在食管癌細(xì)胞系和ESCC組織及其相應(yīng)癌旁組織中的甲基化狀態(tài)。結(jié)果:miR-6867在ESCC組織中的相對(duì)表達(dá)量顯著低于其相應(yīng)癌旁組織(P0.05),并與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期有關(guān)(P0.05);RAPGEFL1基因在ESCC組織中的表達(dá)顯著低于其相應(yīng)癌旁組織(P0.05),并與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織分化程度及TNM分期相關(guān)(P0.05);miR-6867與RAPGEFL1在ESCC組織中的表達(dá)呈明顯正相關(guān)(P0.05)。5-氮雜-2'-脫氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)處理后,4種食管癌細(xì)胞系中miR-6867和RAPGEFL1基因的表達(dá)均增高,并且其甲基化程度明顯降低。RAPGEFL1基因在ESCC組織中的甲基化率顯著高于其相應(yīng)癌旁組織(P0.05),并與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織分化程度及TNM分期有關(guān)(P0.05)。結(jié)論:ESCC的發(fā)生發(fā)展可能與miR-6867和RAPGEFL1的異常低表達(dá)及RAPGEFL1高甲基化狀態(tài)有關(guān),miR-6867與RAPGEFL1表達(dá)具有一致性,且RAPGEFL1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化可能是導(dǎo)致miR-6867與RAPGEFL1表達(dá)沉默的機(jī)制之一。
[Abstract]:Objective: to detect the expression level and methylation status of miR-6867 and its host gene Rap type guanosine exchange factor 1 (RAP guanine nucleotide exchange factor like 1, RAPGEFL1) in esophageal carcinoma cell lines and esophageal squamous cell carcinoma (esophageal squamous cell), and to explore its role in the development of esophageal squamous cell carcinoma. Methods: 87 cases of ESCC operation in the fourth hospital of Hebei Medical University were selected from January 2014 to January 2016. The expression of miR-6867 and RAPGEFL1 in esophageal cancer cell lines and ESCC tissues and their adjacent tissues were detected by real time fluorescence quantitative PCR (qRT-PCR), and the correlation between the expression of miR-6867 and RAPGEFL1 gene was analyzed. Using methylation specific PCR (MSP) to detect the methylation status of RAPGEFL1 in esophageal cancer cell lines and ESCC tissues and their corresponding para cancerous tissues. Results: the relative expression of miR-6867 in ESCC tissues is significantly lower than that of the corresponding para cancerous tissue (P0.05), and is associated with lymph node metastasis and TNM staging (P0.05); RAPGEFL1 gene is in ESCC tissue. The expression in the medium was significantly lower than that of its corresponding paracancerous tissue (P0.05), which was associated with lymph node metastasis, the degree of tissue differentiation and TNM staging (P0.05); miR-6867 and RAPGEFL1 were positively correlated with the expression of ESCC (P0.05).5- nitrogen heterozygous deoxycytidine (5-Aza-2'-deoxycytidine, 5-Aza-dC), and 4 types of esophageal cancer cell lines The expression of 1 gene increased, and the methylation degree obviously decreased the methylation rate of.RAPGEFL1 gene in ESCC tissue significantly higher than that of its corresponding para cancerous tissue (P0.05), and was associated with lymph node metastasis, the degree of tissue differentiation and TNM staging (P0.05). Conclusion: the occurrence of ESCC may be associated with abnormal low expression of miR-6867 and RAPGEFL1 and RAPGEFL1. The state of hypermethylation is related to the expression of miR-6867 and RAPGEFL1, and methylation of the promoter region of the RAPGEFL1 gene may be one of the mechanisms that lead to the silence of the expression of miR-6867 and RAPGEFL1.
【作者單位】: 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院河北省腫瘤研究所病理實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81572441) 河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題資助項(xiàng)目(No.20170701,No.20170700)~~
【分類號(hào)】:R735.1
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,本文編號(hào):1930062
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