本文選題：TRB + 過表達(dá)　； 參考：《東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年01期

【摘要】：目的:構(gòu)建TRB3真核表達(dá)重組質(zhì)粒,并用肝癌細(xì)胞MHCC-97H檢測其表達(dá)。方法:從肝癌組織中提取并擴(kuò)增TRB3基因的編碼區(qū),將其克隆到真核表達(dá)載體pcdh-CMV-MCS-GFP中,酶切并檢定,將克隆成功的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至MHCC-97H細(xì)胞中,用q PCR和Western Blot檢測TRB3的表達(dá)水平。結(jié)果與結(jié)論:成功擴(kuò)增了TRB3的編碼區(qū),并克隆至真核表達(dá)載體中;轉(zhuǎn)染后72、96 h,MHCC-97H細(xì)胞的TRB3 m RNA和蛋白表達(dá)顯著增高;成功構(gòu)建的TRB3過表達(dá)載體可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
[Abstract]:Aim: to construct the eukaryotic expression plasmid of TRB3 and detect its expression by MHCC-97H. Methods: the coding region of TRB3 gene was extracted from hepatocellular carcinoma and cloned into eukaryotic expression vector pcdh-CMV-MCS-GFP. The cloned plasmid was transfected into MHCC-97H cells by restriction endonuclease digestion. The expression level of TRB3 was detected by Q PCR and Western Blot. Results and conclusion: the coding region of TRB3 was amplified successfully and cloned into eukaryotic expression vector, the expression of TRB3 m RNA and protein in MHCC-97H cells was significantly increased after 72 ~ 96 h transfection, and the successfully constructed TRB3 overexpression vector could be used for further experiments.
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)上海一院臨床醫(yī)學(xué)院消化科;上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院消化科;上海交通大學(xué)附屬第九人民醫(yī)院消化科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81072007) 江蘇省研究生培養(yǎng)創(chuàng)新工程項(xiàng)目(SJLX15_0433)
【分類號】：R735.7

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本文編號：1908974