發(fā)布時(shí)間：2018-05-14 22:08

  本文選題：抗體藥物偶聯(lián)物(ADC) + 西妥昔單抗　； 參考：《南昌大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：目的:本實(shí)驗(yàn)擬從體外研究EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑(簡(jiǎn)稱抗體藥物偶聯(lián)物、ADC)對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的抑制作用及作用的細(xì)胞周期。方法:1、細(xì)胞抑制率:運(yùn)用CCK-8法檢測(cè)EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑(ADC)、西妥昔單抗、順鉑在不同濃度不同時(shí)間對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的體外抑制作用。2、細(xì)胞周期檢測(cè):A549細(xì)胞在EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑(ADC)、西妥昔單抗、順鉑不同濃度藥物作用24小時(shí)后,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期。結(jié)果:1、細(xì)胞抑制率結(jié)果:ADC組在低、中、高濃度對(duì)A549細(xì)胞均有明顯抑制作用,西妥昔單抗組對(duì)A549細(xì)胞有一定抑制作用。ADC與西妥昔單抗均為不同濃度時(shí)24小時(shí)細(xì)胞抑制率隨著濃度增加而增加,P0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。48小時(shí)低、中濃度抑制率隨著濃度增加而增加,P0.05。到高濃度時(shí)不隨時(shí)間和劑量的增加而增加,P0.05,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ADC與西妥昔單抗兩藥摩爾劑量接近時(shí),兩組在24、48小時(shí)比較,均為P0.01,有顯著差異。順鉑組低、中、高濃度對(duì)A549細(xì)胞均有明顯抑制作用。低、中濃度時(shí)隨著濃度和時(shí)間增加而增加,P0.05;中濃度與高濃度相同時(shí)間比,隨著濃度增加,P0.05。高濃度時(shí)隨著時(shí)間延長(zhǎng)抑制率無明顯增加,P0.05。當(dāng)ADC摩爾劑量約為順鉑的0.01時(shí),24h抑制率P0.05,無差異;48h抑制率P0.05,ADC作用較順鉑強(qiáng)。提示ADC,西妥昔單抗,順鉑與對(duì)照組比較對(duì)A549細(xì)胞均有抑制作用。在一定劑量范圍內(nèi)ADC與西妥昔單抗、順鉑對(duì)A549細(xì)胞抑制率均隨著濃度和時(shí)間的增加而增加,ADC作用明顯強(qiáng)于西妥昔單抗。在相同摩爾濃度下ADC作用明顯強(qiáng)于順鉑。2、細(xì)胞周期結(jié)果:ADC在不同濃度組與對(duì)照組比較,G2/M期細(xì)胞均明顯增多,G1和S期細(xì)胞均較對(duì)照組減少,P0.01,有顯著差異,提示ADC為G2/M期阻滯。西妥昔單抗不同濃度以G1期細(xì)胞為主,G1、S、G2期與對(duì)照組比較均無明顯差異P0.05。順鉑組不同濃度細(xì)胞各期與對(duì)照組比較,G1期細(xì)胞明顯增多,S、G2期細(xì)胞減少,P0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示為G1期阻滯。相同藥物不同濃度之間各期細(xì)胞比較P0.05,提示細(xì)胞周期的阻滯時(shí)期與藥物濃度無關(guān)。ADC與西妥昔單抗(兩藥分子量接近)相同摩爾濃度0.0134mmol/L各期比較,P0.01,提示ADC與西妥昔單抗阻滯周期不同。ADC 0.0134mmol/L與順鉑1.33 mmol/L(ADC摩爾數(shù)約為順鉑的0.01)各期比較,P0.01為顯著差異,提示ADC與順鉑阻滯周期不同。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)的抗體藥物偶聯(lián)物(EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑)對(duì)人肺癌A549細(xì)胞生長(zhǎng)有明顯抑制作用,抑制作用要強(qiáng)于西妥昔單抗與順鉑。EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑阻滯的細(xì)胞周期為G2/M期,與西妥昔單抗與順鉑阻滯周期不同。
[Abstract]:Aim: to investigate the inhibitory effect and cell cycle of EGFR monoclonal antibody coupled tubulin inhibitor (EGFR) on human lung cancer A549 cells in vitro. Methods: CCK-8 assay was used to detect EGFR McAb coupled tubulin inhibitor ADCA and cetuximab. The inhibitory effect of cisplatin on human lung cancer A549 cells in vitro was observed at different concentrations and at different times. Cell cycle analysis showed that the cells were treated with EGFR monoclonal antibody coupled with tubulin inhibitor, cetuximab and cisplatin for 24 hours. Cell cycle was measured by flow cytometry. Results the cell inhibition rate of the A549 cells was significantly inhibited in the low, middle and high concentration of the A549 cells in the small, middle and high concentration groups. Cetuximab group had a certain inhibitory effect on A549 cells. When the concentration of ADC and cetuximab were different, the inhibition rate of A549 cells increased with the increase of the concentration of cetuximab. The inhibition rate of A549 cells increased with the increase of concentration, which was significantly lower than that of the control group for 48 hours. The inhibition rate of medium concentration increased with the increase of concentration of A549 cells. At high concentration, there was no increase of P0.05 with the increase of time and dose. When the molar dose of ADC and cetuximab were close to each other, there was a significant difference between the two groups at 24: 48 hours. Low, medium and high concentrations of cisplatin inhibited A549 cells significantly. When the concentration is low and medium concentration increases with the increase of concentration and time, the P0.05 increases with the increase of the concentration and the ratio of the middle concentration to the high concentration is the same as that of the high concentration. At high concentration, the inhibition rate did not increase significantly with time prolongation. When the molar dose of ADC was about 0. 01% of cisplatin, the inhibition rate of P0. 05% was stronger than that of cisplatin at 48 h. These results suggest that ADC, cetuximab and cisplatin can inhibit A549 cells. The inhibitory rates of ADC and cetuximab and cisplatin on A549 cells increased with the increase of concentration and time. At the same molar concentration, the effect of ADC was significantly stronger than that of cisplatin. The cell cycle results showed that the G _ 2 / M phase cells in G _ 2 / M phase were significantly increased in different concentration groups compared with the control group, and the cells in G _ 1 and S phase were significantly lower than those in the control group, indicating that ADC was blocked in G _ 2 / M phase. The concentration of cetuximab in G 1 phase cells was not significantly different from that in control group (P 0.05). Compared with the control group, the cells of different concentrations in cisplatin group increased significantly in G _ 1 phase and decreased P _ (0.05) in S _ (2) G _ 2 phase, indicating that G _ 1 phase was blocked. P0.05 cell comparison between different concentrations of the same drug suggests that the cell cycle arrest period is not related to the concentration of the drug .ADCs are compared with cetuximab (the molecular weight of the two drugs are close) at the same molar concentration of P0.01, suggesting that ADC and cetuximab have the same molecular weight, indicating that the cell cycle arrest period is not related to the concentration of the drug. Compared with cisplatin (0.01 mol number of cisplatin 1.33 mmol/L(ADC), there were significant differences in the block cycles of McAb and cisplatin (P0.01). The results suggest that ADC is different from cisplatin in blocking cycle. Conclusion: the anti-EGFR monoclonal antibody coupled tubulin inhibitor in this study has a significant inhibitory effect on the growth of human lung cancer cell line A549. The inhibitory effect was stronger than that of cetuximab and cisplatin. EGFR monoclonal antibody blocked the cell cycle of G2 / M phase, which was different from that of cetuximab and cisplatin.
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R734.2

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本文編號(hào)：1889668